固相支撑液液萃取/超高效液相色谱-串联质谱法测定牧草中真菌毒素

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作者 韩祎陟 盛万里 +3 位作者 王晓敏 任彩霞 张春艳 郑书展 《分析测试学报》 北大核心 2025年第3期506-513,共8页

建立了基于固相支撑液液萃取和超高效液相色谱-串联质谱技术的牧草中11种常见真菌毒素的快速检测方法。在优化的色谱条件下,实现了两对同分异构体(β-玉米赤霉醇和α-玉米赤霉醇,β-玉米赤霉烯醇和α-玉米赤霉烯醇)的色谱分离。牧草样... 建立了基于固相支撑液液萃取和超高效液相色谱-串联质谱技术的牧草中11种常见真菌毒素的快速检测方法。在优化的色谱条件下,实现了两对同分异构体(β-玉米赤霉醇和α-玉米赤霉醇,β-玉米赤霉烯醇和α-玉米赤霉烯醇)的色谱分离。牧草样品选择含1%甲酸的乙腈/水(体积比8∶2)为提取溶剂,固相支撑液液萃取法上柱萃取前每毫升提取液加入3.0 mL水,使用乙酸乙酯为洗脱液,结果显示净化效果明显,基质效应较弱。在常见的苜蓿、燕麦、羊草、青贮玉米中验证了方法适用性,11种真菌毒素在各自线性范围内线性关系良好(r^(2)>0.995),检出限为0.3~20.3μg/kg,定量下限为0.8~51.4μg/kg,方法的平均回收率为72.7%~108%,相对标准偏差(RSD)为3.4%~8.1%。该方法稳定可靠、操作简便、成本低廉,定量下限满足国内外相关监管限量要求,适用于牧草中多种真菌毒素的同步筛查和确证检测。 展开更多

关键词 真菌毒素 牧草 固相支撑液液萃取 超高效液相色谱-串联质谱

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液液萃取-气相色谱-质谱法测定润滑油中的亚磷酸二甲酯

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作者 林思源 张伟亚 +3 位作者 韩祎陟 陈向阳 余淑媛 任聪 《分析科学学报》 北大核心 2025年第3期263-268,共6页

本文基于液液萃取对润滑油进行提取净化,建立了快速测定润滑油中亚磷酸二甲酯的方法。试样用正己烷(乙腈饱和)溶解,乙腈(正己烷饱和)涡旋振荡提取其中的亚磷酸二甲酯,经提取液净化后,过0.22μm滤膜,结合气相色谱-质谱联用法检测,外标法... 本文基于液液萃取对润滑油进行提取净化,建立了快速测定润滑油中亚磷酸二甲酯的方法。试样用正己烷(乙腈饱和)溶解,乙腈(正己烷饱和)涡旋振荡提取其中的亚磷酸二甲酯,经提取液净化后,过0.22μm滤膜,结合气相色谱-质谱联用法检测,外标法定量。结果表明,亚磷酸二甲酯在0.05~5.0 mg/L质量浓度范围内线性关系良好,线性相关系数大于0.9999,定量限为0.25 mg/kg;齿轮油、切削油、液压油、汽轮机油及发动机油等7种样品基质在0.25、0.50、2.5 mg/kg加标水平下的平均回收率为90.1%~112%,相对标准偏差(n=6)在0.42%~6.24%之间。该方法前处理简单、准确可靠,可满足润滑油中亚磷酸二甲酯的精准检测。 展开更多

关键词 液液萃取 气相色谱-质谱法 润滑油 亚磷酸二甲酯

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炭疽杆菌双重荧光定量PCR检测技术的建立和应用 被引量：2

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作者 王素华 帅江冰 +4 位作者 李舟 袁淑辉 吴绍强 吕继洲 赵治国 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期1658-1665,共8页

