二磷酸盐和骨碎补总黄酮对诱导后成骨细胞影响的实验研究 被引量：15

1

作者 田坤 尹文哲 +2 位作者 刘伟 薛震 赵金东 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 2007年第8期559-563,共5页

目的探索二磷酸盐和骨碎补总黄酮联合作用如何在分子水平发挥作用于成骨细胞,揭示其效果如何。方法使用诱导方法作用于骨髓基质干细胞,使之转化为成骨细胞;用RT-PCR检验成骨细胞;不同浓度的二磷酸盐或骨碎补总黄酮配制成条件培养基,作... 目的探索二磷酸盐和骨碎补总黄酮联合作用如何在分子水平发挥作用于成骨细胞,揭示其效果如何。方法使用诱导方法作用于骨髓基质干细胞,使之转化为成骨细胞;用RT-PCR检验成骨细胞;不同浓度的二磷酸盐或骨碎补总黄酮配制成条件培养基,作用于成骨细胞,并分析生长曲线,分析细胞基因碱性磷酸酶（alkaline phosphatase ALP）和胶原酶Ⅰ（collagenase colⅠ）表达情况。结果骨髓基质细胞经过4周诱导可转化为表达colⅠ和ALP的成骨细胞,经过生长曲线分析,二磷酸盐和骨碎补总黄酮10^-4^-10-6mmol·L^-1时,对诱导后的成骨细胞有抑制作用;10^-8mmol·L^-1有促进作用;10^-10-10^-12mmol·L^-1不明显,其中10^-8mmol·L^-1作用最强;基因分析后,发现二磷酸盐和骨碎补总黄酮促进成骨细胞表达colⅠ和ALP,且两者合用效果大于单独用药。结论二磷酸盐和骨碎补总黄酮合用均可促进成骨细胞基因表达,且两者合用效果大于单独用药。 展开更多

关键词 骨髓基质干细胞 成骨诱导 二磷酸盐 骨碎补总黄酮

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大鼠实验性急性胰腺炎动物模型的建立 被引量：7

2

作者 李涛 王海燕 +4 位作者 刘丽玲 张新臣 郭守利 王海霞 林彦 《中国比较医学杂志》 CAS 2003年第6期358-361,共4页

目的　利用手术方法建立大鼠实验性急性胰腺炎动物模型。方法　 5 6只Wistar大鼠 ,随机分为 3组 ,实验组 :结扎胆总管末端 ;对照组 :按Nevalainen法 ,结扎胆总管开口远、近各 1cm的十二指肠 ;正常组 :正常Wist ar大鼠。实验组与对照组... 目的　利用手术方法建立大鼠实验性急性胰腺炎动物模型。方法　 5 6只Wistar大鼠 ,随机分为 3组 ,实验组 :结扎胆总管末端 ;对照组 :按Nevalainen法 ,结扎胆总管开口远、近各 1cm的十二指肠 ;正常组 :正常Wist ar大鼠。实验组与对照组分别于术后第 10、2 4、4 8h采血测定血清淀粉酶、血清钙及血糖 ,观察胰腺大体病理变化并作组织学检查。结果　实验组及对照组大鼠的血清淀粉酶显著高于正常组 ,血清钙显著低于正常组 ,而血糖差异不显著。结论　经生化分析及组织学检查提示急性胰腺炎 (AP)动物模型建立。 展开更多

关键词 大鼠 急性胰腺炎 动物模型 手术 AP 病理学

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B淋巴母细胞呈递来源于乙肝病毒聚合酶和X蛋白的HBV多肽质谱分析

3

作者 李佳琪 汝佳秋 +3 位作者 鞠晓梅 郭梦蕊 曹馨阳 张淑云 《中国免疫学杂志》 北大核心 2025年第2期424-432,I0001-I0029,共38页

