中国海南岛三个黎族支系DYS287、DYS19的多态性研究 被引量：6

1

作者 李冬娜 应大君 +4 位作者 区采莹 陈路 符生苗 谢协驹 陈峰 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期5-8,共4页

以中国海南岛(289例)本地黎(97例)、杞黎(96例)和黎(96例)人群为研究对象,采用PCR技术及变性聚丙烯酰胺凝胶电泳方法分析了Y染色体特异性微卫星DYS19的等位基因分布规律。本地黎群体检出4种等位基因,杞黎和黎群体均检出3种。在3个... 以中国海南岛(289例)本地黎(97例)、杞黎(96例)和黎(96例)人群为研究对象,采用PCR技术及变性聚丙烯酰胺凝胶电泳方法分析了Y染色体特异性微卫星DYS19的等位基因分布规律。本地黎群体检出4种等位基因,杞黎和黎群体均检出3种。在3个支系的等位基因中均以194bp的频率为最高,分别是0.711、0.855和0.667。杞黎与黎人群DYS19基因座的等位基因频率有极显著差异(P<0.01)。我们还通过PCR方法调查了3个黎族支系的Alu序列插入基因座DYS287的多态性,结果显示:3个人群均未发生Alu序列插入。 展开更多

关键词 中国海南岛 黎族支系 DYS287 DYS19 Y染色体 多态性 微卫星 Alu序列

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槲皮素对鼠B16黑素瘤细胞酪氨酸酶的影响 被引量：4

2

作者 周婧 栗玉珍 +2 位作者 杨士华 于淞 赵育桢 《临床皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第10期664-665,共2页

关键词 细胞 黑素瘤 槲皮素 酪氨酸酶 鼠

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RAB5A对人肺腺癌细胞系侵袭转移作用的研究 被引量：3

3

作者 王春梅 李钰 +3 位作者 高凌寒 刘芳莉 傅松滨 李璞 《中国肺癌杂志》 CAS 2002年第5期326-329,共4页

目的　探讨RAB5A基因在人肺腺癌细胞系侵袭和转移中的作用。方法　采用体外重建基底膜侵袭实验和癌细胞粘附能力、癌细胞趋化性运动能力、癌细胞分泌明胶酶的能力及活性的测定 ,分析RAB5A正义真核表达载体转染后的AGZY83 a和反义RNA转... 目的　探讨RAB5A基因在人肺腺癌细胞系侵袭和转移中的作用。方法　采用体外重建基底膜侵袭实验和癌细胞粘附能力、癌细胞趋化性运动能力、癌细胞分泌明胶酶的能力及活性的测定 ,分析RAB5A正义真核表达载体转染后的AGZY83 a和反义RNA转染后的Anip973细胞的侵袭、转移能力的改变。结果　RAB5A正义表达载体PcDNA3.1 RAB5A转染的AGZY83 a重建基底膜侵袭能力明显增强 ,统计学意义显著 (P <0 .0 0 0 5 ) ,细胞趋化性运动能力显著增高 (P <0 .0 0 0 5 ) ,对基底膜成分的粘附能力增大 (P <0 .0 5 ) ,以及明胶酶分泌及活性增强等一系列趋向Anip973的变化。PcDNA3 AntiRAB5A反义RNA表达载体对Anip973重建基底膜侵袭力明显下降 (P <0 .0 0 2 5 ) ,趋化性运动能力显著降低 (P <0 .0 0 5 ) ,对基底膜成分粘附能力降低 (P <0 .0 5 ) ,以及明胶酶分泌减少等一系列趋向AGZY83 a的变化。结论　RAB5A在肺腺癌侵袭转移表型形成中发挥重要的作用。 展开更多

关键词 1RAB5A 人肺腺癌细胞系 肿瘤转移 反义RNA

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四逆汤含药血清对阿霉素诱导心肌细胞损伤机制影响的研究 被引量：3

