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兔抗人细胞色素P4504A11合成肽抗体的制备与鉴定被引量：3: 1; 作者杨微刘海英 +2 位作者武正华唐晓波朱大岭《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期157-159,共3页; 目的制备兔抗人细胞色素P4504A11(CYP4A11)抗体,并对其特性进行初步鉴定。方法利用生物信息学方法分析CYP4A11蛋白的序列,根据亲水性结构、柔韧区、抗原指数及表面概率结构等指标选择多肽序列、合成CYP4A11多肽,与载体蛋白钥孔戚血蓝素(... 展开更多; 关键词 CYP4A11 合成肽多克隆抗体; 在线阅读下载PDF 职称材料

抗人羧酸酯酶-Ⅱ单克隆抗体的制备与鉴定被引量：3: 2; 作者武正华唐晓波 +4 位作者王志刚纪宏宇于磊刘慧文朱大岭《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期148-151,共4页; 目的制备鼠抗人羧酸酯酶-Ⅱ(humancarboxyles-terases-Ⅱ,hCE-Ⅱ)单克隆抗体(mAb)并对其特性进行鉴定。方法以含hCE-Ⅱ的人肝脏微粒体蛋白混合抗原免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备鼠抗hCE-Ⅱ的mAb,并用Protein-G亲和层析法纯化mAb。... 展开更多; 关键词人羧酸酯酶-Ⅱ 单克隆抗体基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱; 在线阅读下载PDF 职称材料

抗VEGFR2/抗CD3双特异单链抗体的表达及初步活性检测被引量：5: 3; 作者戴丽娟鄢成伟 +5 位作者李淑珍陈莉李新禹单瑞辉于学薇唐晓波《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期883-886,共4页; 目的:构建和表达抗血管内皮细胞生长因子受体2(VEGFR2)/抗CD3双特异单链抗体(bscVEGFR2×CD3),及亲和活性测定。方法:设计抗VEGFR2/抗CD3双特异单链抗体基因序列,由公司合成并亚克隆入真核表达载体pcDNA3.1(+)中,脂质体法转染中国... 展开更多; 关键词双特异单链抗体 CD3 VEGFR2; 在线阅读下载PDF 职称材料

鼠抗人CD20单克隆抗体的制备与鉴定被引量：2: 4; 作者包红霞吴春铃 +5 位作者李淑珍唐晓波褚晓杰王爽张家宁朱大岭《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期454-456,共3页; 目的:制备CD20融合蛋白及制备CD20的单克隆抗体(mAb),并对其进行特性鉴定。方法:以人单核细胞cD-NA文库为模板,构建重组表达质粒pGEX-4T-1-CD20(即CD20-GST)和pET-32a-CD20(即CD20-His)。以融合蛋白CD20-GST为免疫源免疫BALB/c雌性小鼠... 展开更多; 关键词 CD20 原核表达融合蛋白抗体制备; 在线阅读下载PDF 职称材料

兔抗人羧酸酯酶1多克隆抗体的制备与鉴定: 5; 作者朱晓美李淑珍 +3 位作者吴春铃包红霞朱大岭唐晓波《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期516-518,共3页; 目的:制备兔抗人羧酸酯酶1(CES1)多克隆抗体(pAb),并对抗体进行特性鉴定。方法:以人正常肝cDNA文库为模板,构建重组表达质粒pGEX-4T-1-CES1(即CES1-GST)和pET-32a-CES1(即CES1-His)。CES1-GST融合蛋白作为免疫原制备兔pAb,辛酸-硫酸铵... 展开更多; 关键词 CES1 重组蛋白多克隆抗体; 在线阅读下载PDF 职称材料

抗人羧酸酯酶-Ⅱ多克隆抗体的制备、鉴定及应用: 6; 作者吴春铃包红霞 +1 位作者唐晓波朱大岭《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期158-160,163,共4页; 目的:构建人羧酸酯酶-Ⅱ(hCE-Ⅱ)原核表达质粒并在大肠杆菌中表达,制备多克隆抗体(pAb),并对其特性进行初步鉴定。方法:以人正常肝cDNA文库为模板,构建重组表达质粒pGEX-4T-1-hCE-Ⅱ(即hCE-Ⅱ-GST)和pET-32a-hCE-Ⅱ(即hCE-Ⅱ-His)。在... 