目的:应用质谱分析技术及生物信息学技术分析人永生化B淋巴细胞(BLCLs)呈递的来源于Pol和X蛋白的HBV多肽,筛选出有效的T细胞表位,为治疗性疫苗的开发奠定基础。方法:构建含1.2倍HBVC2亚型的全基因组表达质粒,将其通过电转法转染至BLCLs,... 目的:应用质谱分析技术及生物信息学技术分析人永生化B淋巴细胞(BLCLs)呈递的来源于Pol和X蛋白的HBV多肽,筛选出有效的T细胞表位,为治疗性疫苗的开发奠定基础。方法:构建含1.2倍HBVC2亚型的全基因组表达质粒,将其通过电转法转染至BLCLs,LC-MS/MS法分离鉴定HBV多肽,生物信息学预测多肽序列的致敏性、抗原性、毒性、HLA分子亲和力及多肽HLA-Ⅰ类复合物与特异性T细胞的结合能力,并检索已报道序列。结果:对5株携带HBVC2亚型表达重组体的BLCLs(BLCLs-1~BLCLs-5)裂解液中的HBV多肽进行分析,成功分离鉴定出141条序列长度不少于8个氨基酸残基(≥8 aa)的多肽,其中133条来自Pol,8条来自X蛋白。通过对141条HBV多肽进行致敏性、抗原性和毒性分析,筛选出50条具有抗原性、无毒性和致敏性的HBV多肽(其中47条来自Pol,3条来自X蛋白),用于与HLA-Ⅰ、Ⅱ类分子的亲和力分析,以及多肽HLA-Ⅰ类复合物与特异性T细胞结合能力的预测。在这些多肽中,37条与HLA-Ⅰ、Ⅱ类分子相应基因型有亲和力。最终获得了37条具有抗原性、无毒性和致敏性,且与HLA-Ⅰ、Ⅱ类分子IC_(50)<500 nmol/L的多肽,这些多肽与相应基因型有亲和力,但未见报道,可作为潜在表位继续探索。最后通过对141条多肽进行株内株间共同、包含、重叠或邻近序列分析,形成了15个HBV多肽热点核心区域,有7条核心区域序列与相应基因型限制的具有抗原性、无毒性和致敏性,IC_(50)<500 nmol/L的多肽亲和力核心序列重叠不少于8个氨基酸,可以优先用于候选T细胞表位进行后续研究。结论:成功分离鉴定出来源于Pol和X蛋白的多肽,筛选出潜在的T细胞表位。 展开更多

关键词 HBV 多肽 Pol蛋白 X蛋白 质谱 生物信息学

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提高实验用家兔产仔数的技术及管理 被引量：1

4

作者 李永明 王海霞 夏长友 《畜牧兽医科技信息》 2008年第8期44-45,共2页

常用的实验用家兔主要有日本大耳白兔和新西兰兔两个品种，因其繁殖力强，年平均产仔5—7胎，每胎产仔约5-12只，普通环境下就能满足实验用家兔生长的基本要求，因而在科研、教学、移植等各种实验中广泛使用。但由于家兔的生长繁殖受温... 常用的实验用家兔主要有日本大耳白兔和新西兰兔两个品种，因其繁殖力强，年平均产仔5—7胎，每胎产仔约5-12只，普通环境下就能满足实验用家兔生长的基本要求，因而在科研、教学、移植等各种实验中广泛使用。但由于家兔的生长繁殖受温度、湿度、光照、噪音等多方面的影响，其最主要的影响因素是饲养管理水平及配种技术， 展开更多

关键词 饲养管理水平 配种技术 产仔数 家兔 实验 日本大耳白兔 生长繁殖 新西兰兔

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PDGF-BB对成年雌性大鼠成骨细胞雌激素受体α蛋白质表达影响的实验研究

5

作者 荣杰生 陶树清 +5 位作者 张滨 陶天遵 刘伟 张淑云 杜博 金茜 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 2006年第4期338-341,345,共5页

目的通过研究PDGFBB与ERα的关系,探讨PDGFBB在骨代谢中的作用机理,并对其在骨质疏松症中的应用前景进行展望。方法①利用酶消化法分离培养成年雌性大鼠的成骨细胞;②对培养的成骨细胞及其雌激素受体α进行鉴定;③分别加入浓度为0ngml、... 目的通过研究PDGFBB与ERα的关系,探讨PDGFBB在骨代谢中的作用机理,并对其在骨质疏松症中的应用前景进行展望。方法①利用酶消化法分离培养成年雌性大鼠的成骨细胞;②对培养的成骨细胞及其雌激素受体α进行鉴定;③分别加入浓度为0ngml、0.1ngml、1ngml、10ngml的PDGFBB,共同培养7d,并设阳性对照组和阴性对照组;④Westernblotting化学发光法检测ERα蛋白质,GIS2010凝胶图象处理系统分析结果。结果①培养的细胞为成骨细胞,免疫组化显示ERα位于胞核;②SDSPAGE电泳显示在66kD处有清晰的蛋白条带;③Westernblot显示10ngml组、1ngml组、0.1ngml组ERα蛋白条带较0ngml组清晰,且10ngml组最明显。结论PDGFBB具有促进成骨细胞雌激素受体α蛋白表达的作用,雌激素受体α蛋白含量随着PDGFBB浓度的增加而呈增加的趋势。 展开更多

