LRG1对人翼状胬肉成纤维细胞纤维化的促进作用及其机制 被引量：1

1

作者 文艳杰 魏超群 +6 位作者 陈杨 孙莉尧 高轶 贺洁 罗佳林 白宇婧 葛红岩 《中华实验眼科杂志》 北大核心 2025年第4期315-322,共8页

目的探讨亮氨酸α-2糖蛋白1(LRG1)在人翼状胬肉成纤维细胞(HPFs)纤维化中的作用及机制。方法收集2022年1月至2023年3月于哈尔滨医科大学附属第一医院行鼻侧原发性翼状胬肉切除手术的翼状胬肉组织和行斜视矫正手术切除的鼻侧正常结膜组织... 目的探讨亮氨酸α-2糖蛋白1(LRG1)在人翼状胬肉成纤维细胞(HPFs)纤维化中的作用及机制。方法收集2022年1月至2023年3月于哈尔滨医科大学附属第一医院行鼻侧原发性翼状胬肉切除手术的翼状胬肉组织和行斜视矫正手术切除的鼻侧正常结膜组织各30例,分别作为翼状胬肉组和正常对照组。采用免疫荧光染色法检测2个组LRG1蛋白表达,采用实时荧光定量PCR、Western blot法检测2个组LRG1和转化生长因子β1(TGF-β1)mRNA和蛋白表达水平。采用组织块贴壁法从翼状胬肉组织中培养原代HPFs,观察其形态,并进行波形蛋白和角蛋白免疫荧光法鉴定。将HPFs分为rhLRG1组和空白对照组,分别用含或不含10μg/ml的rhLRG1培养24 h,采用细胞划痕实验测定细胞的迁移能力。另将HPFs分为空白对照组、LRG1过表达组和LRG1敲减组,LRG1过表达组和LRG1敲减组分别使用LRG1过表达质粒和小干扰RNA转染HPFs 24 h,采用实时荧光定量PCR检测TGF-β1 mRNA表达水平,采用Western blot检测TGF-β1和纤维化标志物纤维连接蛋白(FN)、Ⅲ型胶原(COL3)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达水平。结果提取细胞呈梭形、旋涡状排列,波形蛋白鉴定呈阳性,角蛋白免疫荧光染色呈阴性,证实为HPFs。rhLRG1组HPFs细胞迁移率为(83.01±2.56)%,明显高于空白对照组的(50.32±4.97)%,差异有统计学意义(t=9.59,P<0.001)。免疫荧光染色结果显示,相比于正常结膜组织,翼状胬肉组织中LRG1蛋白显著高表达,广泛分布于纤维结缔组织和上皮层中。翼状胬肉组LRG1和TGF-β1 mRNA和蛋白相对表达量明显高于正常对照组,差异均有统计学意义(mRNA:t=10.18、6.15,均P<0.05;蛋白:t=6.83、8.79,均P<0.05)。LRG1过表达组HPFs细胞中TGF-β1 mRNA相对表达量和FN、COL3、α-SMA蛋白相对表达量明显高于空白对照组和LRG1敲减组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论LRG1可促进HPFs的纤维化并增强其迁移能力,其机制可能与上调TGF-β1信号通路有关。 展开更多

关键词 翼状胬肉 纤维化 富亮氨酸α-2糖蛋白1 转化生长因子Β1 迁移

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面向人工智能应用的干眼影像分类与标注方法、流程及质量控制专家共识(2025)

2

作者 《面向人工智能应用的干眼影像分类与标注方法、流程及质量控制专家共识(2025)》专家组 中国医药教育协会智能眼科分会 +9 位作者 戴琦 袁进 杨卫华 刘祖国 纪家树 陈蔚 王丽强 张弘 肖璇 魏瑞华 《中华实验眼科杂志》 北大核心 2025年第4期289-300,共12页

干眼作为全球常见的眼病,其复杂病理机制和高发病率给临床诊断及管理带来重大挑战,人工智能(AI)技术的发展为干眼影像分析与辅助诊断提供了新机遇。本专家共识围绕干眼影像的分类与标注方法,结合AI技术应用需求,总结了干眼影像分类与标... 干眼作为全球常见的眼病,其复杂病理机制和高发病率给临床诊断及管理带来重大挑战,人工智能(AI)技术的发展为干眼影像分析与辅助诊断提供了新机遇。本专家共识围绕干眼影像的分类与标注方法,结合AI技术应用需求,总结了干眼影像分类与标注的研究范围和任务,详细规范了泪膜脂质层影像、泪河高度影像、泪膜破裂时间影像、角膜荧光素染色影像、睑板腺影像等主要影像模态分类与标注的原则、方法,并明确了分类与标注的工具、流程。本共识提出了系统化的质量控制要求,包括标注一致性评估、多轮审核及数据清洗方法等。最后,本共识总结了目前面临的挑战,提出了针对性的解决策略。本共识的推出旨在为干眼AI模型的研发提供高质量的数据支持,提升AI在干眼诊断、病程监测和个性化治疗中的应用效果,为干眼领域的AI研究和临床应用提供科学参考及技术支撑。 展开更多

关键词 干眼 人工智能 影像分类 数据标注 质量控制 专家共识

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GSDMD介导的细胞焦亡在眼科疾病中的研究进展 被引量：3

3

作者 刘可欣 李志坚 刘翔宇 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2021年第11期1085-1088,1096,共5页