为快速和准确检测炭疽杆菌,本研究以炭疽杆菌染色体上的BA5345基因和pXO1质粒上的PA基因为靶基因设计特异性引物和探针,建立了炭疽杆菌双重荧光定量PCR检测方法,对其反应的特异性、敏感性和重复性进行了分析,并与常规PCR方法一起对临床... 为快速和准确检测炭疽杆菌,本研究以炭疽杆菌染色体上的BA5345基因和pXO1质粒上的PA基因为靶基因设计特异性引物和探针,建立了炭疽杆菌双重荧光定量PCR检测方法,对其反应的特异性、敏感性和重复性进行了分析,并与常规PCR方法一起对临床样品进行检测。结果显示,所建立方法特异性强,与蜡样芽胞杆菌群中其他芽胞杆菌无交叉反应;对BA5345基因和PA基因的最低检测限分别为8.0和7.8拷贝·μL^-1,标准曲线相关系数大于0.99,组内和组间CV均小于1.5%。对35份污染皮毛样品检测显示BA5345基因和PA基因的检出率分别为80.0%和82.9%,与常规PCR检测方法相比,敏感性更高。本研究为炭疽杆菌的检测和流行病学调查提供了一种快速、准确的检测方法。 展开更多

关键词 炭疽杆菌 BA5345基因 PA基因 双重荧光定量PCR 检测方法

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反刍动物埃立克体荧光定量PCR检测技术的建立和应用 被引量：1

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作者 王素华 王忠才 +5 位作者 黄凌哲 莫虹斐 吴绍强 吕继洲 赵治国 帅江冰 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第7期1975-1982,共8页

为快速、准确地检测反刍动物埃立克体,本研究以反刍动物埃立克体pCS20为靶基因设计特异性引物和探针,建立了TaqMan和Eva Green荧光定量PCR方法,对其反应的特异性、敏感性和重复性进行了分析,并与OIE推荐的套式PCR方法一起对临床样品进... 为快速、准确地检测反刍动物埃立克体,本研究以反刍动物埃立克体pCS20为靶基因设计特异性引物和探针,建立了TaqMan和Eva Green荧光定量PCR方法,对其反应的特异性、敏感性和重复性进行了分析,并与OIE推荐的套式PCR方法一起对临床样品进行检测。结果显示,本方法特异性强,与牛巴贝斯虫、牛双芽巴贝斯虫、环形泰勒虫、犬埃立克体、牛埃立克体、马埃立克体和立氏埃立克体无交叉反应;TaqMan和Eva Green荧光定量PCR对pCS20质粒标准品的最低检测限分别为17.4拷贝·μL^(-1)和1.74拷贝·μL^(-1),标准曲线相关系数大于0.99,组内和组间CV均小于1.5%。对420只钝眼蜱样本的检测显示,TaqMan和Eva Green荧光定量PCR的检出率分别为25.48%和29.29%,与套式PCR检测方法相比,敏感性更高。本研究为反刍动物埃立克体的检测和流行病学调查提供了一种快速、准确的检测方法。 展开更多

关键词 反刍动物埃立克体 pCS20基因 TaqMan荧光定量PCR Eva Green荧光定量PCR

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基于水凝胶表面增强拉曼光谱(SERS)基底检测研究进展 被引量：1

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作者 汪德颖 盛万里 +3 位作者 邹明强 裴佳欢 罗云敬 齐小花 《光谱学与光谱分析》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2024年第10期2701-2708,共8页