关键词 成骨细胞 雌激素受体Α 血小板衍生生长因子BB 蛋白质表达

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对大鼠胰岛两种不同分离纯化方法的实验研究

6

作者 王海霞 郭守利 +2 位作者 林彦 李涛 王海燕 《中国实验动物学杂志》 CAS 2002年第5期309-311,共3页

目的　选择最佳鼠胰岛的制备方法。方法　采用不同的胶原酶消化法及不连续密度梯度纯化法。结果　Dextran法和Ficoll法分离纯化出胰岛细胞成活率无明显差异 ,且价格相差数十倍。

关键词 大鼠 胰岛 分离 纯化 细胞

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宫颈癌放疗前后肿瘤细胞凋亡及其相关基因的变化 被引量：10

7

作者 董广璐 张淑云 +1 位作者 邢丽娜 郑淑香 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2004年第19期1098-1100,共3页

目的:探讨宫颈癌组织放疗前后肿瘤细胞凋亡及凋亡调节基因p53、bcl-2和bax蛋白表达的变化及意义。方法:选择未经治疗的宫颈癌患者20例为试验对象,采集放疗前和放疗10Gy后宫颈癌组织标本,用原位DNA切口末端标记(TUNEL)法检测凋亡细胞;单... 目的:探讨宫颈癌组织放疗前后肿瘤细胞凋亡及凋亡调节基因p53、bcl-2和bax蛋白表达的变化及意义。方法:选择未经治疗的宫颈癌患者20例为试验对象,采集放疗前和放疗10Gy后宫颈癌组织标本,用原位DNA切口末端标记(TUNEL)法检测凋亡细胞;单克隆抗体免疫组化SABC法检测细胞凋亡相关基因p53、bcl-2和bax的蛋白表达水平。结果:1)在宫颈癌放疗前后,肿瘤细胞凋亡阳性率和平均凋亡指数分别为25.00％和0.11％、75.00％和3.40％,放疗前后有显著性差异(P<0.01);2)放疗前肿瘤细胞凋亡相关基因p53、bax和bcl-2蛋白表达阳性率分别为55%、10％和20％,而放疗后分别为25％、60%和25％,放疗后p53蛋白表达减少,bax蛋白明显增加,bcl-2蛋白无明显变化。结论:放射治疗诱导宫颈癌肿瘤细胞凋亡,可能与凋亡调节基因bax基因表达的诱导密切相关。 展开更多

关键词 宫颈癌放射治疗 细胞凋亡p53 BCL-2 BAX

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胃癌中miRNA功能相关的信号通路 被引量：13

8

作者 张健 王冬 于景翠 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第11期1331-1335,共5页

胃癌是由多基因改变、多因素参与和多阶段发生的一个复杂病变过程,研究表明微小RNA(micro RNA,miRNA)与胃癌的发生发展密切相关,可参与多种信号通路调节,与多种信号通路相互作用,通过激活或抑制相关信号通路影响胃癌细胞的增殖、侵袭、... 胃癌是由多基因改变、多因素参与和多阶段发生的一个复杂病变过程,研究表明微小RNA(micro RNA,miRNA)与胃癌的发生发展密切相关,可参与多种信号通路调节,与多种信号通路相互作用,通过激活或抑制相关信号通路影响胃癌细胞的增殖、侵袭、转移及药物敏感性等生物学功能。目前,胃癌中研究比较广泛的与miRNA功能相关的信号通路主要集中于PI3K/AKT、Wnt/β-Catenin/Tcf、Ras/Raf/MEK/ERK、p53及TGF-β等信号通路,本文对胃癌中这些miRNA功能相关信号通路的研究进展作一综述。 展开更多