细胞焦亡是一种新的细胞死亡形式。2015年,gasdermin家族成员gasdermin D(GSDMD)蛋白作为焦亡的关键效应蛋白被发现,并引起了广泛关注。细胞中的GSDMD被激活的caspase-1、caspase-4、caspase-5、caspase-11裂解后,氨基末端转移至细胞膜... 细胞焦亡是一种新的细胞死亡形式。2015年,gasdermin家族成员gasdermin D(GSDMD)蛋白作为焦亡的关键效应蛋白被发现,并引起了广泛关注。细胞中的GSDMD被激活的caspase-1、caspase-4、caspase-5、caspase-11裂解后,氨基末端转移至细胞膜上寡聚并形成孔隙,允许水分子等物质进入细胞,导致细胞膨胀、破裂从而引发细胞焦亡。本文就GSDMD的结构、作用机制、其与焦亡之间的关系以及GSDMD在眼科疾病中最新的研究进展进行综述,为眼科疾病的治疗提供新思路。 展开更多

关键词 gasdermin家族成员gasdermin D 细胞焦亡 眼科疾病 治疗

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过氧化物酶体增生物激活受体γ及其激动剂在眼科疾病中的作用 被引量：2

4

作者 侯定善 张晓梅 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第10期954-960,共7页

过氧化物酶体增生物激活受体（PPARs）是配体依赖的核激素受体超家族成员转录因子，目前已有PPARν、PPARβ／δ和PPARν3种亚型，其中PPARν与纤维化疾病的关系日益引起人们的关注。PPARν由激动剂激活后通过控制炎症反应、抑制细胞的... 过氧化物酶体增生物激活受体（PPARs）是配体依赖的核激素受体超家族成员转录因子，目前已有PPARν、PPARβ／δ和PPARν3种亚型，其中PPARν与纤维化疾病的关系日益引起人们的关注。PPARν由激动剂激活后通过控制炎症反应、抑制细胞的增生、诱导细胞的凋亡和分化、抑制血管形成及抗氧化等不同机制发挥抗纤维化作用，有望成为眼部纤维化疾病治疗的一个新途径。从PPARs及其分布、PPARν的结构与功能、PPARν配体及激动剂、PPARν的活化、PPARν在眼组织的表达、PPARν与眼部疾病几个方面就PPARν及其激动剂在眼部疾病中的作用进行综述。 展开更多

关键词 过氧化物增生物激活受体 PPARy激动剂 眼 纤维化

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微小RNAs在眼组织的表达及其与眼科疾病的关系

5

作者 杨东(综述) 张红(审校) 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第10期956-960,共5页

微小核糖核酸（miRNAs）是内源性小分子非编码调控RNAs，通过抑制转录或降解mRNA调控基因的表达。研究发现miRNAs涉及组织分化和生长等许多重要的生物进程，显示出组织特异性和生长阶段特异性，也参与新生血管形成及很多病理进程，如肿... 微小核糖核酸（miRNAs）是内源性小分子非编码调控RNAs，通过抑制转录或降解mRNA调控基因的表达。研究发现miRNAs涉及组织分化和生长等许多重要的生物进程，显示出组织特异性和生长阶段特异性，也参与新生血管形成及很多病理进程，如肿瘤血管新生、氧化应激、免疫反应和炎症。目前，视网膜、晶状体和角膜的miRNAs转录组已经建立，并可能在未来作为眼科疾病治疗的手段之一。就miRNAs在眼组织中的分布及其在眼病中的异常表达进行综述。 展开更多

关键词 微小核糖核酸 视网膜 晶状体 角膜 眼科疾病

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人工智能在眼科光相干断层扫描图像中的应用 被引量：1

6

作者 段恺睿(综述) 张弘(审校) 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期83-87,共5页

人工智能(AI)作为计算机科学的前沿研究领域,在医学领域已有广泛的应用。眼科诊疗过程中产生大量影像学资料,而AI在图像识别方面具有极大优势,将AI应用于眼科影像已逐渐成为眼科领域的研究热点。目前,已有大量研究报道AI技术成功应用于... 人工智能(AI)作为计算机科学的前沿研究领域,在医学领域已有广泛的应用。眼科诊疗过程中产生大量影像学资料,而AI在图像识别方面具有极大优势,将AI应用于眼科影像已逐渐成为眼科领域的研究热点。目前,已有大量研究报道AI技术成功应用于眼科疾病的诊断、分型、分期、治疗途径和治疗效果随访跟踪,如闭角型青光眼、年龄相关性黄斑变性和糖尿病视网膜病变等。此外,近年来有越来越多的研究发现将AI技术应用于光相干断层扫描(OCT)和光相干断层扫描血管成像(OCTA)图像识别、判读,进而诊断眼科疾病,同样具有较高的特异性和准确性。本文就目前AI结合OCT和OCTA图像在眼前节疾病、眼底疾病等眼部疾病中的临床应用作一综述。 展开更多

