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MiR-650通过靶向结合磷酸烯醇丙酮酸羧激酶1促进口腔鳞状细胞癌细胞增殖和糖酵解
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作者 郭谊 韩炎 +3 位作者 周丽芝 王俊华 马跃 鲁大鹏 《解剖学杂志》 CAS 2024年第3期217-224,248,共9页
目的:分析miR-650是否靶向磷酸烯醇丙酮酸羧激酶1(PCK1)促进口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞增殖和糖酵解。方法:生物信息学筛选出差异表达且与细胞增殖、糖酵解有关的基因。构建稳定过表达PCK1的CAL-27和Tca8113细胞系,分成Vector组和PCK1组... 目的:分析miR-650是否靶向磷酸烯醇丙酮酸羧激酶1(PCK1)促进口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞增殖和糖酵解。方法:生物信息学筛选出差异表达且与细胞增殖、糖酵解有关的基因。构建稳定过表达PCK1的CAL-27和Tca8113细胞系,分成Vector组和PCK1组。构建稳定过表达miR-650的OSCC细胞,分成miR-NC组、miR-650组和miR-650+PCK1组。CCK-8和克隆形成检测各组细胞增殖能力。裸鼠成瘤实验检测瘤体质量、体积。免疫组织化学检测肿瘤组织中PCK1表达水平。免疫印迹测定各组细胞PCK1蛋白表达水平。葡萄糖和乳酸试剂盒检测各组细胞内葡萄糖和乳酸变化。数据库预测PCK1靶标,双荧光酶素报告实验进行验证。RT-qPCR测定转染后OSCC细胞中miR-650的表达。结果:PCK1在OSCC中表达下调,且与细胞增殖和糖酵解相关。与Vector组相比,PCK1组中PCK1蛋白水平升高;过表达PCK1抑制细胞增殖;过表达PCK1抑制裸鼠移植瘤体积和质量增长;过表达PCK1促进细胞葡萄糖产生和抑制其消耗,同时抑制乳酸产生。与癌旁组织相比,miR-650在OSCC中表达上调。数据库预测及双荧光酶素报告实验证实miR-650与PCK1的靶向关系。与miR-NC组相比,miR-650组中PCK1 mRNA和蛋白表达水平明显降低。miR-650通过调节PCK1表达,促进OSCC细胞增殖,调控细胞糖酵解。结论:miR-650可以通过靶向结合PCK1促进OSCC细胞增殖和糖酵解。 展开更多
关键词 口腔鳞状细胞癌 磷酸烯醇丙酮酸羧激酶1 增殖 糖酵解
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组织多肽特异性抗原联合癌抗原125检测在口腔癌诊断中的临床价值 被引量:2
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作者 李玉华 王海欣 +1 位作者 张爱君 吴景华 《山西医科大学学报》 CAS 2014年第2期137-139,共3页
目的探讨口腔癌患者血清中组织多肽特异性抗原(TPS)和癌抗原125(CA125)水平对口腔癌的临床诊断及病情监控的临床意义。方法用ELISA方法检测46例口腔癌和46例口腔良性肿瘤患者及46例健康对照者血清及唾液中TPS水平,同时用电化学发光法检... 目的探讨口腔癌患者血清中组织多肽特异性抗原(TPS)和癌抗原125(CA125)水平对口腔癌的临床诊断及病情监控的临床意义。方法用ELISA方法检测46例口腔癌和46例口腔良性肿瘤患者及46例健康对照者血清及唾液中TPS水平,同时用电化学发光法检测血清及唾液CA125水平。结果口腔癌组的TPS、CA125水平明显高于口腔良性肿瘤组和健康对照组(P<0.05);进展期口腔癌患者的血清及唾液中TPS和CA125明显高于稳定期患者(P<0.05)。治疗后不同预后患者的TPS和CA125浓度差异有统计学意义(P<0.05)。TPS联合CA125检测敏感性及特异性均高于TPS、CA125单独检测的敏感性及特异性。结论血清TPS联合CA125检测可作为口腔癌早期诊断的指标,对疾病的诊断及预后具有很高的临床价值。 展开更多
