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采用正交设计优化HPV16L1重组蛋白表达的实验研究
被引量:
1
1
作者
陈思佳
商庆龙
+3 位作者
王燕
李晓波
刘希君
谷鸿喜
《微生物学杂志》
CAS
CSCD
2009年第1期46-49,共4页
通过正交试验对构建的人乳头瘤病毒(HPV)16型L1蛋白的重组表达菌株pQE31-HPV16L1/M15(pREP4)进行表达条件的优化,以增加目的蛋白的表达量。实验选取影响蛋白表达的4个主要因素,分别为诱导时间、诱导剂浓度、细菌密度和诱导温度,采用四...
通过正交试验对构建的人乳头瘤病毒(HPV)16型L1蛋白的重组表达菌株pQE31-HPV16L1/M15(pREP4)进行表达条件的优化,以增加目的蛋白的表达量。实验选取影响蛋白表达的4个主要因素,分别为诱导时间、诱导剂浓度、细菌密度和诱导温度,采用四因素两水平正交试验,通过SDS-PAGE及Western blot测定重组表达蛋白,以Tanon凝胶成像系统分析目的蛋白含量作为检测条件优化效果的指标,所得数据采用SAS软件进行统计分析。实验结果表明在37℃、IPTG0.5mmol/L,菌密度OD600为1.0的条件下诱导4h所得蛋白量最大;经统计正交分析的最佳诱导条件为37℃、0.5mmol/LIPTG和菌密度OD600为1.0的条件下诱导7h。经实验验证,应用正交分析的最佳条件诱导所得目的蛋白量最大,但实际中通常采用诱导4h条件。实验证明正交试验可以用于基因工程菌株蛋白表达条件优化过程,提高工作效率。
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关键词
人乳头瘤病毒16型
L1蛋白
正交试验
条件优化
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职称材料
急性早幼粒细胞白血病细胞分化的调控机制新进展
被引量:
9
2
作者
于丽
吴静
+2 位作者
王迪
肖骁
张凤民
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第8期1003-1006,共4页
急性早幼粒细胞白血病(APL)在1957年首次被描述为急性髓系白血病的一个常见亚型,占急性髓系白血病的10%~15%,以t(12; 17)(q22; q12)易位为特征,主要表现为未成熟的粒细胞在发育早期分化阻滞。而影响APL细胞分化的因素有很多,包括基因...
急性早幼粒细胞白血病(APL)在1957年首次被描述为急性髓系白血病的一个常见亚型,占急性髓系白血病的10%~15%,以t(12; 17)(q22; q12)易位为特征,主要表现为未成熟的粒细胞在发育早期分化阻滞。而影响APL细胞分化的因素有很多,包括基因表达异常、自噬、氧化应激、表观遗传学等。目前,通过促进APL细胞分化的治疗可降低死亡率,延长持续缓解时间。本文主要对调控APL细胞分化的因素及其机制进行综述。
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关键词
急性早幼粒细胞白血病
细胞分化
基因表达异常
自噬
氧化应激
表观遗传学
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职称材料
β-内酰胺酶抑制剂研究进展
被引量:
33
3
作者
蔡文辉
张文莉
+1 位作者
付英梅
张凤民
《中国抗生素杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第11期805-809,共5页
β-内酰胺酶抑制剂能抑制耐药菌产生的β-内酰胺酶,常与β-内酰胺类抗生素联合使用,能使抗生素中的β-内酰胺环免遭水解,保护抗生素的抗菌作用。1976年,英国从链霉菌中发现第一个β-内酰胺酶抑制剂克拉维酸,其能抑制部分广谱和超广谱β...
β-内酰胺酶抑制剂能抑制耐药菌产生的β-内酰胺酶,常与β-内酰胺类抗生素联合使用,能使抗生素中的β-内酰胺环免遭水解,保护抗生素的抗菌作用。1976年,英国从链霉菌中发现第一个β-内酰胺酶抑制剂克拉维酸,其能抑制部分广谱和超广谱β-内酰胺酶,常与阿莫西林联合应用,可使阿莫西林对某些细菌的MIC值降低。随着抗生素的大量使用以及具有β-内酰胺酶相关的耐药性的细菌的增加,许多β-内酰胺酶抑制剂相继被发现。根据β-内酰胺酶抑制剂的结构,主要将其分为含有β-内酰胺环结构的抑制剂和不含β-内酰胺环结构的抑制剂。本文就目前国内外β-内酰胺酶抑制剂的研究现状进行综述。
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关键词
Β-内酰胺酶
酶抑制剂
细菌耐药
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职称材料
人乳头瘤病毒16型E2蛋白表达、纯化及抗血清制备
4
作者
孙宇辉
张沿君
+5 位作者
刘明明
唐丽萍
张光虹
魏兰兰
谷鸿喜
商庆龙
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第9期940-944,共5页
目的表达人乳头瘤病毒16型(HPV16)E2蛋白,并制备小鼠抗HPV16 E2血清。方法采用PCR技术扩增HPV16E2基因,构建入pET21b载体,重组表达载体pET21b-HPV16E2经鉴定后转化大肠埃希菌BL21(DE3),诱导表达并鉴定表达产物。经纯化、变性和复性方法...