关键词 人工智能 深度学习 光相干断层扫描 年龄相关性黄斑变性 糖尿病视网膜病变 青光眼

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角膜内皮移植研究热点分析及未来研究方向预测 被引量：2

7

作者 郭钰 张弘 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期136-142,共7页

目的了解角膜内皮移植(EK)近年的文献分布规律和研究热点。方法以Web of Science核心合集中的科学引文扩展索引和社会科学引文索引为数据源,提取2011—2021年以EK为主题的文献,对以EK为主题、文献类型为论著的年文献量、文献发表量前10... 目的了解角膜内皮移植(EK)近年的文献分布规律和研究热点。方法以Web of Science核心合集中的科学引文扩展索引和社会科学引文索引为数据源,提取2011—2021年以EK为主题的文献,对以EK为主题、文献类型为论著的年文献量、文献发表量前10的作者和期刊、引用频次前10位的论文及其主要观点进行统计,并将文献数据导入VOSviewer软件,对EK相关领域文献的核心作者及关键词进行可视化分析。结果共检索出文献1454篇。2011—2021年,文献发表量的逐年累积量呈线性增长,美国是发表EK相关文献最多的国家,Melles GRJ的论文发表量和论文被引数均占据第1位,文献发表总量排名第1的期刊为Cornea。目前,EK的研究方向主要集中于多种术式术后效果的比较和相关并发症的处理。关键词分析显示,其被分为5个聚类,其中聚类1是关于EK术后视觉质量的评价;聚类2是术后并发症和移植失败高风险因素的分析;聚类3是以角膜后弹力层内皮移植(DMEK)为中心的适应证和手术技巧的研究;聚类4是植片相关问题,如植片制备、内皮细胞损失、术后植片脱位的处理等;聚类5主要是角膜移植术式的变化趋势。出现频次最多的关键词是DMEK,共559次,说明目前DMEK是EK相关研究领域的重点。2017年以来,"DMEK"、"previous trabeculectomy"、"graft preparation"、"stability"、"safety"、"air"等关键词出现频次增加,可见有青光眼手术史的病例处理、手术的安全性和稳定性、大气泡法制备植片是近几年来的研究热点。结论植片制备技巧、复杂病例处理、角膜内皮疾病患者青光眼的治疗方法、大气泡法制备植片的长期术后效果评估可能成为今后EK研究发展的方向。 展开更多

关键词 角膜移植术 角膜内皮 数据可视化 文献计量学

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自噬抑制剂3-MA对高糖诱导的人视网膜色素上皮细胞增生的抑制作用 被引量：8

8

作者 侯文文 石焕琦 +1 位作者 张真 张晓梅 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期5-9,共5页

背景糖尿病视网膜病变（DR）是糖尿病常见的并发症之一，视网膜色素上皮（RPE）细胞作为视网膜重要的组成细胞在DR的发生和发展中至关重要。目的探讨自噬抑制剂3-MA对高糖培养的人RPE细胞（hRPECs）增生的影响。方法将体外培养的hRPECs... 背景糖尿病视网膜病变（DR）是糖尿病常见的并发症之一，视网膜色素上皮（RPE）细胞作为视网膜重要的组成细胞在DR的发生和发展中至关重要。目的探讨自噬抑制剂3-MA对高糖培养的人RPE细胞（hRPECs）增生的影响。方法将体外培养的hRPECs分为对照组、高糖组和3-MA＋高糖组，对照组细胞用含5mmol／L葡萄糖的DMEM／F12培养基进行培养，高糖组采用含30mmol／L葡萄糖的DMEM／F12培养基进行培养，干预组细胞先在DMEM／F12培养基中添加10mmol／L的3-MA处理1h后，再添加30mmol／L葡萄糖溶液进行培养。将培养的细胞以1×10^5／孔的密度接种于24孔细胞培养板中，待细胞80％融合后用含体积分数0．5％胎牛血清的培养基继续孵育24h，使细胞周期同步化。倒置光学显微镜和透射电子显微镜下观察各组jRPECs的形态及超微结构；采用CCK-8法检测各组hRPECs的增生率；采用Western blot法检测各组hRPECs中自噬相关基因微管相关蛋白轻链3B（LC3B）蛋白的表达。结果对照组细胞生长状态良好，细胞排列整齐；高糖组细胞体积稍增大，细胞数量明显多于对照组，而3-MA＋高糖组细胞形态不规则，排列紊乱。透射电子显微镜下可见对照组细胞核呈圆形或卵圆形，亚细胞器形态均正常，未发现自噬小体；高糖组细胞中可见自噬溶酶体，而3-MA＋高糖组可见自噬小体。对照组、高糖组、3-MA＋高糖组细胞的增生率分别为（100．0±2．0）％、（116．9±5．2）％和（103．7±4．7）％，总体比较差异有统计学意义（F=13．526，P=0．006），高糖组的细胞增生率明显高于对照组和3-MA＋高糖组，差异均有统计学意义（均P〈0．05），3-MA＋高糖组与对照组间细胞增生率的差异无统计学意义（P〉0．05）。与对照组比较，高糖组细胞中LC3B—Ⅰ蛋白表达减弱，LC3B-Ⅱ蛋白表达增强，而3-MA＋高糖组细胞中LC3B—Ⅰ和LC3B—Ⅱ蛋白的表达强度与对照组接近。对照组、高糖组、3-MA＋高糖组细胞中LC3B—Ⅱ／LC3B—Ⅰ值分别为0．131±0．065、2．504±0．097和0．274±0．007，组间总体比较差异有统计学意义（F=1694．676，P=0．000），高糖组细胞中LC3B—Ⅱ／LC3B—Ⅰ值明显高于对照组和3-MA＋高糖组，差异均有统计学意义（均P〈0．05），3-MA＋高糖组与对照组间细胞中LC3B—Ⅱ／LC3B—Ⅰ值的差异无统计学意义（P〉0．05）。结论高糖可激活自噬过程并促进hRPECs增生，而自噬抑制剂3-MA在一定程度上抑制自噬进程，从而发挥抑制细胞增生的作用。 展开更多

关键词 自噬/药物作用 葡萄糖/药理 视网膜色素上皮细胞/药物作用 超微结构 生物标志物 人

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趋化因子与视网膜静脉阻塞的相关性 被引量：15

9

作者 刘明月(综述) 刘红玲(审校) 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期238-240,共3页

