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CM-Dil体外标记骨髓间充质干细胞及其在烧伤大鼠模型肠组织内的示踪
被引量：
5
1
作者
尹飞
郭丽
+4 位作者
孟春阳
周煜博
张晗
王冬耀
杨小玉
《吉林大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第2期211-215,I0001,I0002,共7页
目的:探讨氯甲基苯甲酰胺(CM-Dil)对骨髓间充质干细胞(BMSCs)的体外标记及其在烧伤大鼠模型肠组织内的示踪能力。方法:采用贴壁培养法分离、纯化、扩增BMSCs。碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、表皮生长因子(EGF)和维甲酸(RA)诱导BMSCs向...
目的:探讨氯甲基苯甲酰胺(CM-Dil)对骨髓间充质干细胞(BMSCs)的体外标记及其在烧伤大鼠模型肠组织内的示踪能力。方法:采用贴壁培养法分离、纯化、扩增BMSCs。碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、表皮生长因子(EGF)和维甲酸(RA)诱导BMSCs向神经元样细胞分化,免疫细胞化学法检测神经元表面标志神经细胞特异性标志微管相关蛋白-2(MAP-2)和神经元特异核蛋白(NeuN)的表达。4、6和8 mg·L-1CM-Dil标记BMSCs,CCK-8法检测不同浓度CM-Dil对细胞的毒性作用,流式细胞仪检测其标记率。选用成年雄性Wistar大鼠,制备烧伤大鼠模型,经球后静脉注射1×107个CM-Dil标记的BMSCs。大鼠烧伤2周及6个月后取肠组织,制备冰冻切片,用激光共聚焦显微镜观察BMSCs在大鼠肠组织内的定植情况。结果:免疫细胞化学结果表明,BMSCs诱导分化的神经元样细胞表达NeuN和MAP-2。CCK-8法结果表明,8 mg·L-1CM-Dil组细胞毒性显著高于对照组(P<0.05),4和6 mg·L-1CM-Dil与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。4 mg·L-1CM-Dil标记BMSCs对细胞无毒性,标记率达93.9%,细胞形态无改变。冰冻切片激光共聚焦显微镜观察,CM-Dil标记的BMSCs在大鼠烧伤后2周及6个月的肠组织内定植。结论:CM-Dil可以体外标记BMSCs,可以用于BMSCs在烧伤大鼠模型肠组织组织内的示踪研究。
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关键词
骨髓间充质干细胞
氯甲基苯甲酰胺
烧伤
示踪
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职称材料
题名
CM-Dil体外标记骨髓间充质干细胞及其在烧伤大鼠模型肠组织内的示踪
被引量：
5
1
作者
尹飞
郭丽
孟春阳
周煜博
张晗
王冬耀
杨小玉
机构
吉林
大学
第一
医院
脊柱外科
吉林
大学
公共卫生学院毒理学教研室
哈尔滨医科大学临床附属第二医院医疗系
吉林
大学
中日联谊
医院
骨科
出处
《吉林大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第2期211-215,I0001,I0002,共7页
基金
国家自然科学基金资助课题(30972153/C180103)
吉林省科技厅科技发展计划项目资助课题(200905183)
+1 种基金
吉林省卫生厅科研基金资助课题(20082041)
吉林大学基本科研业务项目科学前沿与交叉学科创新项目资助课题(200903114)
文摘
目的:探讨氯甲基苯甲酰胺(CM-Dil)对骨髓间充质干细胞(BMSCs)的体外标记及其在烧伤大鼠模型肠组织内的示踪能力。方法:采用贴壁培养法分离、纯化、扩增BMSCs。碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、表皮生长因子(EGF)和维甲酸(RA)诱导BMSCs向神经元样细胞分化,免疫细胞化学法检测神经元表面标志神经细胞特异性标志微管相关蛋白-2(MAP-2)和神经元特异核蛋白(NeuN)的表达。4、6和8 mg·L-1CM-Dil标记BMSCs,CCK-8法检测不同浓度CM-Dil对细胞的毒性作用,流式细胞仪检测其标记率。选用成年雄性Wistar大鼠,制备烧伤大鼠模型,经球后静脉注射1×107个CM-Dil标记的BMSCs。大鼠烧伤2周及6个月后取肠组织,制备冰冻切片,用激光共聚焦显微镜观察BMSCs在大鼠肠组织内的定植情况。结果:免疫细胞化学结果表明,BMSCs诱导分化的神经元样细胞表达NeuN和MAP-2。CCK-8法结果表明,8 mg·L-1CM-Dil组细胞毒性显著高于对照组(P<0.05),4和6 mg·L-1CM-Dil与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。4 mg·L-1CM-Dil标记BMSCs对细胞无毒性,标记率达93.9%,细胞形态无改变。冰冻切片激光共聚焦显微镜观察,CM-Dil标记的BMSCs在大鼠烧伤后2周及6个月的肠组织内定植。结论:CM-Dil可以体外标记BMSCs,可以用于BMSCs在烧伤大鼠模型肠组织组织内的示踪研究。
关键词
骨髓间充质干细胞
氯甲基苯甲酰胺
烧伤
示踪
Keywords
bone marrow mesenchymal stem cells
chloromethyl-benzamidodialkylcarbocyanine
burning
tracking
分类号
R332 [医药卫生—人体生理学]
R644 [医药卫生—外科学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
CM-Dil体外标记骨髓间充质干细胞及其在烧伤大鼠模型肠组织内的示踪
尹飞
郭丽
孟春阳
周煜博
张晗
王冬耀
杨小玉
《吉林大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2012
5
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