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过表达Grx1抑制HEK293T细胞中H2O2诱导的p38MAPK信号通路
被引量:
3
1
作者
邹朝霞
李强
+4 位作者
刘莹莹
吴莉芳
张春晶
房绍红
周宏博
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第6期537-542,共6页
谷氧还蛋白1(glutaredoxin1,Grx1)是细胞内一种重要的巯基-二硫键氧化还原酶,在细胞内氧化还原状态的调控及抵抗氧化应激损伤过程中发挥重要作用.为进一步探讨Grx1的抗氧化机制,本实验将重组质粒pcDNA3.1(+)-hGrx1瞬时转染HEK293T细胞,...
谷氧还蛋白1(glutaredoxin1,Grx1)是细胞内一种重要的巯基-二硫键氧化还原酶,在细胞内氧化还原状态的调控及抵抗氧化应激损伤过程中发挥重要作用.为进一步探讨Grx1的抗氧化机制,本实验将重组质粒pcDNA3.1(+)-hGrx1瞬时转染HEK293T细胞,经RT-PCR和Western印迹验证,细胞转染后实现了Grx1的过表达;以不同浓度H2O2为损伤因素,建立细胞氧化应激模型,检测过表达Grx1后细胞存活率,丙二醛(MDA)含量,超氧化物歧化酶(SOD)活力和乳酸脱氢酶(LDH)漏出率的变化,观察过表达Grx1后细胞的抗氧化能力;用终浓度100μmol/L H2O2作用于细胞,利用Western印迹检测120 min内HEK293T细胞中p38MAPK磷酸化水平.实验结果表明,HEK293T细胞过表达Grx1后,缓解了细胞的氧化应激损伤;转染空载体组细胞p38MAPK磷酸化水平在H2O2刺激后5min开始升高,15min达到最高值,并可维持至120min左右;而过表达Grx1组细胞p38MAPK磷酸化水平在H2O2刺激后各时间段没有明显改变,提示Grx1通过抑制H2O2诱导的p38MAPK信号通路激活发挥其抗氧化作用.
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关键词
谷氧还蛋白
HEK293T细胞
氧化应激
P38MAPK
瞬时转染
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职称材料
题名
过表达Grx1抑制HEK293T细胞中H2O2诱导的p38MAPK信号通路
被引量:
3
1
作者
邹朝霞
李强
刘莹莹
吴莉芳
张春晶
房绍红
周宏博
机构
哈尔滨医科大学
生物化学与分子生物学教研室
哈尔滨医科大学附属二院普外四科
齐齐
哈尔
医学
院
生物化学教研室
出处
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第6期537-542,共6页
基金
黑龙江省自然基金资助项目(No.D2007-13)
黑龙江省卫生厅基金资助项目(No.2005-38)
哈尔滨医科大学青年基金项目(No.066024)~~
文摘
谷氧还蛋白1(glutaredoxin1,Grx1)是细胞内一种重要的巯基-二硫键氧化还原酶,在细胞内氧化还原状态的调控及抵抗氧化应激损伤过程中发挥重要作用.为进一步探讨Grx1的抗氧化机制,本实验将重组质粒pcDNA3.1(+)-hGrx1瞬时转染HEK293T细胞,经RT-PCR和Western印迹验证,细胞转染后实现了Grx1的过表达;以不同浓度H2O2为损伤因素,建立细胞氧化应激模型,检测过表达Grx1后细胞存活率,丙二醛(MDA)含量,超氧化物歧化酶(SOD)活力和乳酸脱氢酶(LDH)漏出率的变化,观察过表达Grx1后细胞的抗氧化能力;用终浓度100μmol/L H2O2作用于细胞,利用Western印迹检测120 min内HEK293T细胞中p38MAPK磷酸化水平.实验结果表明,HEK293T细胞过表达Grx1后,缓解了细胞的氧化应激损伤;转染空载体组细胞p38MAPK磷酸化水平在H2O2刺激后5min开始升高,15min达到最高值,并可维持至120min左右;而过表达Grx1组细胞p38MAPK磷酸化水平在H2O2刺激后各时间段没有明显改变,提示Grx1通过抑制H2O2诱导的p38MAPK信号通路激活发挥其抗氧化作用.
关键词
谷氧还蛋白
HEK293T细胞
氧化应激
P38MAPK
瞬时转染
Keywords
glutaredoxin1
HEK293T cells
oxidative stress
p38MAPK
transient transfection
分类号
Q51 [生物学—生物化学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
过表达Grx1抑制HEK293T细胞中H2O2诱导的p38MAPK信号通路
邹朝霞
李强
刘莹莹
吴莉芳
张春晶
房绍红
周宏博
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008
3
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