展开更多; 关键词 hCE-Ⅱ 原核表达融合蛋白多克隆抗体; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名兔抗人细胞色素P4504A11合成肽抗体的制备与鉴定被引量：3: 1; 作者杨微刘海英武正华唐晓波朱大岭; 机构哈尔滨医科大学药学院生物制药学教研室哈尔滨医科大学药物与内源性物质代谢黑龙江省重点实验室; 出处《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期157-159,共3页; 基金国家高技术研究发展计划(863)资助项目(2004BA711A20) 黑龙江省教育厅振兴老工业基地重大科技项目(115129d11); 文摘目的制备兔抗人细胞色素P4504A11(CYP4A11)抗体,并对其特性进行初步鉴定。方法利用生物信息学方法分析CYP4A11蛋白的序列,根据亲水性结构、柔韧区、抗原指数及表面概率结构等指标选择多肽序列、合成CYP4A11多肽,与载体蛋白钥孔戚血蓝素(KLH)偶联,免疫大耳白兔制备抗CYP4A11抗体。辛酸-硫酸铵法纯化抗体,对纯化的抗体进行ELISA、Westernblot、免疫组化等鉴定。结果获得抗CYP4A11合成肽的抗体。该抗体效价为1∶32000。可与CYP4A11合成肽及天然CYP4A11出现特异性反应,该抗体识别的相应抗原的相对分子质量(Mr)为53000,可识别正常肝脏的CYP4A11。结论合成的多肽-KLH复合物具有免疫原性,可用于制备相应的抗体。制备的兔抗CYP4A11合成肽抗体可应用于ELISA、Westernblot、免疫组化等实验。; 关键词 CYP4A11 合成肽多克隆抗体; 分类号 R392.11 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名抗人羧酸酯酶-Ⅱ单克隆抗体的制备与鉴定被引量：3: 2; 作者武正华唐晓波王志刚纪宏宇于磊刘慧文朱大岭; 机构哈尔滨医科大学药学院生物制药学教研室哈尔滨医科大学附属二院药学部哈尔滨医科大学基础医学院组织与胚胎学教研室哈尔滨医科大学黑龙江省生物医药工程重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地; 出处《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期148-151,共4页; 基金中国人类肝脏蛋白质组计划(2004BA711A20) 黑龙江省科技厅科技攻关项目(230103550116131) 黑龙江省教育厅科学技术研究项目(10551158); 文摘目的制备鼠抗人羧酸酯酶-Ⅱ(humancarboxyles-terases-Ⅱ,hCE-Ⅱ)单克隆抗体(mAb)并对其特性进行鉴定。方法以含hCE-Ⅱ的人肝脏微粒体蛋白混合抗原免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备鼠抗hCE-Ⅱ的mAb,并用Protein-G亲和层析法纯化mAb。用间接ELISA法测定mAb的效价,以Westernblot鉴定mAb的特异性、免疫组化染色法对mAb相应的抗原进行组织定位。用免疫沉淀和基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assistedlaserdesorption/ionizationtime-of-flightmassspectrometry,MALDI-TOF-MS)得到相应的肽质量指纹谱(peptidemassfingerprint,PMF),再通过Mascot在人类蛋白质数据库中分析比对鉴定mAb对应的抗原。结果获得1株可持续、稳定分泌抗hCE-Ⅱ的mAb的杂交瘤细胞系。杂交瘤细胞分泌的mAbIg的亚类(型)为IgG1(κ),腹水mAb的效价达1×10-7。Westernblot分析显示,在Mr为62000处有1条清晰的带。免疫组化染色显示,该mAb可与肝细胞的浆蛋白结合(hCE-Ⅱ存在于肝细胞浆内微粒体),而不与血管平滑肌细胞内的蛋白结合。该mAb免疫沉淀物的Mr为62000,与hCE-Ⅱ的Mr相符。对免疫沉淀的蛋白质进行质谱鉴定证实,该mAb对应的抗原为hCE-Ⅱ。结论制备出的鼠抗hCE-Ⅱ的mAb效价高、特异性良好,为进一步研究hCE-Ⅱ的功能及其在肝癌等癌症的诊断和治疗中的作用提供了工具。