4

作者 王睿 费洪新 +4 位作者 黄小义 脑思维 纪慧 张鹏 杨德助 《中华中医药学刊》 CAS 2009年第1期136-138,共3页

目的:观察四逆汤含药血清对阿霉素(ADR)引起的培养乳鼠心肌细胞毒性的影响。方法:采用原代培养的Wister大鼠乳鼠心肌细胞,以1.0μg/mL的ADR造成急性心肌细胞中毒模型,测定心肌细胞乳酸脱氢酶(LDH)漏出量、心肌细胞丙二醛(MDA)含量、心... 目的:观察四逆汤含药血清对阿霉素(ADR)引起的培养乳鼠心肌细胞毒性的影响。方法:采用原代培养的Wister大鼠乳鼠心肌细胞,以1.0μg/mL的ADR造成急性心肌细胞中毒模型,测定心肌细胞乳酸脱氢酶(LDH)漏出量、心肌细胞丙二醛(MDA)含量、心肌细胞搏动频率及MTT分析法测定心肌细胞活力,测定过氧化氢酶(CAT)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)、超氧化物歧化酶(Cu-SOD),观察大鼠生存率的变化。结果:四逆汤含药血清对ADR引起的心肌细胞损伤可减少LDH漏出量和心肌细胞内MDA含量,并改善心肌细胞活力和搏动频率,改善Cu-SOD的活性,延长大鼠生存期。结论:四逆汤含药血清对ADR引起的心肌细胞损伤有一定的保护作用,其作用机制与其抑制ADR引起的脂质过氧化损伤有关。 展开更多

关键词 四逆汤含药血清 阿霉素 心肌细胞

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RNA干扰技术沉默Stat3基因对胃癌细胞SGC7901生物学行为影响的实验研究 被引量：3

5

作者 赵亮 赵家宏 +7 位作者 孙凌宇 于旸 刘锋 张岂凡 张玉宝 董新舒 傅松滨 崔滨滨 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期348-352,共5页

目的:构建Stat3-siRNA表达载体,探讨转染Stat3-siRNA表达载体阻断人胃癌细胞系SGC7901的Stat3信号传导通路对人胃癌细胞增殖和凋亡的影响。方法:利用RNAi技术,构建Stat3-siRNA表达载体,稳定转染胃癌细胞系SGC7901,利用Real-time PCR、We... 目的:构建Stat3-siRNA表达载体,探讨转染Stat3-siRNA表达载体阻断人胃癌细胞系SGC7901的Stat3信号传导通路对人胃癌细胞增殖和凋亡的影响。方法:利用RNAi技术,构建Stat3-siRNA表达载体,稳定转染胃癌细胞系SGC7901,利用Real-time PCR、Western Blot、MTT、流式细胞技术等方法分别检测Stat3基因mRNA和蛋白表达及细胞增殖和凋亡的变化情况。结果:成功构建Stat3-siRNA表达载体,经测序验证无误。Western Blot及Real-time PCR结果显示:Stat3基因的表达水平均下降,其中以SGC7901-siRNA3干扰效果最明显,差异具有显著性(P<0.05)。MTT法结果显示:稳定转染SGC7901细胞后,细胞的增殖能力明显下降,与对照组相比差别显著(P<0.05)。流式细胞技术显示:Stat3-siRNA3实验组较对照组出现了明显的细胞凋亡,在G1期前出现的亚二倍峰即为凋亡峰。结论:Stat3基因的RNAi重组体可以有效的抑制Stat3基因的表达,RNA干扰技术沉默Stat3基因能够抑制胃癌细胞的生长,促进其凋亡。 展开更多

关键词 STAT3 RNA干扰 胃肿瘤 基因治疗

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三种不同生物学特性细胞在软琼脂中的生长表型分析 被引量：3

6

作者 刘芳莉 于旸 傅松滨 《中国肺癌杂志》 CAS 2008年第1期51-54,共4页

背景与目的软琼脂(soft agar)实验一般用来检测细胞的集落形成能力,但很早就有人根据形态学变化用它来检测低等生物的生物学特性。本文探讨利用软琼脂集落形成实验这种方法进行哺乳动物癌细胞表型初步分析的可行性。方法将三种不同生物... 背景与目的软琼脂(soft agar)实验一般用来检测细胞的集落形成能力,但很早就有人根据形态学变化用它来检测低等生物的生物学特性。本文探讨利用软琼脂集落形成实验这种方法进行哺乳动物癌细胞表型初步分析的可行性。方法将三种不同生物学特性的细胞(小鼠成纤维细胞NIH3T3,高转移人肺腺癌细胞系Anip973,高浸润人肺腺癌细胞系L18)悬液接种到软琼脂中,分别在1天、5天、14天后观察细胞形态特征。结果第五天开始细胞集落形态出现差异,14天时差异更显著。NIH3T3细胞克隆为椭圆形,中等大小,边界清楚;Anip973克隆周围有大量游走细胞,表现出其转移特性;L18细胞克隆分支多并向周围延伸扩展,与其浸润特性相符。结论软琼脂分析实验是一种良好的根据表型来观察及鉴定哺乳动物细胞生物学特性的方法。 展开更多

