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微RNA-195在大鼠长期脑低灌注诱发的神经元树突退化和神经元死亡中的作用及其分子机制
1
作者
陈鑫
姜雪梅
+11 位作者
赵琳婧
孙琳琳
颜美玲
田由
张帅
段明靖
赵红梅
李文睿
郝洋洋
王立波
熊乔杰
艾静
《中国药理学与毒理学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第9期681-681,共1页
目的研究微RNA-195(miR-195)对慢性大脑低灌注(CBH)大鼠神经元树突退化及神经元死亡的调控作用及机制。方法在体利用双侧颈总动脉结扎建立大鼠CBH模型,离体进行神经元及脑组织块培养;过表达或抑制miR-195后,利用高尔基染色检测大鼠树突...
目的研究微RNA-195(miR-195)对慢性大脑低灌注(CBH)大鼠神经元树突退化及神经元死亡的调控作用及机制。方法在体利用双侧颈总动脉结扎建立大鼠CBH模型,离体进行神经元及脑组织块培养;过表达或抑制miR-195后,利用高尔基染色检测大鼠树突形态,TUNEL染色检测神经元死亡,Nissl染色检测神经元活性,PCR检测miR-195的表达,Western蛋白质印迹法检测N-APP和死亡受体DR6的表达,免疫荧光检测DR6,裂解胱天蛋白酶6和裂解胱天蛋白酶3的表达,荧光素酶双报告基因和微RNA屏蔽反义核苷酸技术检测miR-195对DR6的转录后调控。结果 (1)与假手术组相比,2VO能显著降低大鼠海马和皮质区锥体及颗粒神经元的树突总长度、总数量和sholl分析交叉点数,增加神经元死亡;同时能够抑制miR-195表达,上调N-APP和DR6的表达,激活胱天蛋白酶6和胱天蛋白酶3的裂解;海马局部注射AMO-195和2VO发挥同样作用,而给予miR-195能逆转由2VO或者AMO-195所引起的上述改变;(2)转染miR-195下调DR6的表达,转染AMO-195上调DR6的表达,而应用DR6-ODN屏蔽miR-195和DR6 mRNA的结合位点,可逆转miR-195对DR6的抑制作用;进一步用Luciferase实验证实,miR-195对DR6具有直接靶向调控作用;(3)AMO-195能够促进胱天蛋白酶6和胱天蛋白酶3裂解,抑制神经元突起生长,增加神经元死亡,这些作用能被miR-195以及DR6和N-APP的抗体所抑制。结论 miR-195通过抑制N-APP/DR6/胱天蛋白酶通路延缓CBH引起的神经元树突退化和神经元死亡。
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关键词
慢性脑低灌注
miR-195
树突退化
神经元死亡
死亡受体
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题名
微RNA-195在大鼠长期脑低灌注诱发的神经元树突退化和神经元死亡中的作用及其分子机制
1
作者
陈鑫
姜雪梅
赵琳婧
孙琳琳
颜美玲
田由
张帅
段明靖
赵红梅
李文睿
郝洋洋
王立波
熊乔杰
艾静
机构
哈尔滨医科大学
药学院
药理
教研室
哈尔滨医科大学
附属第一医院神经外科
哈尔滨医科大学药学院天然药物化学教研室
纽约州立
大学
石溪校区
出处
《中国药理学与毒理学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第9期681-681,共1页
基金
国家自然科学基金(81471115
81671052
81271207)
文摘
目的研究微RNA-195(miR-195)对慢性大脑低灌注(CBH)大鼠神经元树突退化及神经元死亡的调控作用及机制。方法在体利用双侧颈总动脉结扎建立大鼠CBH模型,离体进行神经元及脑组织块培养;过表达或抑制miR-195后,利用高尔基染色检测大鼠树突形态,TUNEL染色检测神经元死亡,Nissl染色检测神经元活性,PCR检测miR-195的表达,Western蛋白质印迹法检测N-APP和死亡受体DR6的表达,免疫荧光检测DR6,裂解胱天蛋白酶6和裂解胱天蛋白酶3的表达,荧光素酶双报告基因和微RNA屏蔽反义核苷酸技术检测miR-195对DR6的转录后调控。结果 (1)与假手术组相比,2VO能显著降低大鼠海马和皮质区锥体及颗粒神经元的树突总长度、总数量和sholl分析交叉点数,增加神经元死亡;同时能够抑制miR-195表达,上调N-APP和DR6的表达,激活胱天蛋白酶6和胱天蛋白酶3的裂解;海马局部注射AMO-195和2VO发挥同样作用,而给予miR-195能逆转由2VO或者AMO-195所引起的上述改变;(2)转染miR-195下调DR6的表达,转染AMO-195上调DR6的表达,而应用DR6-ODN屏蔽miR-195和DR6 mRNA的结合位点,可逆转miR-195对DR6的抑制作用;进一步用Luciferase实验证实,miR-195对DR6具有直接靶向调控作用;(3)AMO-195能够促进胱天蛋白酶6和胱天蛋白酶3裂解,抑制神经元突起生长,增加神经元死亡,这些作用能被miR-195以及DR6和N-APP的抗体所抑制。结论 miR-195通过抑制N-APP/DR6/胱天蛋白酶通路延缓CBH引起的神经元树突退化和神经元死亡。
关键词
慢性脑低灌注
miR-195
树突退化
神经元死亡
死亡受体
分类号
R741 [医药卫生—神经病学与精神病学]
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出处
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1
微RNA-195在大鼠长期脑低灌注诱发的神经元树突退化和神经元死亡中的作用及其分子机制
陈鑫
姜雪梅
赵琳婧
孙琳琳
颜美玲
田由
张帅
段明靖
赵红梅
李文睿
郝洋洋
王立波
熊乔杰
艾静
《中国药理学与毒理学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2018
0
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