表面增强拉曼光谱(SERS)具有超高灵敏度、指纹信息、少量样本和无损检测等独特优势,设计和制备具有优异重现性和稳定性的SERS基底是实现SERS检测技术进一步发展的关键因素。水凝胶是一种新型的封装材料,其交联聚合物网络具有能够保留大... 表面增强拉曼光谱(SERS)具有超高灵敏度、指纹信息、少量样本和无损检测等独特优势,设计和制备具有优异重现性和稳定性的SERS基底是实现SERS检测技术进一步发展的关键因素。水凝胶是一种新型的封装材料,其交联聚合物网络具有能够保留大量水分的三维分层结构,并且对杂质具有良好的阻隔作用和强大的抗干扰能力。水凝胶SERS基底具有低成本、高灵敏度、快速检测、高通量等诸多优点,在这篇综述中,主要从SERS基底研究进程,水凝胶SERS基底优点,水凝胶SERS基底在食品、生物、环境检测领域的应用三个方面进行综述,以期为水凝胶SERS基底制备提供新的参考。首先,针对SERS基底研究进程,早期的固定金属纳米粒子(MNPs)刚性固态基底中,MNPs倾向于氧化和聚集,SERS基底重现性差,无法对表面粗糙样品进行分析;柔性支撑材料上修饰MNPs的SERS基底中,MNP s检测过程中容易分离,SERS基底灵敏度和稳定性差。为获得具有良好均匀性和稳定性的S ERS基底,将水凝胶与等离子体纳米结构结合,水凝胶作为MNPs的保护层为SERS分析提供了可靠的尺寸和电荷选择性,同时保持了高渗透性。其次,水凝胶SERS基底可以无需样品预处理对待测物实现原位检测,生物相容性复合水凝胶可以直接体内检测,DNA水凝胶可以精确识别,修饰多重抗体的水凝胶可以同时检测多种分析物,可调网孔尺寸的微凝胶对目标物具有选择筛分作用,三维纳米结构的水凝胶提供更多吸附热点。目前,制备的水凝胶SERS微粒、芯片、贴片等在食品安全、生物医药,环境监测的现场痕量分析方面显示出巨大的潜力。综上,水凝胶SERS基底的制备具有很好的发展前景,能够为今后的分析检测领域提供新的借鉴。 展开更多

关键词 水凝胶 表面增强拉曼光谱 基底 快速检测

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免疫磁珠净化/高效液相色谱检测植物油中黄曲霉毒素含量 被引量：3

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作者 韩祎陟 郑书展 +6 位作者 罗荪琳 果旗 赵丹 弓全全 王雄 陈义强 盛万里 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期921-927,共7页

采用基于免疫磁珠净化的高效液相色谱技术测定植物油中黄曲霉毒素B_(1)(AFB_(1))、黄曲霉毒素B_(2)(AFB_(2))、黄曲霉毒素G1(AFG1)和黄曲霉毒素G_(2)(AFG_(2))含量。样品以甲醇-水(70∶30,体积比)提取后,经黄曲霉毒素总量免疫磁珠试剂... 采用基于免疫磁珠净化的高效液相色谱技术测定植物油中黄曲霉毒素B_(1)(AFB_(1))、黄曲霉毒素B_(2)(AFB_(2))、黄曲霉毒素G1(AFG1)和黄曲霉毒素G_(2)(AFG_(2))含量。样品以甲醇-水(70∶30,体积比)提取后,经黄曲霉毒素总量免疫磁珠试剂盒净化,并结合免疫磁珠自动工作站,显著提升了净化效率。4种黄曲霉毒素在一定质量浓度范围内具有良好的线性关系,相关系数(r^(2))均大于0.99,AFB_(1)与AFB_(2)、AFG1与AFG_(2)的定量下限分别为0.05μg/kg和0.10μg/kg。4种毒素在5种商品植物油基质中的平均回收率为74.0%~96.0%,日间和日内相对标准偏差(RSD)均小于7.0%。所建立的方法与国标GB 5009.22-2016的免疫亲和柱法无显著性差异,方法准确、灵敏,适用于植物油中4种黄曲霉毒素的同时定量分析。 展开更多

关键词 植物油 黄曲霉毒素 免疫磁珠 高效液相色谱

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免疫磁珠净化-高效液相色谱法测定香辛料中的黄曲霉毒素

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作者 盛万里 韩祎陟 +5 位作者 刘丹 罗荪琳 果旗 赵丹 王雄 陈义强 《农产品加工》 2024年第19期64-66,73,共4页