目的表达人乳头瘤病毒16型(HPV16)E2蛋白,并制备小鼠抗HPV16 E2血清。方法采用PCR技术扩增HPV16E2基因,构建入pET21b载体,重组表达载体pET21b-HPV16E2经鉴定后转化大肠埃希菌BL21(DE3),诱导表达并鉴定表达产物。经纯化、变性和复性方法,制备可溶性HPV16 E2蛋白。免疫BALB/c小鼠制备抗血清,检测小鼠IFN-γ、CD4^+T细胞、CD8^+T细胞、CD4/CD8比值和抗血清滴度变化。结果酶切和测序结果表明pET21b-HPV16 E2构建成功。表达蛋白相对分子质量(M_r)为42 000,Western blot法证明具有较高特异性。小鼠抗血清效价升高,CD4^+T细胞数量和CD4/CD8比值升高,小鼠IFN-γ无升高。结论成功制备可溶性HPV16 E2蛋白和小鼠抗HPV16 E2高效价的抗血清。
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关键词
人乳头瘤病毒16型
E2蛋白
表达
抗血清
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职称材料
题名
采用正交设计优化HPV16L1重组蛋白表达的实验研究
被引量:
1
1
作者
陈思佳
商庆龙
王燕
李晓波
刘希君
谷鸿喜
机构
哈尔滨医科大学微生物学教研室黑龙江省感染与免疫重点实验室
出处
《微生物学杂志》
CAS
CSCD
2009年第1期46-49,共4页
基金
黑龙江省教育厅资助项目(10553046)
黑龙江省科技攻关项目(GB02C111)
哈尔滨市科委重大攻关项目(2004AA3CS176-1)
文摘
通过正交试验对构建的人乳头瘤病毒(HPV)16型L1蛋白的重组表达菌株pQE31-HPV16L1/M15(pREP4)进行表达条件的优化,以增加目的蛋白的表达量。实验选取影响蛋白表达的4个主要因素,分别为诱导时间、诱导剂浓度、细菌密度和诱导温度,采用四因素两水平正交试验,通过SDS-PAGE及Western blot测定重组表达蛋白,以Tanon凝胶成像系统分析目的蛋白含量作为检测条件优化效果的指标,所得数据采用SAS软件进行统计分析。实验结果表明在37℃、IPTG0.5mmol/L,菌密度OD600为1.0的条件下诱导4h所得蛋白量最大;经统计正交分析的最佳诱导条件为37℃、0.5mmol/LIPTG和菌密度OD600为1.0的条件下诱导7h。经实验验证,应用正交分析的最佳条件诱导所得目的蛋白量最大,但实际中通常采用诱导4h条件。实验证明正交试验可以用于基因工程菌株蛋白表达条件优化过程,提高工作效率。
关键词
人乳头瘤病毒16型
L1蛋白
正交试验
条件优化
Keywords
truman papillomavirus (HPV) type 16
L1 protein
orthogonal analysis
optimization
分类号
R373 [医药卫生—病原生物学]
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职称材料
题名
急性早幼粒细胞白血病细胞分化的调控机制新进展
被引量:
9
2
作者
于丽
吴静
王迪
肖骁
张凤民
机构
哈尔滨医科大学微生物学教研室黑龙江省感染与免疫重点实验室
出处
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第8期1003-1006,共4页
基金
国家自然科学基金(81601428
81773267)
+2 种基金
黑龙江省自然科学基金(QC2017092)
黑龙江省省属高校基本科研业务费基础研究项目(2017JCZX40)
黑龙江省普通本科高等学校青年创新人才培养计划项目(UNPYSCT-2017055)资助
文摘
急性早幼粒细胞白血病(APL)在1957年首次被描述为急性髓系白血病的一个常见亚型,占急性髓系白血病的10%~15%,以t(12; 17)(q22; q12)易位为特征,主要表现为未成熟的粒细胞在发育早期分化阻滞。而影响APL细胞分化的因素有很多,包括基因表达异常、自噬、氧化应激、表观遗传学等。目前,通过促进APL细胞分化的治疗可降低死亡率,延长持续缓解时间。本文主要对调控APL细胞分化的因素及其机制进行综述。
关键词
急性早幼粒细胞白血病
细胞分化
基因表达异常
自噬
氧化应激
表观遗传学
Keywords
Acute promyelocytic leukemia
Cell differentiation
Abnormal gene expression
Autophagy
Reactive oxygen species
Epigenetics
分类号
R733 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
β-内酰胺酶抑制剂研究进展
被引量:
33
3
作者
蔡文辉
