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人乳头瘤病毒16型E2蛋白表达、纯化及抗血清制备
1
作者
孙宇辉
张沿君
+5 位作者
刘明明
唐丽萍
张光虹
魏兰兰
谷鸿喜
商庆龙
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第9期940-944,共5页
目的表达人乳头瘤病毒16型(HPV16)E2蛋白,并制备小鼠抗HPV16 E2血清。方法采用PCR技术扩增HPV16E2基因,构建入pET21b载体,重组表达载体pET21b-HPV16E2经鉴定后转化大肠埃希菌BL21(DE3),诱导表达并鉴定表达产物。经纯化、变性和复性方法...
目的表达人乳头瘤病毒16型(HPV16)E2蛋白,并制备小鼠抗HPV16 E2血清。方法采用PCR技术扩增HPV16E2基因,构建入pET21b载体,重组表达载体pET21b-HPV16E2经鉴定后转化大肠埃希菌BL21(DE3),诱导表达并鉴定表达产物。经纯化、变性和复性方法,制备可溶性HPV16 E2蛋白。免疫BALB/c小鼠制备抗血清,检测小鼠IFN-γ、CD4^+T细胞、CD8^+T细胞、CD4/CD8比值和抗血清滴度变化。结果酶切和测序结果表明pET21b-HPV16 E2构建成功。表达蛋白相对分子质量(M_r)为42 000,Western blot法证明具有较高特异性。小鼠抗血清效价升高,CD4^+T细胞数量和CD4/CD8比值升高,小鼠IFN-γ无升高。结论成功制备可溶性HPV16 E2蛋白和小鼠抗HPV16 E2高效价的抗血清。
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关键词
人乳头瘤病毒16型
E2蛋白
表达
抗血清
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题名
人乳头瘤病毒16型E2蛋白表达、纯化及抗血清制备
1
作者
孙宇辉
张沿君
刘明明
唐丽萍
张光虹
魏兰兰
谷鸿喜
商庆龙
机构
哈尔滨医科大学
微生物学教研室
哈尔滨医科大学附属第一医学院妇科
哈尔滨医科大学
附属
肿瘤医院
妇科
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第9期940-944,共5页
基金
国家自然科学基金(81000726,30901706)
黑龙江省留学归国基金(LC2009C26)
文摘
目的表达人乳头瘤病毒16型(HPV16)E2蛋白,并制备小鼠抗HPV16 E2血清。方法采用PCR技术扩增HPV16E2基因,构建入pET21b载体,重组表达载体pET21b-HPV16E2经鉴定后转化大肠埃希菌BL21(DE3),诱导表达并鉴定表达产物。经纯化、变性和复性方法,制备可溶性HPV16 E2蛋白。免疫BALB/c小鼠制备抗血清,检测小鼠IFN-γ、CD4^+T细胞、CD8^+T细胞、CD4/CD8比值和抗血清滴度变化。结果酶切和测序结果表明pET21b-HPV16 E2构建成功。表达蛋白相对分子质量(M_r)为42 000,Western blot法证明具有较高特异性。小鼠抗血清效价升高,CD4^+T细胞数量和CD4/CD8比值升高,小鼠IFN-γ无升高。结论成功制备可溶性HPV16 E2蛋白和小鼠抗HPV16 E2高效价的抗血清。
关键词
人乳头瘤病毒16型
E2蛋白
表达
抗血清
Keywords
human papillomavirus type 16
E2 protein
expression
antiserum
分类号
R373.9 [医药卫生—病原生物学]
R392-33 [医药卫生—免疫学]
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作者
出处
发文年
被引量
操作
1
人乳头瘤病毒16型E2蛋白表达、纯化及抗血清制备
孙宇辉
张沿君
刘明明
唐丽萍
张光虹
魏兰兰
谷鸿喜
商庆龙
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2013
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