为更好地监测辣椒、花椒等香辛料中黄曲霉毒素暴露状况,建立了基于免疫磁珠净化的高效液相色谱法测定香辛料中4种黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2。样品经乙腈-水(84+16,V+V)提取后,通过黄曲霉毒素总量免疫磁珠试剂盒净化,并结合CLOVER免疫磁... 为更好地监测辣椒、花椒等香辛料中黄曲霉毒素暴露状况,建立了基于免疫磁珠净化的高效液相色谱法测定香辛料中4种黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2。样品经乙腈-水(84+16,V+V)提取后,通过黄曲霉毒素总量免疫磁珠试剂盒净化,并结合CLOVER免疫磁珠自动工作站,显著提升了净化效率。加标回收试验结果表明,在辣椒、花椒等复杂样品基质中,4种毒素的平均回收率为86%~111%,相对标准偏差小于7%。总体而言,所建立的方法准确、灵敏,适用于调味品中4种黄曲霉毒素的同步定量检测。 展开更多

关键词 调味品 黄曲霉毒素 免疫磁珠 高效液相色谱

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基于纤维素膜吸附的黄瓜基因组DNA快速提取方法 被引量：2

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作者 薛强 王燕飞 +3 位作者 盛万里 陈艳 金涌 邹明强 《中国瓜菜》 CAS 北大核心 2021年第10期39-43,共5页

为快速获取与鉴定黄瓜基因组DNA,建立一种基于纤维素膜吸附的黄瓜基因组DNA快速提取方法,以市售华北型黄瓜为材料,制备纤维素膜片,筛选黄瓜裂解试剂,优化提取反应条件,建立了包括黄瓜裂解、膜片吸附、膜片清洗、核酸洗脱等步骤的黄瓜基... 为快速获取与鉴定黄瓜基因组DNA,建立一种基于纤维素膜吸附的黄瓜基因组DNA快速提取方法,以市售华北型黄瓜为材料,制备纤维素膜片,筛选黄瓜裂解试剂,优化提取反应条件,建立了包括黄瓜裂解、膜片吸附、膜片清洗、核酸洗脱等步骤的黄瓜基因组DNA提取方法,可以在5 min内从黄瓜果实中提取基因组DNA用于PCR扩增。黄瓜果实的表皮、表层果肉和中心果肉都可以实现基因组DNA提取和PCR扩增,最少可以从13 mg黄瓜果实中提取并检测到黄瓜管家基因Act1片断。利用膜吸附DNA提取技术实现了黄瓜基因组DNA的快速提取,为黄瓜基因研究与快速鉴定提供了一种简便方法。 展开更多

关键词 黄瓜 膜吸附 基因组DNA提取

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聚乙二醇修饰的槲皮素磁性分子印迹聚合物合成及其应用 被引量：6

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作者 曹玉天 盛万里 +4 位作者 齐小花 张伟 谢子奇 罗云敬 邹明强 《分析科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第6期719-725,共7页

本文以磁性物质为负载材料,槲皮素(Que)为模板分子,丙烯酰胺(AM)为功能单体,乙腈和水为致孔剂,采用本体聚合法,在改性剂修饰后的磁性物质表面制备槲皮素磁性分子印迹聚合物(Que-MMIPs)。利用扫描电镜、透射电镜、红外光谱等技术对其进... 本文以磁性物质为负载材料,槲皮素(Que)为模板分子,丙烯酰胺(AM)为功能单体,乙腈和水为致孔剂,采用本体聚合法,在改性剂修饰后的磁性物质表面制备槲皮素磁性分子印迹聚合物(Que-MMIPs)。利用扫描电镜、透射电镜、红外光谱等技术对其进行了表征。结合平衡吸附实验证明:其最大吸附容量为4.38 mg/g,最佳吸附时间约为25 min。以该印迹材料为吸附填料制备分子印迹固相萃取柱,结合高效液相色谱法快速检测苹果皮、西兰花、乌龙茶以及沙棘粉中槲皮素的含量,方法线性范围为3~800μmol/L(R^(2)=0.9990),检出限(S/N=3)为0.9μmol/L,沙棘粉中测得Que的平均检出量为57μmol/L,加标回收率为90%~114%。研究表明,该磁性吸附材料在实际样品的检测中对Que具有良好的吸附效果。 展开更多