关键词 软琼脂 细胞学 细胞培养

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大鼠心肌H^+-ATP酶抑制蛋白基因克隆及初步鉴定 被引量：1

7

作者 朱世军 李芳 +6 位作者 陈伟 姜晓姝 徐曼 徐长庆 王孝铭 陈忠斌 于康震 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第2期153-156,共4页

目的和方法：根据大鼠线粒体Ｈ＋－ＡＴＰ酶抑制蛋白基因（ＩＦ１）ｃＤＮＡ序列，设计并人工合成一对特异性扩增ＩＦ１ｃＤＮＡ的引物。以提取的大鼠心肌ｍＲＮＡ为模板，反转录－聚合酶链式反应扩增出约４００ｂｐ条带，以Ｋｌｅｎｏ... 目的和方法：根据大鼠线粒体Ｈ＋－ＡＴＰ酶抑制蛋白基因（ＩＦ１）ｃＤＮＡ序列，设计并人工合成一对特异性扩增ＩＦ１ｃＤＮＡ的引物。以提取的大鼠心肌ｍＲＮＡ为模板，反转录－聚合酶链式反应扩增出约４００ｂｐ条带，以Ｋｌｅｎｏｗ酶处理、纯化ＰＣＲ产物，与经Ｓｍａｌ酶切线性化的ｐＵＣ１９质粒ＤＮＡ连接，经转化、筛选初步获得两个重组质粒。对重组质粒进行酶切图谱分析并以重组质粒为模板做ＰＣＲ检测。结果：该质粒为ＩＦ１ｃＤＮＡ基因重组ｐＵＣ１９，并且该基因以正向插入，命名为ｐＩＦ１。 展开更多

关键词 大鼠 心肌缺血 腺苷三磷酸酶类 基因克隆 CDNA 序列分析

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紫杉醇与白藜芦醇对人胃癌MGC803细胞蛋白表达及其细胞周期的作用 被引量：2

8

作者 费洪新 石艳会 +4 位作者 黄小义 脑思维 纪慧 孙丽慧 王睿 《中华中医药学刊》 CAS 2009年第4期789-790,共2页

目的:实验研究紫杉醇(PA)、白藜芦醇(Res)合用对人胃癌MGC803细胞影响。方法:通过流式细胞仪(FCM)检测细胞周期,Western blot。方法:研究PA与Res合用前后对体外培养的人胃癌细胞MGC803对细胞的影响。结果:FCM显示细胞生长停止在S期,S期... 目的:实验研究紫杉醇(PA)、白藜芦醇(Res)合用对人胃癌MGC803细胞影响。方法:通过流式细胞仪(FCM)检测细胞周期,Western blot。方法:研究PA与Res合用前后对体外培养的人胃癌细胞MGC803对细胞的影响。结果:FCM显示细胞生长停止在S期,S期数分数为0.52,抑制细胞有丝分裂及DNA合成。Res与PA合用可以下调Bcl-2表达,上调Bax表达,对P-gp作用不明显。结论:PA与小剂量化疗药物Res合用,可获得化疗药物单独用药相同疗效下调Bcl-2表达,上调Bax表达,增加敏感性,减少药物副作用。 展开更多

关键词 胃癌 白藜芦醇 MGC803 紫杉醇

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四逆汤含药血清对心肌毒性大鼠乳鼠血清Bcl-2 Bax水平影响的研究 被引量：1