趋化因子是一类在炎症与免疫反应中诱导白细胞募集的细胞因子家族。体外及动物实验证实,趋化因子参与视网膜病理损害过程。趋化因子与视网膜静脉阻塞(RVO)具有一定相关性,如白细胞介素8(IL-8)、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)、巨噬细胞炎性... 趋化因子是一类在炎症与免疫反应中诱导白细胞募集的细胞因子家族。体外及动物实验证实,趋化因子参与视网膜病理损害过程。趋化因子与视网膜静脉阻塞(RVO)具有一定相关性,如白细胞介素8(IL-8)、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)、巨噬细胞炎性蛋白1(MIP-1)在RVO患眼中存在高表达现象,MCP-1、IL-8加重RVO继发黄斑水肿和视网膜缺血。针对RVO的治疗,曲安奈德(TA)及抗血管内皮生长因子(anti-VEGF)药物眼内应用亦被证实可抑制眼内部分趋化因子表达,且治疗效果与初始趋化因子水平具有一定相关性。本文将从上述几方面对趋化因子与RVO的相关性研究进展进行介绍。 展开更多

关键词 趋化因子 视网膜静脉阻塞 白细胞介素8 单核细胞趋化蛋白1 曲安奈德 抗血管内皮生长因子

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重组人BIGH3蛋白滴眼液对兔角膜上皮损伤的修复作用 被引量：4

10

作者 罗鑫 葛红岩 +4 位作者 薛大喜 肖楠 齐东华 田霈 刘平 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第11期1006-1010,共5页

背景角膜上皮损伤可导致角膜溃疡和基质混浊，甚至出现不可逆的视功能损害，以往采用的药物治疗仅能缓解刺激症状，而促进角膜上皮细胞再生的作用较弱，因此寻求能有效调控角膜上皮细胞生长，从而有效治疗角膜上皮损伤的药物至关重要。... 背景角膜上皮损伤可导致角膜溃疡和基质混浊，甚至出现不可逆的视功能损害，以往采用的药物治疗仅能缓解刺激症状，而促进角膜上皮细胞再生的作用较弱，因此寻求能有效调控角膜上皮细胞生长，从而有效治疗角膜上皮损伤的药物至关重要。目的探讨重组人BIGH3蛋白滴眼液对角膜上皮损伤的修复作用。方法50只清洁级健康成年新西兰大白兔，均取右眼为实验眼，其中2只兔制作角膜上皮损伤模型后即刻行裂隙灯显微镜检查及角膜荧光素染色，眼前节照相后处死；48只兔按照随机数字表法随机分为重组人表皮生长因子（EGF）衍生物组（阳性对照组）、生理盐水组（阴性对照组）、质量分数0．25％重组人BIGH3蛋白滴眼液组及O．5％重组人BIGH3蛋白滴眼液组，每组12只。在直径7mm环钻内滴人体积分数20％乙醇，置于角膜中央区60s，然后用角膜刮匙刮去角膜上皮，制作角膜上皮缺损模型。术后各组兔眼分别点用相应药物，每天4次，分别于术后12、24、36、48、72h行裂隙灯显微镜检查及角膜荧光素染色，于12、24、36、48h采用抽签法各处死2只实验兔，72h时各处死4只实验兔，制备角膜组织标本并行苏木精一伊红染色，观察并比较各组兔眼在不同时间点角膜上皮修复情况，应用计算机图像处理系统测量各组兔眼不同时间点角膜上皮愈合面积。结果各组兔眼用药后均未发现任何眼部刺激症状。组织病理学研究发现，造模后即刻全层角膜上皮缺损，随着时间的延长，实验组及对照组兔角膜上皮缺损区皆逐渐变小，可见周边角膜上皮向中央缺损区移行，细胞层数逐渐增加，细胞排列极向逐渐趋于规则。重组人EGF衍生物组、生理盐水组、0．25％及0．5％重组人BIGH3蛋白滴眼液组角膜上皮愈合速率分别为15．00、13．81、18．05、18．86mm。／d。与生理盐水组比较，术后12、24、36、48h，0．25％、0．5％重组人BIGH3蛋白滴眼液组及重组人EGF衍生物组角膜损伤面积明显缩小，差异均有统计学意义（均P=0．000），但造模12、24、36h，重组人EGF衍生物组与生理盐水组比较差异均无统计学意义（P=0．321、0．057、0．126）。与重组人EGF衍生物组比较，术后各时间点0．5％重组人BIGH3蛋白滴眼液组角膜损伤面积明显缩小，差异均有统计学意义（P=0．042、0．039、0．025、0．008），0．25％重组人BIGH3蛋白滴眼液组角膜损伤面积仅在术后12h、24h明显缩小，差异均有统计学意义（P=0．047、0．042）。术后各时间点0．25％、0．5％重组人BIGH3蛋白滴眼液组间角膜损伤面积的差异均无统计学意义（P：0．358、0．259、0．108、0．062）。术后72h，生理盐水组角膜损伤面积为（0．51-＋0．42）mm2，而其他3个组角膜上皮均完全修复。角膜上皮修复曲线表明，0．25％及0．5％重组人BIGH3蛋白滴眼液组角膜上皮修复的相对面积均优于重组人EGF衍生物组和生理盐水组。结论0．25％及0．5％重组人BIGH3蛋白滴眼液对角膜上皮损伤的愈合有明显的促进作用，其作用优于EGF。 展开更多

关键词 重组人BIGH3蛋白 滴眼液 角膜 损伤 愈合

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超氧化物歧化酶与年龄相关性白内障关系的研究 被引量：6

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作者 薛大喜 张毅 +2 位作者 杜玲玲 岳超英 刘平 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2013年第8期740-742,共3页

