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兔抗人羧酸酯酶1多克隆抗体的制备与鉴定
1
作者
朱晓美
李淑珍
+3 位作者
吴春铃
包红霞
朱大岭
唐晓波
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第6期516-518,共3页
目的:制备兔抗人羧酸酯酶1(CES1)多克隆抗体(pAb),并对抗体进行特性鉴定。方法:以人正常肝cDNA文库为模板,构建重组表达质粒pGEX-4T-1-CES1(即CES1-GST)和pET-32a-CES1(即CES1-His)。CES1-GST融合蛋白作为免疫原制备兔pAb,辛酸-硫酸铵...
目的:制备兔抗人羧酸酯酶1(CES1)多克隆抗体(pAb),并对抗体进行特性鉴定。方法:以人正常肝cDNA文库为模板,构建重组表达质粒pGEX-4T-1-CES1(即CES1-GST)和pET-32a-CES1(即CES1-His)。CES1-GST融合蛋白作为免疫原制备兔pAb,辛酸-硫酸铵法纯化抗体,采用Western blot和免疫组化鉴定抗体的特异性。结果:CES1-GST和CES1-His融合蛋白均在大肠杆菌中以包涵体形式大量表达。兔抗人CES1pAb效价为1∶64000。Western blot鉴定表明,该抗体可识别重组人CES1蛋白,也可特异地识别人肝微粒体中的CES1亚基。免疫组织化学鉴定显示该抗体可特异性识别正常肝组织中的CES1蛋白。结论:成功地制备了兔抗人CES1pAb,该抗体可应用于ELISA、Western blot、免疫组化等实验,为进一步研究CES1的功能提供了特异性检测工具。
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关键词
CES1
重组蛋白
多克隆抗体
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题名
兔抗人羧酸酯酶1多克隆抗体的制备与鉴定
1
作者
朱晓美
李淑珍
吴春铃
包红霞
朱大岭
唐晓波
机构
哈尔滨医科大学
药学院
生物
制
药学
教研室
哈尔滨医科大学药学院生物医药工程重点实验室省部共建国家重点实验室
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第6期516-518,共3页
基金
黑龙江省政府博士后启动金(LRB04-196)
黑龙江省教育厅科学技术研究项目资助(11531083)
+1 种基金
哈尔滨市科技创新人才研究专项资金项目(2008RFXXS018)
黑龙江省卫生厅科研课题(2007-471)
文摘
目的:制备兔抗人羧酸酯酶1(CES1)多克隆抗体(pAb),并对抗体进行特性鉴定。方法:以人正常肝cDNA文库为模板,构建重组表达质粒pGEX-4T-1-CES1(即CES1-GST)和pET-32a-CES1(即CES1-His)。CES1-GST融合蛋白作为免疫原制备兔pAb,辛酸-硫酸铵法纯化抗体,采用Western blot和免疫组化鉴定抗体的特异性。结果:CES1-GST和CES1-His融合蛋白均在大肠杆菌中以包涵体形式大量表达。兔抗人CES1pAb效价为1∶64000。Western blot鉴定表明,该抗体可识别重组人CES1蛋白,也可特异地识别人肝微粒体中的CES1亚基。免疫组织化学鉴定显示该抗体可特异性识别正常肝组织中的CES1蛋白。结论:成功地制备了兔抗人CES1pAb,该抗体可应用于ELISA、Western blot、免疫组化等实验,为进一步研究CES1的功能提供了特异性检测工具。
关键词
CES1
重组蛋白
多克隆抗体
分类号
R392.11 [医药卫生—免疫学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
兔抗人羧酸酯酶1多克隆抗体的制备与鉴定
朱晓美
李淑珍
吴春铃
包红霞
朱大岭
唐晓波
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2009
0
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