; 关键词人羧酸酯酶-Ⅱ 单克隆抗体基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱; Keywords human carboxylesterases- Ⅱ monoclonal antibody matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry; 分类号 R392.11 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名抗VEGFR2/抗CD3双特异单链抗体的表达及初步活性检测被引量：5: 3; 作者戴丽娟鄢成伟李淑珍陈莉李新禹单瑞辉于学薇唐晓波; 机构哈尔滨医科大学附属第二医院药学部哈尔滨医科大学药学院生物制药学教研室; 出处《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期883-886,共4页; 基金哈尔滨市科技创新人才研究专项资金(2008RFXXS018); 文摘目的:构建和表达抗血管内皮细胞生长因子受体2(VEGFR2)/抗CD3双特异单链抗体(bscVEGFR2×CD3),及亲和活性测定。方法:设计抗VEGFR2/抗CD3双特异单链抗体基因序列,由公司合成并亚克隆入真核表达载体pcDNA3.1(+)中,脂质体法转染中国仓鼠卵巢细胞(CHO),筛选高效分泌表达bscVEGFR2×CD3的克隆株。表达产物经Ni-NTA柱纯化,120 g/L SDS-PAGE电泳及Western blot鉴定。应用流式细胞术(FCM)检测生物学活性。结果:bscVEGFR2×CD3重组表达载体测序证实序列正确。bscVEGFR2×CD3能够在CHO细胞中进行分泌表达,筛选出6株高表达克隆株。120 g/L SDS-PAGE显示相对分子质量(Mr)约56 000有1条带,与预期相符,Western blot证明anti-His抗体能与这条蛋白条带发生特异性结合。FCM检测bscVEGFR2×CD3能与CD3+jurkat细胞和VEGFR2+A375细胞特异性结合。结论:成功构建和表达抗VEGFR2/抗CD3双特异单链抗体,该抗体具有与VEGFR2、CD3特异性结合的免疫学活性。; 关键词双特异单链抗体 CD3 VEGFR2; Keywords bispecific single-chain antibody CD3 VEGFR2; 分类号 R392.11 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名鼠抗人CD20单克隆抗体的制备与鉴定被引量：2: 4; 作者包红霞吴春铃李淑珍唐晓波褚晓杰王爽张家宁朱大岭; 机构哈尔滨医科大学药学院生物制药学教研室哈尔滨医科大学黑龙江省生物医药工程重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地哈尔滨医科大学药物与内源性物质代谢省高校重点实验室; 出处《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期454-456,共3页; 基金黑龙江省教育厅振兴老工业基地重大科技项目(1151zgd11) 哈尔滨市科技创新人才研究专项基金项目(RC2006XK003010) +1 种基金哈尔滨医科大学医学基础学科青年科学基金项目(060043); 文摘目的:制备CD20融合蛋白及制备CD20的单克隆抗体(mAb),并对其进行特性鉴定。方法:以人单核细胞cD-NA文库为模板,构建重组表达质粒pGEX-4T-1-CD20(即CD20-GST)和pET-32a-CD20(即CD20-His)。以融合蛋白CD20-GST为免疫源免疫BALB/c雌性小鼠制备(mAb),用间接ELISA法测定抗体的效价,Western blot、免疫荧光鉴定其特异性及免疫组化染色法对mAb相应的抗原进行组织定位。结果:CD20-GST和CD20-His蛋白在大肠杆菌中可高效表达,经纯化后可获得高纯度的CD20蛋白,经细胞融合得到1株稳定分泌CD20抗体的杂交瘤细胞株,Western blot和免疫组化显示抗CD20mAb与CD20蛋白具有良好的反应性。结论:成功制备高纯度CD20蛋白并以此为抗原制备了1株能够稳定分泌抗人CD20的鼠mAb的杂交瘤细胞株BD11F4,为进一步研究CD20对非霍奇金淋巴瘤的诊断治疗提供基础。; 关键词 CD20 原核表达融合蛋白抗体制备; 分类号 R392.11 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名兔抗人羧酸酯酶1多克隆抗体的制备与鉴定: 5; 作者朱晓美李淑珍吴春铃包红霞朱大岭唐晓波; 机构哈尔滨医科大学药学院生物制药学教研室哈尔滨医科大学药学院生物医药工程重点实验室省部共建国家重点实验室; 出处《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期516-518,共3页; 基金黑龙江省政府博士后启动金(LRB04-196) 黑龙江省教育厅科学技术研究项目资助(11531083) +1 种基金黑龙江省卫生厅科研课题(2007-471); 文摘目的:制备兔抗人羧酸酯酶1(CES1)多克隆抗体(pAb),并对抗体进行特性鉴定。