关键词 口腔癌 组织多肽特异性抗原 癌抗原125
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Toll样受体2对口腔癌Tca8113细胞增殖及凋亡的影响 被引量:3
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作者 王海欣 吴景华 +2 位作者 陈继科 郭谊 时建华 《山西医科大学学报》 CAS 2015年第2期152-154,共3页
目的探讨Toll样受体2(TLR2)在人舌鳞癌细胞Tca8113的表达情况及其对肿瘤细胞增殖和凋亡的影响。方法通过流式细胞术检测人舌癌Tca8113细胞中TLR2的表达情况;实验细胞分为实验组(加入TLR2阻断剂)及对照组(加入IgG抗体),实验组及对照组细... 目的探讨Toll样受体2(TLR2)在人舌鳞癌细胞Tca8113的表达情况及其对肿瘤细胞增殖和凋亡的影响。方法通过流式细胞术检测人舌癌Tca8113细胞中TLR2的表达情况;实验细胞分为实验组(加入TLR2阻断剂)及对照组(加入IgG抗体),实验组及对照组细胞培养24 h及48 h后,应用MTT及Western blot方法检测其增殖及凋亡情况,采用SPSS13.0统计软件对数据进行方差分析及t检验。结果流式细胞检测Tca8113细胞可见TLR2的表达;实验组经TLR2阻断24 h、48 h后其增殖较之对照组明显增加(P<0.05),但24 h与48 h比较,其增殖的变化不明显(P>0.05);同时经Western blot检测抗凋亡蛋白Bcl-2表达明显增加(P<0.05)。结论人舌鳞癌细胞Tca8113细胞表达TLR2受体并对肿瘤细胞呈现明显的抑制作用。 展开更多
关键词 舌鳞癌 TCA8113细胞 TLR2 Bcl-2
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Toll样受体2在口腔鳞癌中的表达及其作用机制
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作者 王海欣 吴景华 +2 位作者 陈继科 郭谊 时建华 《山西医科大学学报》 CAS 2015年第3期227-230,282,共5页
目的探讨TLR2在临床口腔鳞癌患者中的表达情况,以及TLR2在口腔鳞癌发生和发展过程中的作用,进而为临床口腔鳞癌的干预和治疗寻找新的治疗途径。方法无菌提取24例口腔鳞癌患者、24例良性肿瘤患者及24例对照组外周血单核细胞,利用实时定量... 目的探讨TLR2在临床口腔鳞癌患者中的表达情况,以及TLR2在口腔鳞癌发生和发展过程中的作用,进而为临床口腔鳞癌的干预和治疗寻找新的治疗途径。方法无菌提取24例口腔鳞癌患者、24例良性肿瘤患者及24例对照组外周血单核细胞,利用实时定量PCR及Western blot方法检测TLR2的表达情况,同时通过免疫组化技术来检测癌组织中的TLR2表达水平的差异;通过TLR2激动剂(弗氏完全佐剂)及弗氏不完全佐剂(阴性对照组)作用口腔鳞癌成瘤小鼠,观察其瘤体的生长及荷瘤小鼠的存活情况。结果口腔鳞癌患者外周血单核细胞中TLR2的表达较之对照组明显增加(P<0.05),同时TLR2表达水平在口腔鳞癌组织中也明显增强。注射弗氏佐剂组的小鼠瘤体的体质量为(1.42±0.43)g,较之空白对照组[(2.47±0.69)g]及阴性对照组(弗氏不完全佐剂组)[(2.94±0.87)g]明显降低,同时小鼠的生存期也明显延长(P<0.05)。结论口腔鳞癌患者外周血单核细胞及癌组织中TLR2的表达明显升高,同时TLR2的高表达具有明显的肿瘤抑制作用。 展开更多
关键词 口腔鳞癌 TLR2 免疫组化
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甲胎蛋白下调肝癌细胞对奥沙利铂化疗敏感性的作用 被引量:1
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作者 郭彬 吴景华 +1 位作者 王海欣 王志刚 《山西医科大学学报》 CAS 2016年第12期1057-1060,共4页