目的探讨超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)基因多态性与年龄相关性白内障发生的关系。方法年龄相关性白内障病例415例为白内障组,其中121例为皮质性白内障,109例为核性白内障,59例为后囊下白内障,126例为混合性白内障。年龄、... 目的探讨超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)基因多态性与年龄相关性白内障发生的关系。方法年龄相关性白内障病例415例为白内障组,其中121例为皮质性白内障,109例为核性白内障,59例为后囊下白内障,126例为混合性白内障。年龄、性别匹配的386例健康者作为对照组。以聚合酶链反应-限制性片段长度多态性的方法检测SOD1-251A/G基因多态分型,以χ2检验比较SOD1多态基因型在白内障组与对照组之间分布的差异。结果白内障组SOD1-251G/G基因型频率明显高于对照组(P=0.012,OR=1.642,95%CI为1.129～2.389),可能是白内障发展的危险因素;SOD1-251A/A基因型明显低于对照组(P=0.001,OR=0.613,95%CI为0.461～0.817),可能是对照组的一个保护因素;两组中SOD1-251A/A中的G型等位基因频率差异有统计学意义(P=0.001,OR=1.479,95%CI为1.208～1.810)。相对于对照组,皮质性和混合性白内障病例中SOD1-251G/G基因型频率(分别为P=0.031,OR=1.805,95%CI为1.076～3.026;P=0.002,OR=2.229,95%CI为1.364～3.645)和A/A基因型频率(分别为P=0.026,OR=0.608,95%CI为0.396～0.933;P=0.001,OR=0.474,95%CI为0.305～0.734)存在显著不同。结论 SOD1-251G/G基因型可能是导致白内障的一个危险因素。 展开更多

关键词 遗传多态性 氧化应激 抗氧化酶 白内障

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年龄相关性核性白内障晶状体核中不可逆聚集体的定性和定量分析 被引量：4

12

作者 苏胜 刘平 +3 位作者 冷非 关立南 田霈 王朝 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2013年第1期9-12,共4页

目的鉴定分析在年龄相关性核性白内障(age-related nuclear cataract,ARNC)晶状体核中发现的不可逆聚集体的蛋白质组成。方法用强解聚试剂和促溶剂溶解ARNC晶状体核(8例)和年龄匹配的正常晶状体核(8例),提取总蛋白,经十二烷基硫酸钠聚... 目的鉴定分析在年龄相关性核性白内障(age-related nuclear cataract,ARNC)晶状体核中发现的不可逆聚集体的蛋白质组成。方法用强解聚试剂和促溶剂溶解ARNC晶状体核(8例)和年龄匹配的正常晶状体核(8例),提取总蛋白,经十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分离,在ARNC晶状体样品中发现的相对分子质量高的聚集体进行液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)鉴定分析,确定聚集体的组成成分,并根据Mascot搜索数据估算各成分的相对含量。结果 SDS-PAGE结果显示,与正常晶状体核相比,ARNC样品在相对分子质量≤20000处蛋白含量显著减少(均为P<0.05),但在相对分子质量高(>200000)处蛋白质含量显著增加(均为P<0.01)。在ARNC晶状体内存在不可逆的相对分子质量高的聚集体。LC-MS/MS分析显示,这些聚集体主要来源于各种晶状体蛋白,同时还包括Filensin、Phakinin和碳酰还原酶1。在所有组分中αA-晶状体蛋白含量最高(19.1%)。αA-、αB-、γD-晶状体蛋白和DKFZp434A0627比其他晶状体蛋白更容易聚集。结论晶状体蛋白,尤其是αA-晶状体蛋白在白内障产生和发展过程中发生不可逆的聚集,细胞骨架蛋白1可能参与和加速这一过程。 展开更多

关键词 晶状体 年龄相关性核性白内障 不可逆聚集体 蛋白质组 液相色谱串联质谱

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闭角型青光眼合并白内障手术方案的选择 被引量：20

13

作者 刘平 苏胜 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2021年第2期101-104,共4页

青光眼是全球仅次于白内障的致盲性眼病,严重损害人们的视力。青光眼合并白内障的诊疗一直是眼科临床研究的热点。随着眼科医师的临床实践,青光眼,尤其是闭角型青光眼合并白内障的手术方案经历了较大的变革。经典的小梁切除术、传统的... 青光眼是全球仅次于白内障的致盲性眼病,严重损害人们的视力。青光眼合并白内障的诊疗一直是眼科临床研究的热点。随着眼科医师的临床实践,青光眼,尤其是闭角型青光眼合并白内障的手术方案经历了较大的变革。经典的小梁切除术、传统的三联手术(超声乳化白内障吸除+人工晶状体植入+小梁切除术),以及近年不断拓宽适应证的白内障联合房角分离术,这些术式如何选择是白内障及青光眼诊疗医师要面对的重要问题。尽管青光眼合并白内障的患者通常具有共同的特性,但是个体差异性同样突出,如发病后就诊时机、眼部解剖结构、就诊医疗机构的条件、主治医师技术特点的差异等均会对术式的选择有重要影响。本文结合临床研究报道以及临床实践经验,对不同手术方案进行分析,以期推动闭角型青光眼合并白内障诊疗的讨论和研究。 展开更多

关键词 闭角型青光眼 白内障 房角分离 小梁切除术 超声乳化

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缺氧条件下1-磷酸鞘氨醇对人视网膜色素上皮细胞的促增生和抗凋亡作用 被引量：5

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作者 范妍 路宏 +2 位作者 侯定善 毕文娇 张晓梅 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期33-37,共5页