关键词 微小RNA 胃癌 信号通路

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番茄红素对大鼠血脂水平的影响 被引量：8

9

作者 郭守利 王海霞 +3 位作者 王海燕 林彦 李涛 潘洪志 《中国比较医学杂志》 CAS 2003年第1期35-35,共1页

关键词 番茄红素 大鼠 血脂水平 降血脂作用

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番茄红素对小鼠脂类及细胞DNA氧化损伤的影响 被引量：3

10

作者 王海霞 李永明 +5 位作者 陈文华 潘洪志 常东 万丽葵 肖白曼 许丽 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2008年第5期342-345,I0004,共5页

目的建立小鼠前胃癌模型,探讨番茄红素对小鼠前胃癌的抑制机制及对脂类和淋巴细胞DNA的抗氧化损伤作用。方法昆明小鼠随机分成5组,实验3组饲喂高、中、低不同剂量的番茄红素饲料,阳性与正常对照组饲喂正常饲料,实验组与阳性组灌喂含人... 目的建立小鼠前胃癌模型,探讨番茄红素对小鼠前胃癌的抑制机制及对脂类和淋巴细胞DNA的抗氧化损伤作用。方法昆明小鼠随机分成5组,实验3组饲喂高、中、低不同剂量的番茄红素饲料,阳性与正常对照组饲喂正常饲料,实验组与阳性组灌喂含人类致癌物苯并(a)芘B(a)P的色拉油(浓度为5 mg/mL),正常对照组给予相同剂量的色拉油,每周两次,共8次,建立前胃癌模型,24周后处死动物,观察肿瘤生长及脂类和淋巴细胞DNA的氧化损伤情况。结果番茄红素具有明显的抗肿瘤作用,给予番茄红素后能降低前胃癌的发生率,可提高小鼠血清超氧化物歧化酶SOD、谷胱甘肽过氧化物酶GSH-Px活性,降低丙二醛MDA含量和减少淋巴细胞DNA的氧化损伤(P<0.05)。结论番茄红素具有明显抑制肿瘤生长的作用,其作用机制可能与增强机体抗氧化酶功能,降低脂类氧化产物MDA,减少淋巴细胞DNA损伤有关。 展开更多

关键词 小鼠 番茄红素 前胃癌 DNA损伤

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人类白细胞抗原C与HIV-1感染 被引量：3

11

作者 何宁 徐丽丹 于景翠 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2014年第9期1498-1500,共3页

艾滋病即获得性免疫缺陷综合征（acquiredimmunedeficiencysyndrome，AIDS）．是人感染人类免疫缺陷病毒（humanimmunodeficiencyvirus，HIV）后导致的免疫缺陷综合征。HIV可分为1型（HIV-1）和2型（HIV-2），其中HIV-1分布广泛,是造成... 艾滋病即获得性免疫缺陷综合征（acquiredimmunedeficiencysyndrome，AIDS）．是人感染人类免疫缺陷病毒（humanimmunodeficiencyvirus，HIV）后导致的免疫缺陷综合征。HIV可分为1型（HIV-1）和2型（HIV-2），其中HIV-1分布广泛,是造成全世界AIDS流行的主要原因，HIV-2多局限于西非。目前AIDS由于缺乏有效的防治手段， 展开更多

关键词 HIV-1感染 人类白细胞抗原 获得性免疫缺陷综合征 人类免疫缺陷病毒 AIDS HIV-2 艾滋病

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新型可注射微球型多孔壳聚糖/羟基磷灰石支架的生物学性能研究 被引量：1

12

作者 彭志斌 邵林 +4 位作者 牟鳄贤 杜大江 刘真 王强 陈琳 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2015年第11期1179-1184,共6页