方法:以人正常肝cDNA文库为模板,构建重组表达质粒pGEX-4T-1-CES1(即CES1-GST)和pET-32a-CES1(即CES1-His)。CES1-GST融合蛋白作为免疫原制备兔pAb,辛酸-硫酸铵法纯化抗体,采用Western blot和免疫组化鉴定抗体的特异性。结果:CES1-GST和CES1-His融合蛋白均在大肠杆菌中以包涵体形式大量表达。兔抗人CES1pAb效价为1∶64000。Western blot鉴定表明,该抗体可识别重组人CES1蛋白,也可特异地识别人肝微粒体中的CES1亚基。免疫组织化学鉴定显示该抗体可特异性识别正常肝组织中的CES1蛋白。结论:成功地制备了兔抗人CES1pAb,该抗体可应用于ELISA、Western blot、免疫组化等实验,为进一步研究CES1的功能提供了特异性检测工具。; 关键词 CES1 重组蛋白多克隆抗体; 分类号 R392.11 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名抗人羧酸酯酶-Ⅱ多克隆抗体的制备、鉴定及应用: 6; 作者吴春铃包红霞唐晓波朱大岭; 机构哈尔滨医科大学药学院生物制药学教研室; 出处《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期158-160,163,共4页; 基金黑龙江省卫生厅科研课题(2007-471) 黑龙江省博士后启动金(LRB04-196) +4 种基金黑龙江省卫生厅科研课题(2007-471); 文摘目的:构建人羧酸酯酶-Ⅱ(hCE-Ⅱ)原核表达质粒并在大肠杆菌中表达,制备多克隆抗体(pAb),并对其特性进行初步鉴定。方法:以人正常肝cDNA文库为模板,构建重组表达质粒pGEX-4T-1-hCE-Ⅱ(即hCE-Ⅱ-GST)和pET-32a-hCE-Ⅱ(即hCE-Ⅱ-His)。在宿主菌BL21内进行诱导表达,hCE-Ⅱ-GST融合蛋白作为免疫原免疫大耳白兔,用辛酸-硫酸铵分步沉淀法初步纯化抗血清,并用间接ELISA、West-ernblot及免疫组化检测抗体的灵敏度和特异性。结果:成功制备了抗hCE-Ⅱ的多克隆抗体。Westernblot鉴定表明该抗体可特异性识别重组蛋白以及天然的人肝微粒体蛋白。免疫组织化学鉴定显示该抗体可特异性结合肝包浆中的hCE-Ⅱ蛋白,而不与血管平滑肌细胞结合。结论:制备的pAb有较高的效价和较好的特异性,为肝癌诊断试剂盒的研究奠定了实验基础。; 关键词 hCE-Ⅱ 原核表达融合蛋白多克隆抗体; Keywords hCE-Ⅱ prokaryotic express on recombinantprotein polyclonal antibody; 分类号 R392.11 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	兔抗人细胞色素P4504A11合成肽抗体的制备与鉴定	杨微刘海英武正华唐晓波朱大岭	《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2007	3	在线阅读下载PDF 职称材料
2	抗人羧酸酯酶-Ⅱ单克隆抗体的制备与鉴定	武正华唐晓波王志刚纪宏宇于磊刘慧文朱大岭	《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2007	3	在线阅读下载PDF 职称材料
3	抗VEGFR2/抗CD3双特异单链抗体的表达及初步活性检测	戴丽娟鄢成伟李淑珍陈莉李新禹单瑞辉于学薇唐晓波	《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2011	5	在线阅读下载PDF 职称材料
4	鼠抗人CD20单克隆抗体的制备与鉴定	包红霞吴春铃李淑珍唐晓波褚晓杰王爽张家宁朱大岭	《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2009	2	在线阅读下载PDF 职称材料
5	兔抗人羧酸酯酶1多克隆抗体的制备与鉴定	朱晓美李淑珍吴春铃包红霞朱大岭唐晓波	《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2009	0	在线阅读下载PDF 职称材料
6	抗人羧酸酯酶-Ⅱ多克隆抗体的制备、鉴定及应用	吴春铃包红霞唐晓波朱大岭	《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2009	0	在线阅读下载PDF 职称材料