9

作者 王睿 费洪新 +4 位作者 石小芳 刘文华 黄小义 杨德助 张腾腾 《中华中医药学刊》 CAS 2009年第8期1684-1686,共3页

目的:探讨四逆汤含药血清抗心肌毒性的疗效及其作用机制。方法:采用盐酸阿霉素(ADR)损伤W istar大鼠乳鼠心肌导致心肌毒性为模型。随机分为正常组、心脏毒性ADR模型对照组、卡托普利组、四逆汤含药血清组.测定大鼠乳鼠血清Bc l-2、Bax水... 目的:探讨四逆汤含药血清抗心肌毒性的疗效及其作用机制。方法:采用盐酸阿霉素(ADR)损伤W istar大鼠乳鼠心肌导致心肌毒性为模型。随机分为正常组、心脏毒性ADR模型对照组、卡托普利组、四逆汤含药血清组.测定大鼠乳鼠血清Bc l-2、Bax水平,并应用光镜观察心肌组织的病理变化。结果:与正常组比较,阿霉素致心肌毒性大鼠乳鼠血清Bax水平显著降低,血清Bc l-2水平明显升高,四逆汤及卡托普利均能降低Bc l-2水平,升高Bax水平(P<0.05)。光镜显示,四逆汤含药血清治疗组心肌细胞损伤程度明显低于模型组。结论:四逆汤含药血清能调节改善心肌毒性大鼠乳鼠的神经内分泌功能,拮抗过度激活的神经内分泌系统。 展开更多

关键词 四逆汤含药血清 心肌毒性 BAX

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p15^(INK4B)基因转染联合TGF-β_1对人食管鳞癌的抑制作用 被引量：1

10

作者 张学彦 刘铁夫 +1 位作者 于旸 崔希威 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2006年第20期1165-1168,共4页

目的:探讨p15INK4B基因转染与TGF-β1联合应用对人食管鳞癌细胞系EC109细胞增殖和凋亡的影响。方法:脂质体介导将pCDNA3.1(+)-p15转染EC109细胞,稳定筛选后加入10ng/ml的TGF-β1。PCR检测外源p15基因,Westernblot检测转染细胞P15蛋白的... 目的:探讨p15INK4B基因转染与TGF-β1联合应用对人食管鳞癌细胞系EC109细胞增殖和凋亡的影响。方法:脂质体介导将pCDNA3.1(+)-p15转染EC109细胞,稳定筛选后加入10ng/ml的TGF-β1。PCR检测外源p15基因,Westernblot检测转染细胞P15蛋白的变化。用MTT、集落形成实验、流式细胞仪和透射电镜检测p15转染TGF-β1对EC109增殖和凋亡的影响。结果:联合应用与二者单独应用相比,明显抑制EC109生长速度,集落形成率显著降低(P<0.01),发生G1/S阻滞,G1期比例显著升高(P<0.05),S期比例明显降低(P<0.05),凋亡率明显升高(P<0.01)。透射电镜发现二者联合应用诱导EC109发生明显的细胞凋亡。结论:p15基因转染与TGF-β1联合应用可以进一步增强对食管鳞癌EC109细胞的抑制作用并诱导其凋亡。 展开更多

关键词 P15^INK4B 基因转染 TGF-β1食管鳞癌

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A546D突变型TGFBI基因真核表达载体的构建及体外表达 被引量：1

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作者 曹文萍 苑海刚 +3 位作者 刘平 朱静 李雪 胡琦 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2015年第6期525-528,共4页

目的构建A546D突变型TGFBI基因真核表达载体和体外转染体系,为研究野生型及A546D突变型TGFBI基因的功能提供实验基础。方法应用重叠延伸PCR法定点诱变,构建A546D突变型TGFBI基因真核表达载体,以阳离子脂质体介导体外转染技术瞬时转染人... 目的构建A546D突变型TGFBI基因真核表达载体和体外转染体系,为研究野生型及A546D突变型TGFBI基因的功能提供实验基础。方法应用重叠延伸PCR法定点诱变,构建A546D突变型TGFBI基因真核表达载体,以阳离子脂质体介导体外转染技术瞬时转染人角膜上皮(human corneal epithelium,HCE)细胞,Western Blot法检测转染后培养基中HCE细胞分泌的TGFBI蛋白的表达。结果重组质粒总长约7.5 kb,由HindⅢ、XbaⅠ双酶切鉴定产生5.4 kb和2.1 kb两条片段者为克隆正确质粒。测序鉴定证实了TGFBI基因编码区完整插入到载体pcDNA3.1的多克隆位点中,突变载体的第1685位碱基由C替换为A,使其编码的第546个氨基酸由Ala突变为Asp即A546D突变。野生型及A546D突变型载体转染入HCE细胞后,TGFBI蛋白有效表达。结论成功构建了A546D突变型TGFBI基因真核表达载体,为TGFBI基因相关性角膜营养不良致病机制的研究奠定了基础。 展开更多

