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晶状体主要内源性蛋白MIP的突变体致先天性白内障的发生机制
被引量：
3
1
作者
胡姗姗
马笮
+2 位作者
赵保文
林辉
齐艳华
《眼科新进展》
CAS
北大核心
2015年第3期218-222,共5页
目的研究晶状体主要内源性蛋白(major intrinsic protein,MIP)R233K突变体的产生是否影响MIP与钙调蛋白的相互作用,继而阐述此突变致先天性白内障的发病机制。方法构建连有EGFP的MIP野生型及R233K突变体表达质粒,分别转染Hela细胞系,确...
目的研究晶状体主要内源性蛋白(major intrinsic protein,MIP)R233K突变体的产生是否影响MIP与钙调蛋白的相互作用,继而阐述此突变致先天性白内障的发病机制。方法构建连有EGFP的MIP野生型及R233K突变体表达质粒,分别转染Hela细胞系,确定R233K突变体的亚细胞定位。用免疫共沉淀技术来检测R233K突变体与钙调蛋白的相互作用。合成野生型及突变型MIP羧基末端多肽链,用荧光素报告基因技术来验证这些多肽链的功能。结果在EGFP的显影下,野生型及R233K突变体均定位于细胞膜上,p.R233K突变未影响MIP的亚细胞定位及其在细胞内的蛋白表达量。而免疫共沉淀实验显示,与野生型MIP相比,位于羧基末端的R233K突变体与钙调蛋白的相互作用明显减弱。荧光素报告基因实验证实,突变后的MIP与钙调蛋白的绑定亲和力明显下降。结论R233K突变体影响了MIP与钙调蛋白的相互作用,降低了MIP羧基末端与钙调蛋白的绑定亲和力,继而影响了晶状体纤维细胞的水通透性,导致了先天性白内障的发生。
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关键词
晶状体主要内源性蛋白
钙调蛋白
相互作用关系
机制
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职称材料
血管内皮生长因子B的神经保护作用
被引量：
2
2
作者
雍海溟
宋强
张水华
《医学研究生学报》
CAS
北大核心
2012年第8期872-875,共4页
神经元的发育和存活是一项神经科学研究的热门领域,故神经营养、神经保护因子成为目前的研究热点。但迄今为止,人们对有效的神经营养、神经保护因子及其作用机制了解甚少。血管内皮生长因子-B(vascular endothelial growth fac-tor-B,VE...
神经元的发育和存活是一项神经科学研究的热门领域,故神经营养、神经保护因子成为目前的研究热点。但迄今为止,人们对有效的神经营养、神经保护因子及其作用机制了解甚少。血管内皮生长因子-B(vascular endothelial growth fac-tor-B,VEGF-B)是VEGF家族的成员,是1996年发现的该家族第3个因子。大多数关于VEGF-B的研究都是致力于其在血管生长方面的作用,而近年来,一些学者把目光聚焦到VEGF-B的促神经发生、神经营养和神经保护的作用,及其通过直接或间接作用于神经元细胞或神经胶质细胞,从而促进其生长及存活。VEGF-B的这种功能使其和多种神经退行性疾病相关,如帕金森病、肌萎缩侧索硬化症、感觉神经末梢的退行性变性疾病等。细胞体外实验和动物模型研究结果提示,转染VEGF-B基因能够改善肌萎缩侧索硬化症、帕金森病、感觉神经末梢的退行性变性疾病的病情进展。
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关键词
血管内皮生长因子-B
神经退行性疾病
神经保护因子
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职称材料
视网膜色素上皮细胞移植中CFDA-SE及免疫组化研究
被引量：
3
3
作者
刘春艳
孙大卫
+1 位作者
宁静
彭绍民
《眼科新进展》
CAS
2006年第5期321-323,共3页
目的探讨新型染料羧基荧光素乙酰乙酸[5-(and-6)-carboxyfluresceindiacetate,succinimidylester,CFDA-SE]与免疫组化方法相结合在视网膜色素上皮细胞(retinalpig-mentepithelialcells,RPECs)移植中应用的可行性。方法用CFDA-SE(10μmol...