背景 1-磷酸鞘氨醇（S1P）是一种具有生物活性的脂质,是细胞内重要的信使分子,参与多种生物过程的调节,如细胞增生、迁移、分化、凋亡等.缺氧不仅是脉络膜新生血管（CNV）的关键始发因素,也是许多眼部疾病的病理基础,而视网膜色素上皮（... 背景 1-磷酸鞘氨醇（S1P）是一种具有生物活性的脂质,是细胞内重要的信使分子,参与多种生物过程的调节,如细胞增生、迁移、分化、凋亡等.缺氧不仅是脉络膜新生血管（CNV）的关键始发因素,也是许多眼部疾病的病理基础,而视网膜色素上皮（RPE）细胞也参与缺氧后新生血管的形成,缺氧条件下S1P对人RPE细胞增生和凋亡的影响尚不清楚. 目的 观察缺氧条件下S1P对人RPE细胞增生和凋亡的影响,从而揭示S1P在CNV中的作用机制.方法 体外培养人RPE细胞株并进行传代,3～5代的RPE细胞分为6个组,空白对照组细胞进行常规培养,缺氧组细胞用200.00 μmol/L CoCl2培养细胞2h,不同浓度S1P干预组（0.01、0.10、1.00、10.00 μmol/L）用200.00 μmol/L CoCl2培养细胞2h后加入相应浓度的S1P,采用WST-1试剂盒检测各组细胞的吸光度（A）值;采用Hoechst染色检测各组细胞的凋亡情况,计算并比较各组细胞的凋亡率.结果 培养的细胞生长良好,可见细胞质内的色素颗粒.WST-1试剂盒检测显示,空白对照组细胞增生值（A值）为0.91 ±0.08,缺氧组为0.37±0.09,0.01、0.10、1.00和10.00 μmol/L S1P组分别为0.46±0.08、0.52±0.09、0.61 ±0.06和0.70±0.10,各组间的差异有统计学意义（F=21.104,P=0.000）,不同浓度S1P组A值均明显高于缺氧组,且随S1P浓度的升高而增加,差异均有统计学意义（均P＜0.05）;不同浓度的S1P组细胞存活率均明显高于缺氧组.Hoechst染色显示,空白对照组RPE形态正常,可见少数凋亡细胞;缺氧组可见大量凋亡细胞,细胞核呈淡蓝色,染色质浓缩;S1P干预后凋亡细胞数较缺氧组减少,随着S1P浓度的增加,凋亡细胞数逐渐减少.空白对照组凋亡率为（1.21±0.08）％,缺氧组为（8.99±0.09）％,0.01、0.10、1.00和10.00 μmol/L S1P组的细胞凋亡率分别为（6.60±0.08）％、（5.95±0.09）％、（4.81±0.06）％和（3.96±0.10）％,6个组间细胞凋亡率的总体差异有统计学意义（F=25.070,P=0.000）,与缺氧组比较,各S1P组细胞凋亡率均明显降低,差异均有统计学意义（均P＜0.05）,且随S1P的浓度升高其凋亡率逐渐降低.结论 缺氧条件下S1P对人RPE细胞的增生有促进作用,对细胞凋亡有抑制作用. 展开更多

关键词 缺氧 鞘脂类 人视网膜色素上皮细胞 增生 凋亡 脉络膜 新生血管

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囊袋阻滞综合征患者囊袋内积聚液体及后发性白内障囊膜的蛋白质组成分析 被引量：4

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作者 白宏英 王宁 +2 位作者 王朝 刘平 苏胜 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2019年第12期1141-1144,共4页

目的鉴定白内障术后囊袋阻滞综合征(capsular block syndrome,CBS)患者囊袋内积聚液体以及后发性白内障囊膜的蛋白质组成。方法选取我院就诊的5例白内障超声乳化吸出联合人工晶状体植入术后CBS患者,继发青光眼且合并后发性白内障,吸出... 目的鉴定白内障术后囊袋阻滞综合征(capsular block syndrome,CBS)患者囊袋内积聚液体以及后发性白内障囊膜的蛋白质组成。方法选取我院就诊的5例白内障超声乳化吸出联合人工晶状体植入术后CBS患者,继发青光眼且合并后发性白内障,吸出人工晶状体和后囊之间积聚的液体,撕除混浊的后发性白内障囊膜,用强裂解液提取蛋白质,进行液相色谱串联质谱鉴定分析,确定蛋白质组成,并根据Mascot搜索数据结果估算各成分的相对含量。所得蛋白质组成数据与同龄白内障患者晶状体皮质和晶状体上皮细胞的蛋白质主要组成进行比较及分析。结果本研究中CBS患者人工晶状体和后囊之间积聚的液体和后发性白内障囊膜蛋白质组成中,含量较高(前10种)有细胞骨架类蛋白:晶纤蛋白、肌动蛋白、波形蛋白、锚蛋白2;晶状体蛋白:αA-晶状体蛋白、βB1-晶状体蛋白、αB-晶状体蛋白;葡萄糖代谢相关蛋白:三磷酸甘油醛脱氢酶、促进性葡萄糖转运蛋白;热休克蛋白A5。晶状体上皮细胞含量丰富的蛋白质(前15位)包含上述成分中的αA-晶状体蛋白、αB-晶状体蛋白、波形蛋白、肌动蛋白以及三磷酸甘油醛脱氢酶;而晶状体皮质检测到的含量较高的蛋白主要是各种晶状体蛋白,包含CBS患者囊袋内积液和后发性白内障囊膜组成中的βB1-晶状体蛋白、αA-晶状体蛋白、αB-晶状体蛋白。结论 CBS积聚的液体和后发性白内障囊膜主要蛋白质组成与晶状体上皮细胞更加相似,它们可能参与CBS囊袋内液体的积聚以及此种后发性白内障的形成。 展开更多