关键词 TGFBI 重叠延伸PCR 人角膜上皮细胞 转染

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中国海南黎族永生B细胞系的建立与保存 被引量：1

12

作者 李冬娜 应大君 +4 位作者 区采莹 符生苗 褚嘉 薛雅丽 黄小义 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第15期1348-1348,1351,共2页

关键词 永生细胞系 少数民族 EB病毒

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p16基因转染对肺腺癌细胞系Anip973和AGZY83-a的生长抑制作用

13

作者 王柏秋 闫承慧 +5 位作者 高慧 吴焱 王琦 黄承滨 傅松滨 李璞 《中国肺癌杂志》 CAS 2001年第6期444-447,共4页

目的　探讨肿瘤抑制基因p1 6对肺腺癌细胞生长的抑制作用。方法　应用FuGene转染方法将p1 6基因的表达质粒转入一对分别具高、低转移能力的肺腺癌细胞系Anip973和AGZY83 a中。对p1 6蛋白过表达的细胞系进行了细胞生长曲线、克隆形成率... 目的　探讨肿瘤抑制基因p1 6对肺腺癌细胞生长的抑制作用。方法　应用FuGene转染方法将p1 6基因的表达质粒转入一对分别具高、低转移能力的肺腺癌细胞系Anip973和AGZY83 a中。对p1 6蛋白过表达的细胞系进行了细胞生长曲线、克隆形成率、原位末端标记分析和流式细胞术分析。结果　p1 6基因的过表达只能使AGZY83 a和Anip973的G1期细胞比例提高 ,但细胞生长曲线、克隆形成率均未发生改变 ,原位末端标记分析也未发现凋亡信号。结论　本实验结果提示p1 6基因在AGZY83 a和Anip973中的过表达不能抑制它们的生长。 展开更多

关键词 P16基因 转染 基因治疗 肺腺癌

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长末端重复序列在人转移和非转移性肺癌中的表达

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作者 陆纲 李钰 +2 位作者 冯会臣 刘春祥 李璞 《北京医科大学学报》 CAS CSCD 2000年第5期399-402,共4页

目的 :观察人类内源性逆转录病毒长末端重复序列 (humanretroviruslongterminalrepeat,HRTVLTR)在转移和非转移性肺癌中的表达 ,探讨HRTVLTR激活与肺癌转移的关系。方法 :采用PCR扩增 17例肺癌病人原发灶、邻近淋巴结及癌旁正常组织基... 目的 :观察人类内源性逆转录病毒长末端重复序列 (humanretroviruslongterminalrepeat,HRTVLTR)在转移和非转移性肺癌中的表达 ,探讨HRTVLTR激活与肺癌转移的关系。方法 :采用PCR扩增 17例肺癌病人原发灶、邻近淋巴结及癌旁正常组织基因组中的内源性HRTVLTR ,证明内源性HRTVLTR的存在 ;以RNA斑点杂交检测 17例肺癌病人原发灶、邻近淋巴结及癌旁正常组织内源性HRTVLTR的表达 ,比较其在转移和非转移性肺癌中的表达差异。结果 :PCR结果显示 ,在转移能力不同的人肺腺癌细胞系 (AGZY 83a和Anip 973)及肺癌病人原发灶、邻近淋巴结及癌旁正常组织均获得了HRTVLTR扩增产物。 17例肺癌标本RNA斑点杂交分析发现 ,8例转移性非小细胞肺癌病人中有 5例原发灶及其转移淋巴结表现为HRTVLTR的高表达 ,4例小细胞肺癌无HRTVLTR的表达。结论 :人类基因中普遍存在内源性HRTVLTR ; 展开更多

关键词 肺癌 肿瘤转移 长末端重复序列 表达 HRTVLTR

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