目的探讨甲胎蛋白(AFP)下调对肝癌细胞化疗敏感性的研究。方法选取2012-012014-12华北理工大学附属医院收治的经病理诊断确诊的HCC患者56例,采用电化学发光分析法检测肝癌患者化疗前血清中AFP水平;培养正常肝脏细胞L02细胞及肝癌细胞H... 目的探讨甲胎蛋白(AFP)下调对肝癌细胞化疗敏感性的研究。方法选取2012-012014-12华北理工大学附属医院收治的经病理诊断确诊的HCC患者56例,采用电化学发光分析法检测肝癌患者化疗前血清中AFP水平;培养正常肝脏细胞L02细胞及肝癌细胞Hep G2细胞,提取细胞蛋白后Western blot检测L02细胞及Hep G2细胞中AFP的表达情况;siRNA技术敲低Hep G2细胞AFP的表达,Western blot检测奥沙利铂诱导敲低AFP表达肝癌细胞的凋亡情况;MTT法测定AFP对Hep G2细胞增殖的影响。结果肝癌患者经奥沙利铂介入化疗未缓解组血清中AFP的水平[(603.60±237.39)ng/ml]明显高于部分缓解组[(482.21±198.99)ng/ml]及完全缓解组[(358.25±143.22)ng/ml](P〈0.05)。Western blot检测显示在正常肝脏细胞L02中AFP没有表达,而在Hep G2细胞中AFP明显高表达。肝癌细胞Hep G2成功阻断AFP表达后,加入奥沙利铂作用24 h后,Bcl-2的表达量较之Hep G2明显降低,Caspase-3的表达量显著升高;MTT检测显示干扰AFP表达的Hep G2细胞经奥沙利铂作用后的细胞增殖抑制率明显高于奥沙利铂作用后的Hep G2细胞[(71.06±11.22)%vs(50.56±9.98)%,P〈0.05]。结论 AFP可以显著下调肝癌细胞对奥沙利铂化疗的凋亡敏感性和增殖抑制率。 展开更多
关键词 甲胎蛋白 肝癌 凋亡 化疗敏感性
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A族链球菌感染巨噬细胞激活TLR2及TLR4表达的研究
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作者 王海欣 陈继科 +2 位作者 郭宜 时建华 吴景华 《山西医科大学学报》 CAS 2015年第1期21-24,100,共5页
目的通过分析A族链球菌(GAS)感染巨噬细胞后TLR2及TLR4的活化情况,以此来研究GAS感染后产生炎症反应的信号通路,为GAS感染巨噬细胞的预防及治疗奠定基础。方法 GAS及热灭活GAS以感染复数(MOI)为100∶1感染小鼠巨噬细胞RAW264.7细胞后1,2... 目的通过分析A族链球菌(GAS)感染巨噬细胞后TLR2及TLR4的活化情况,以此来研究GAS感染后产生炎症反应的信号通路,为GAS感染巨噬细胞的预防及治疗奠定基础。方法 GAS及热灭活GAS以感染复数(MOI)为100∶1感染小鼠巨噬细胞RAW264.7细胞后1,2,4,6 h,提取总RNA采用real-time PCR技术检测TLR2/4的表达情况;同时GAS及热灭活的GAS注射C57小鼠腹腔,24 h后分离腹腔巨噬细胞并提取蛋白,利用Western blot及免疫荧光技术对TLR2和TLR4的表达量进行分析。结果巨噬细胞表面TLR2及TLR4在GAS感染后1 h活化不明显,但作用2 h后TLR2及TLR4表达明显升高(P<0.05),4 h时达到高峰,6 h后开始降低。热灭活GAS感染巨噬细胞TLR2的表达与GAS感染比较未见到统计学差异(P>0.05),但巨噬细胞表面TLR4的表达与GAS组具有明显的差异(P<0.05)。结论 GAS感染小鼠巨噬细胞可同时激活TLR2及TLR4受体,其中TLR4受体主要通过位于GAS表面及其分泌的活性蛋白成分激活,TLR2受体则主要由其菌体成分进行活化。 展开更多
关键词 GAS 巨噬细胞 TLR2 TLR4
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