关键词 囊袋阻滞综合征 后发性白内障 蛋白质分析

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IL-1ra缓释系统防治后发性白内障的实验研究 被引量：5

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作者 刘平 陈志杰 +2 位作者 郝静 李志坚 高维奇 《眼科新进展》 CAS 2008年第8期561-564,共4页

目的探讨白介素-1受体拮抗剂(interleukin 1 antagonist,IL-1ra)抑制后发性白内障的有效性和其缓释系统的可行性。方法将30只(30眼)行晶状体囊外摘出术后日本大耳白兔随机平均分为A组(空白对照组)、B组(术中囊袋内植入空白缓释系统)和C... 目的探讨白介素-1受体拮抗剂(interleukin 1 antagonist,IL-1ra)抑制后发性白内障的有效性和其缓释系统的可行性。方法将30只(30眼)行晶状体囊外摘出术后日本大耳白兔随机平均分为A组(空白对照组)、B组(术中囊袋内植入空白缓释系统)和C组(术中囊袋内植入IL-1ra缓释系统)。术后8周对3组兔眼进行裂隙灯显微镜、角膜内皮镜和组织病理学及电镜检查,并检测房水IL-1的浓度。结果术后12周,A、B及C组发生晶状体后囊膜混浊的眼数分别为10眼、10眼及3眼,差异有统计学意义(P<0.05);术后1个月,各组兔眼角膜内皮细胞数与术前比较均有显著统计学意义(P<0.05),而术前及术后C组与A组和B组比较均无显著统计学意义(P>0.05);术后1d、3d、7d、14d、28 d、56d,C组房水中IL-1的含量与A组和B组间存在显著统计学意义(P=0.000),术后第1、3、7、14、28、56天,A组和B组比较无显著统计学意义(P>0.05);光镜和电镜下C组兔眼晶状体后囊表面几乎无或只有散在的晶状体上皮细胞及纤维蛋白黏附未发现眼内毒性反应。结论后房内植入IL-1ra缓释系统,可明显抑制房水中的IL-1浓度,有效抑制后发性白内障的发生;该方法毒副作用小,是一种安全、有效的给药方式。 展开更多

关键词 IL-1受体拮抗剂 缓释系统 后发性白内障

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改良内皮抑素基因对大鼠角膜新生血管中血管内皮生长因子及其受体表达的抑制作用 被引量：2

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作者 葛红岩 肖楠 +3 位作者 田霈 王琳 罗鑫 刘平 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期20-24,共5页

背景内皮抑素（ES）是目前已知最强的内源性血管形成抑制因子，能抑制新生血管的发生，而精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸（RGD）序列的聚合能增强Es基因的功能。目的探讨改良Es基因对大鼠角膜新生血管（CNV）中血管内皮生长因子（VEGF）及VEGF... 背景内皮抑素（ES）是目前已知最强的内源性血管形成抑制因子，能抑制新生血管的发生，而精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸（RGD）序列的聚合能增强Es基因的功能。目的探讨改良Es基因对大鼠角膜新生血管（CNV）中血管内皮生长因子（VEGF）及VEGF受体2（Flk-1）表达的影响及作用机制。方法102只清洁级sD大鼠按随机数字表法分为模型组、pCI空载体组、pCI—ES转染组、pCI—RGDRGD—ES转染组，每组24只；正常组6只。用浸有1mol／LNaOH溶液的直径3mm圆形滤纸片快速贴于大鼠角膜中央40s建立角膜碱烧伤CNV模型，以pCI质粒作为改良前后E5基因的表达载体，每周2次结膜下注射3μg含质粒的转染液进行基因治疗。每日裂隙灯显微镜下观察角膜水肿及CNV生长情况，计算CNV面积。于碱烧伤后1、4、7、14d用过量麻醉法处死模型鼠并获取角膜组织，用免疫组织化学法检测CNV内皮细胞中CD34的表达以计算CNV密度，通过逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）及Westernblot法分别检测角膜VEGFmRNA及Flk-1在角膜中的表达。结果角膜碱烧伤后7～14d，pCI—ES转染组、pCI—RGDRGD—ES转染组CNV面积均明显小于pCI空载体组和模型组，CNV密度均明显小于pCI空载体组和模型组，差异均有统计学意义（P〈0．05，P〈0．01）；pCI—RGDRGD—ES转染组CNV面积均明显小于pCI—ES转染组，CNV密度均明显少于pCI—ES转染组，差异均有统计学意义（P〈0．05，P〈0．01）。碱烧伤后4d，pCI—ES转染组、pCI—RGDRGD—ES转染组大鼠角膜Flk-1蛋白表达水平明显低于正常对照组大鼠，差异有统计学意义（P〈O．05）；碱烧伤后4d，pCI—ES转染组、pCI—RGDRGD—Es转染组大鼠角膜VEGFmRNA的表达水平明显低于正常对照组大鼠，差异有统计学意义（P〈O．05）；pCI—RGDRGD—ES转染组大鼠角膜VEGFmRNA表达水平明显低于pCI—ES转染组大鼠，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论结膜下注射Es基因或RGDRGD—ES基因均能抑制碱烧伤诱导的CNV，但RGDRGD—ES基因对CNV的抑制作用更强，其作用机制为抑制VEGF及其受体Flk-1的表达。 展开更多

关键词 内皮抑素 角膜/新生血管 基因疗法 血管内皮生长因子 血管内皮生长因子受体2

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白内障蛋白质组学研究的现状及未来研究方向 被引量：11

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作者 刘平 苏胜 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2014年第1期1-4,共4页