张文莉
付英梅
张凤民
机构
哈尔滨医科大学
微生物学
教研室
黑龙江
中医药
大学
出处
《中国抗生素杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第11期805-809,共5页
基金
黑龙江省普通高等学校医学病原学(BSL3)重点实验室开放课题资助项目(项目名称:中药单体对多重耐药Klebsiella pneumoniae的ESBL基因SHV
TEM
+2 种基金
CTX-M表达的影响)
国家自然科学基金资助项目(编号:81101300)
哈尔滨市科技创新人才研究专项资金项目(优秀学科带头人)(编号:2012RFXXS054)
文摘
β-内酰胺酶抑制剂能抑制耐药菌产生的β-内酰胺酶,常与β-内酰胺类抗生素联合使用,能使抗生素中的β-内酰胺环免遭水解,保护抗生素的抗菌作用。1976年,英国从链霉菌中发现第一个β-内酰胺酶抑制剂克拉维酸,其能抑制部分广谱和超广谱β-内酰胺酶,常与阿莫西林联合应用,可使阿莫西林对某些细菌的MIC值降低。随着抗生素的大量使用以及具有β-内酰胺酶相关的耐药性的细菌的增加,许多β-内酰胺酶抑制剂相继被发现。根据β-内酰胺酶抑制剂的结构,主要将其分为含有β-内酰胺环结构的抑制剂和不含β-内酰胺环结构的抑制剂。本文就目前国内外β-内酰胺酶抑制剂的研究现状进行综述。
关键词
Β-内酰胺酶
酶抑制剂
细菌耐药
Keywords
β-lactamase
Inhibitors
Bacterial resistance
分类号
R978.1 [医药卫生—药品]
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职称材料
题名
人乳头瘤病毒16型E2蛋白表达、纯化及抗血清制备
4
作者
孙宇辉
张沿君
刘明明
唐丽萍
张光虹
魏兰兰
谷鸿喜
商庆龙
机构
哈尔滨医科大学
微生物学
教研室
哈尔滨医科大学
附属第一医学院妇科
哈尔滨医科大学
附属肿瘤医院妇科
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第9期940-944,共5页
基金
国家自然科学基金(81000726,30901706)
黑龙江省留学归国基金(LC2009C26)
文摘
目的表达人乳头瘤病毒16型(HPV16)E2蛋白,并制备小鼠抗HPV16 E2血清。方法采用PCR技术扩增HPV16E2基因,构建入pET21b载体,重组表达载体pET21b-HPV16E2经鉴定后转化大肠埃希菌BL21(DE3),诱导表达并鉴定表达产物。经纯化、变性和复性方法,制备可溶性HPV16 E2蛋白。免疫BALB/c小鼠制备抗血清,检测小鼠IFN-γ、CD4^+T细胞、CD8^+T细胞、CD4/CD8比值和抗血清滴度变化。结果酶切和测序结果表明pET21b-HPV16 E2构建成功。表达蛋白相对分子质量(M_r)为42 000,Western blot法证明具有较高特异性。小鼠抗血清效价升高,CD4^+T细胞数量和CD4/CD8比值升高,小鼠IFN-γ无升高。结论成功制备可溶性HPV16 E2蛋白和小鼠抗HPV16 E2高效价的抗血清。
关键词
人乳头瘤病毒16型
E2蛋白
表达
抗血清
Keywords
human papillomavirus type 16
E2 protein
expression
antiserum
分类号
R373.9 [医药卫生—病原生物学]
R392-33 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
采用正交设计优化HPV16L1重组蛋白表达的实验研究
陈思佳
商庆龙
王燕
李晓波
刘希君
谷鸿喜
《微生物学杂志》
CAS
CSCD
2009
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
急性早幼粒细胞白血病细胞分化的调控机制新进展
于丽
吴静
王迪
肖骁
张凤民
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2019
9
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
β-内酰胺酶抑制剂研究进展
蔡文辉
张文莉
付英梅
张凤民
《中国抗生素杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2013
33
在线阅读
下载PDF
职称材料
4
人乳头瘤病毒16型E2蛋白表达、纯化及抗血清制备
孙宇辉
张沿君
刘明明
唐丽萍
张光虹
魏兰兰
谷鸿喜
商庆龙
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2013
0
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