目的探讨新型染料羧基荧光素乙酰乙酸[5-(and-6)-carboxyfluresceindiacetate,succinimidylester,CFDA-SE]与免疫组化方法相结合在视网膜色素上皮细胞(retinalpig-mentepithelialcells,RPECs)移植中应用的可行性。方法用CFDA-SE(10μmol·L-1)标记供体RPECs,37℃下孵育1min,通过玻璃体视网膜显微手术将细胞悬液植入同种异体青紫蓝兔视网膜下腔,分别在30d和60d时处死实验兔,荧光显微镜下观察标记的供体细胞,同时作紧密连接的结构蛋白ZO-1和细胞骨架蛋白Actin的免疫组化分析。结果荧光显微镜下观察到标记的供体RPECs可嵌插于宿主RPECs之间,铺成单层结构,并形成新的细胞间紧密连接,ZO-1、Actin的免疫组化结果经统计分析表明与原位RPECs之间的表达无显著差异(ZO-1:︱t︱=2.05,P<0.05;Actin:︱t︱=2·14,P<0.05)。结论CFDA-SE是一种快捷、稳定、安全的活体细胞染料,可作为理想的标记物应用于RPECs移植中。
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关键词
视网膜色素上皮细胞
羧基荧光素乙酰乙酸
移植
免疫组化
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职称材料
题名
晶状体主要内源性蛋白MIP的突变体致先天性白内障的发生机制
被引量：
3
1
作者
胡姗姗
马笮
赵保文
林辉
齐艳华
机构
牡丹江
医学院
红旗医院
眼科
哈尔滨医科大学附属第二临床医学院眼科
出处
《眼科新进展》
CAS
北大核心
2015年第3期218-222,共5页
基金
国家自然科学基金资助(编号:30801274)~~
文摘
目的研究晶状体主要内源性蛋白(major intrinsic protein,MIP)R233K突变体的产生是否影响MIP与钙调蛋白的相互作用,继而阐述此突变致先天性白内障的发病机制。方法构建连有EGFP的MIP野生型及R233K突变体表达质粒,分别转染Hela细胞系,确定R233K突变体的亚细胞定位。用免疫共沉淀技术来检测R233K突变体与钙调蛋白的相互作用。合成野生型及突变型MIP羧基末端多肽链,用荧光素报告基因技术来验证这些多肽链的功能。结果在EGFP的显影下,野生型及R233K突变体均定位于细胞膜上,p.R233K突变未影响MIP的亚细胞定位及其在细胞内的蛋白表达量。而免疫共沉淀实验显示,与野生型MIP相比,位于羧基末端的R233K突变体与钙调蛋白的相互作用明显减弱。荧光素报告基因实验证实,突变后的MIP与钙调蛋白的绑定亲和力明显下降。结论R233K突变体影响了MIP与钙调蛋白的相互作用,降低了MIP羧基末端与钙调蛋白的绑定亲和力,继而影响了晶状体纤维细胞的水通透性,导致了先天性白内障的发生。
关键词
晶状体主要内源性蛋白
钙调蛋白
相互作用关系
机制
Keywords
major intrinsic protein
calmodulin
interaction
mechanism
分类号
R776.1 [医药卫生—眼科]
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职称材料
题名
血管内皮生长因子B的神经保护作用
被引量：
2
2
作者
雍海溟
宋强
张水华
机构
哈尔滨医科大学附属第二临床医学院眼科
哈尔滨医科大学
附属
第二
临床
医学院
整形与手外科
出处
《医学研究生学报》
CAS
北大核心
2012年第8期872-875,共4页
基金
黑龙江省留学归国人员科研启动基金(LC2009C24)
文摘
神经元的发育和存活是一项神经科学研究的热门领域,故神经营养、神经保护因子成为目前的研究热点。但迄今为止,人们对有效的神经营养、神经保护因子及其作用机制了解甚少。血管内皮生长因子-B(vascular endothelial growth fac-tor-B,VEGF-B)是VEGF家族的成员,是1996年发现的该家族第3个因子。大多数关于VEGF-B的研究都是致力于其在血管生长方面的作用,而近年来,一些学者把目光聚焦到VEGF-B的促神经发生、神经营养和神经保护的作用,及其通过直接或间接作用于神经元细胞或神经胶质细胞,从而促进其生长及存活。VEGF-B的这种功能使其和多种神经退行性疾病相关,如帕金森病、肌萎缩侧索硬化症、感觉神经末梢的退行性变性疾病等。细胞体外实验和动物模型研究结果提示,转染VEGF-B基因能够改善肌萎缩侧索硬化症、帕金森病、感觉神经末梢的退行性变性疾病的病情进展。
关键词
血管内皮生长因子-B
神经退行性疾病
神经保护因子
Keywords
Vascular endothelial growth factor-B
Neurodegenerative disease
Neuroprotective factor
分类号
R392.7 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
视网膜色素上皮细胞移植中CFDA-SE及免疫组化研究
被引量：
3
3
作者
刘春艳
孙大卫
宁静
彭绍民
机构
哈尔滨医科大学附属第二临床医学院眼科
出处
《眼科新进展》
CAS
2006年第5期321-323,共3页
基金
国家自然科学基金资助(编号:30271395)
黑龙江省教育厅海外学人科研基金资助
哈尔滨医科大学研究生创新基金资助
文摘
目的探讨新型染料羧基荧光素乙酰乙酸[5-(and-6)-carboxyfluresceindiacetate,succinimidylester,CFDA-SE]与免疫组化方法相结合在视网膜色素上皮细胞(retinalpig-mentepithelialcells,RPECs)移植中应用的可行性。方法用CFDA-SE(10μmol·L-1)标记供体RPECs,37℃下孵育1min,通过玻璃体视网膜显微手术将细胞悬液植入同种异体青紫蓝兔视网膜下腔,分别在30d和60d时处死实验兔,荧光显微镜下观察标记的供体细胞,同时作紧密连接的结构蛋白ZO-1和细胞骨架蛋白Actin的免疫组化分析。结果荧光显微镜下观察到标记的供体RPECs可嵌插于宿主RPECs之间,铺成单层结构,并形成新的细胞间紧密连接,ZO-1、Actin的免疫组化结果经统计分析表明与原位RPECs之间的表达无显著差异(ZO-1:︱t︱=2.05,P<0.05;Actin:︱t︱=2·14,P<0.05)。结论CFDA-SE是一种快捷、稳定、安全的活体细胞染料,可作为理想的标记物应用于RPECs移植中。
关键词
视网膜色素上皮细胞
羧基荧光素乙酰乙酸
移植
免疫组化
Keywords
retinal pigment epithelial cells
CFDA-SE
transplantation
immunohistochemistry
分类号
R774.1 [医药卫生—眼科]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
晶状体主要内源性蛋白MIP的突变体致先天性白内障的发生机制
胡姗姗
马笮
赵保文
林辉
齐艳华
《眼科新进展》
CAS
北大核心
2015
3
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
血管内皮生长因子B的神经保护作用
雍海溟
宋强
张水华
《医学研究生学报》
CAS
北大核心
2012
2
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
视网膜色素上皮细胞移植中CFDA-SE及免疫组化研究
刘春艳
孙大卫
宁静
彭绍民
《眼科新进展》
CAS
2006
3
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