目的目前可注射组织工程骨或者载体支架多为凝胶状,其表面积、强度、硬度等方面无法满足复杂多变的骨、软骨缺损修复的要求。文中主要评价新型可注射微球型多孔壳聚糖/羟基磷灰石陶瓷支架的生物学性能。方法制备质量分数分别为30%、50%... 目的目前可注射组织工程骨或者载体支架多为凝胶状,其表面积、强度、硬度等方面无法满足复杂多变的骨、软骨缺损修复的要求。文中主要评价新型可注射微球型多孔壳聚糖/羟基磷灰石陶瓷支架的生物学性能。方法制备质量分数分别为30%、50%、70%的可注射多孔壳聚糖/羟基磷灰石复合微球,分别利用液氮的冷冻效应(液氮组)和非液氮途径(非液氮组)处理后烧结获得羟基磷灰石陶瓷球,拟做为新型组织工程骨的载体支架材料。通过扫描电镜观察支架的微细结构,测定孔隙率;通过生物力学实验测定力学性能。将人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVECs)种植于多孔壳聚糖/羟基磷灰石陶瓷支架,通过电镜扫观察HUVECs在多孔壳聚糖/羟基磷灰石陶瓷支架内部的生长情况验证多孔壳聚糖/羟基磷灰石陶瓷支架的生物融合性。结果液氮组和非液氮组不同质量分数的陶瓷支架肉眼无差异。扫描电镜下的外观图及内部图可见:2组微球陶瓷支架均呈球形、大小均匀、形态规则。液氮处理过的微球陶瓷支架表面见大量不规则孔隙;而非液氮处理微球陶瓷支架表面比较光滑,无明显的孔隙;2组微球陶瓷支架随着壳聚糖/羟基磷灰石的质量百分比的增大,内部的孔隙随之减少,使支架内部结构变的致密。液氮组50%质量分数支架平均直径、平均压缩强度均高于30%质量分数支架[(0.48±0.11)mm vs(0.40±0.08)mm,(1.75±0.14)MPa vs(1.21±0.12)MPa,P<0.05)],孔隙率低于30%质量分数支架[(79±2)%vs(87±1)%,P<0.05],平均孔径差异无统计学意义(P>0.05)。电镜扫描见HUVECs在多孔三磷酸钙支架内部呈多突触样附着,生长良好。结论液氮组50%质量分数多孔壳聚糖/羟基磷灰石陶瓷支架具有较强的力学强度和较好的生物融合性,能够做为新型组织工程骨的载体支架。 展开更多

关键词 组织工程 骨再生 壳聚糖 羟基磷灰石 多孔支架 人脐静脉内皮细胞

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上皮条件性敲除Bmp2和Bmp4对小鼠牙根长度的影响 被引量：1

13

作者 耿硕硕 刘昕 +4 位作者 郭守利 李莹 关雪 王秀梅 谢晓华 《口腔医学研究》 CAS 北大核心 2020年第8期726-730,共5页

目的:观察在上皮组织中条件性敲除Bmp2和Bmp4基因对小鼠牙根发育的影响,为深入研究牙根发育的分子机制提供前期基础。方法:利用Jackson Laboratory推荐的引物,对鼠尾组织进行聚合酶链式反应,鉴定小鼠基因型。取出小鼠下颌骨组织,经过相... 目的:观察在上皮组织中条件性敲除Bmp2和Bmp4基因对小鼠牙根发育的影响,为深入研究牙根发育的分子机制提供前期基础。方法:利用Jackson Laboratory推荐的引物,对鼠尾组织进行聚合酶链式反应,鉴定小鼠基因型。取出小鼠下颌骨组织,经过相应处理后,进行石蜡包埋,用于HE染色。在牙根发育早期过程中比较Bmp2和Bmp4基因敲除组(double gene knockout,DcKO)与同源对照组(control,Con)小鼠的上皮根鞘(hertwig's epithelial root sheath,HERS)和根部成牙本质细胞的形态差异,在牙根发育完成后经小动物高清X线观察两组小鼠牙根状况。结果:出生后0 d,两组小鼠牙根尚未发育;出生后7 d,与对照组相比,实验组小鼠根部成牙本质细胞极化更差;出生后14 d,DcKO小鼠的HERS组织比Con组断裂程度低。牙根发育完成后,21 d和28 d的X线结果显示实验组小鼠的牙根比对照组短,根部髓腔比对照组小鼠大。结论:Bmp2和Bmp4基因参与小鼠牙根发育,Bmp2和Bmp4基因缺失可导致DcKO组小鼠的牙根变短。 展开更多

关键词 BMP2 BMP4 小鼠 牙根发育

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新型防霉剂富马酸酯类 被引量：6

14

作者 林彦 《中国饲料》 北大核心 2004年第20期20-21,共2页

关键词 饲料添加剂 防霉剂 富马酸酯类 合成 工艺流程

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