白内障——眼睛晶状体混浊,是人类致盲的最主要原因,约占所有病例的42%。晶状体内富含晶状体蛋白(占所有蛋白的90%),其结构和功能异常是白内障形成的重要原因。新近研究表明,大量晶状体蛋白发生了翻译后修饰、相互聚集以及自身降解,这... 白内障——眼睛晶状体混浊,是人类致盲的最主要原因,约占所有病例的42%。晶状体内富含晶状体蛋白(占所有蛋白的90%),其结构和功能异常是白内障形成的重要原因。新近研究表明,大量晶状体蛋白发生了翻译后修饰、相互聚集以及自身降解,这些变化的累积导致白内障的形成。这些传统的蛋白质组学研究主要以高丰度的晶状体蛋白为研究对象,阐述了白内障可能的发病机制。然而,对于晶状体内的非晶状体蛋白,由于含量微少(但功能重要),目前的蛋白质组学研究受阻,进展缓慢。因此,有必要分析晶状体的特殊性以及非晶状体蛋白的作用,来推动白内障蛋白质组学研究。 展开更多

关键词 晶状体 白内障 蛋白质组学

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透明质酸钠联合抗氧化剂中期保存兔角膜 被引量：4

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作者 于莉 高维奇 +3 位作者 刘平 马英娜 崔璟琳 关立南 《眼科新进展》 CAS 2007年第10期746-749,共4页

目的研究透明质酸钠联合抗氧化剂(还原型谷胱甘肽和维生素C)在角膜中期保存中的作用,以探讨一种简便有效的角膜中期保存液,为临床应用提供动物实验依据。方法以自制MK液为对照组,以添加透明质酸钠和抗氧化剂的改良MK液为实验组,分别对保... 目的研究透明质酸钠联合抗氧化剂(还原型谷胱甘肽和维生素C)在角膜中期保存中的作用,以探讨一种简便有效的角膜中期保存液,为临床应用提供动物实验依据。方法以自制MK液为对照组,以添加透明质酸钠和抗氧化剂的改良MK液为实验组,分别对保存3d、7d、10d、14d的兔角膜行大体形态观察、角膜中央厚度测量、台盼蓝-茜素红联合染色及电镜观察。结果应用透明质酸钠和抗氧化剂的各实验组保存的角膜均较对照组透明度好,水肿轻,电镜观察角膜内皮细胞连接紧密,活细胞百分率高,2组差异比较有显著性(P<0.001)。结论透明质酸钠及抗氧化剂有减轻角膜组织损伤,保持细胞活性的作用,将2者联合应用于角膜中期保存液中,可显著提高保存效果。 展开更多

关键词 角膜保存 透明质酸钠 谷胱甘肽 维生素C

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姜黄素对体外培养的硒性白内障形成的作用 被引量：3

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作者 杜玲玲 高维奇 +1 位作者 冯万国 马瑛娜 《眼科研究》 CSCD 北大核心 2010年第8期756-759,共4页

目的观察姜黄素对亚硒酸钠诱导的体外培养兔晶状体混浊的影响,探讨姜黄素对抗晶状体氧化损伤的效果。方法将体外培养的40只正常家兔的晶状体分为5组:空白对照组、亚硒酸钠组(30μmol/L)、姜黄素A组(30mg/L)、姜黄素B组(50mg/L)及卡林-U... 目的观察姜黄素对亚硒酸钠诱导的体外培养兔晶状体混浊的影响,探讨姜黄素对抗晶状体氧化损伤的效果。方法将体外培养的40只正常家兔的晶状体分为5组:空白对照组、亚硒酸钠组(30μmol/L)、姜黄素A组(30mg/L)、姜黄素B组(50mg/L)及卡林-U组(质量分数1%)。分别于培养后24、48、72、96h观察各组晶状体的透明度,同等条件下用数码相机拍照记录各组晶状体的形态,用分光光度计测定晶状体组织中的谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)的变化。结果在48h时,不同质量分数姜黄素组与空白对照组比较,不同分级的晶状体混浊的眼数差异无统计学意义(H=1.464,P>0.05),姜黄素组与卡林-U组及亚硒酸钠组比较,不同分级的晶状体混浊眼数的差异有统计学意义(H=10.607,P<0.01);72h时,不同质量分数姜黄素组与空白对照组比较,不同分级的晶状体混浊的眼数差异无统计学意义(H=3.288,P>0.05);姜黄素组与卡林-U组及亚硒酸钠组比较,不同分级的晶状体混浊眼数的差异有统计学意义(H=8.258,P<0.05)。晶状体培养后96h,不同质量分数姜黄素组与空白对照组比较,不同分级的晶状体混浊眼数的差异有统计学意义(U=7.102,P<0.05);不同质量分数姜黄素组与卡林-U组及亚硒酸钠组比较,不同分级的晶状体混浊眼数的差异有统计学意义(H=9.699,P<0.05)。与空白对照组比较,亚硒酸钠组GSH-Px、SOD活性明显降低,MDA浓度明显升高。不同质量分数姜黄素组和卡林-U组的GSH-Px、SOD活性高于亚硒酸钠组,低于空白对照组,MDA浓度介于空白对照组与亚硒酸钠组之间,卡林-U组的GSH-Px、SOD活性低于姜黄素组,MDA浓度高于姜黄素组。结论姜黄素及卡林-U均具有抗氧化损伤作用,均可推迟亚硒酸钠诱导的体外培养兔晶状体混浊的发生时间,姜黄素的作用强于卡林-U,但姜黄素与卡林-U最终均不能抑制白内障的发生。 展开更多

关键词 姜黄素 硒性白内障 晶状体

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