关键词 槲皮素 磁性分子印迹聚合物 固相萃取 食品样品

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反刍动物埃立克体微滴数字PCR方法的建立及初步应用 被引量：6

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作者 王素华 王忠才 +6 位作者 黄凌哲 吕继洲 吴绍强 赵治国 付海滨 韩小虎 张舟 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期60-64,共5页

为建立反刍动物埃立克体(E.ruminantium)准确定量的微滴数字PCR方法(ddPCR),本研究以E.rum-inantium pCS20基因为靶基因,选取保守区域设计引物和探针,建立了E.ruminantium ddPCR方法。利用本研究建立的ddPCR方法检测E.ruminantium、牛... 为建立反刍动物埃立克体(E.ruminantium)准确定量的微滴数字PCR方法(ddPCR),本研究以E.rum-inantium pCS20基因为靶基因,选取保守区域设计引物和探针,建立了E.ruminantium ddPCR方法。利用本研究建立的ddPCR方法检测E.ruminantium、牛巴贝斯虫、牛双芽巴贝斯虫、环形泰勒虫、无形体、犬埃立克体、牛埃立克体、马埃立克体和立氏埃立克体等,结果显示仅E.ruminantium出现特异性扩增,而与其他寄生虫均无交叉反应,特异性强;将pUC57-pCS20重组质粒标准品10倍倍比稀释(1×10^(-1)拷贝/μL~1×10^(5)拷贝/μL)后,利用该ddPCR方法检测,结果显示,该方法对重组质粒标准品的检测限为1.8拷贝/μL,比相应荧光定量PCR方法的敏感性高10倍,本实验建立的ddPCR方法敏感性高;批内和批间重复性试验结果变异系数(CV)均小于2%,重复性好。利用建立的ddPCR方法对50只钝眼蜱样品检测,结果显示,阳性样品反刍动物埃立克体核酸的最低拷贝数为26拷贝/μL,ddPCR和荧光定量PCR检测试剂盒的检出率均为16.0%(8/50)。本研究首次建立的ddPCR方法敏感性高、特异性强、重复性好,可作为E.ruminantium准确定量检测的有效手段。 展开更多

关键词 反刍动物埃立克体 检测 pCS20基因 微滴数字PCR

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顶空固相微萃取-气相色谱-质谱联用分析延边牛不同肌肉组织的挥发性风味物质 被引量：4

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作者 孙斌 崔岩 +6 位作者 盛万里 张军芳 唐琳 王恩泽 王英 李强 李香子 《肉类研究》 2022年第4期35-40,共6页

为探究延边牛不同肌肉组织的挥发性风味物质,以6头同一月龄、同一生长条件的延边牛屠宰后的臀肉、眼肉、上脑、里脊、脊肋排和牛腩6个部位为材料,采用顶空固相微萃取结合气相色谱-质谱联用对其挥发性风味物质进行检测,通过峰面积归一法... 为探究延边牛不同肌肉组织的挥发性风味物质,以6头同一月龄、同一生长条件的延边牛屠宰后的臀肉、眼肉、上脑、里脊、脊肋排和牛腩6个部位为材料,采用顶空固相微萃取结合气相色谱-质谱联用对其挥发性风味物质进行检测,通过峰面积归一法确定各成分的相对含量,确定不同部位肌肉关键性挥发性风味物质。结果表明:共检测出醛类、醇类、酮类、烷烃类、酯类、胺类和烯烃类共79种挥发性化合物,其中脊肋排29种、里脊40种、上脑28种、臀肉25种、牛腩29种、眼肉35种;6个部位间挥发性化合物的种类及含量存在明显差异,与其他部位相比,牛腩中醛类和胺类化合物的相对含量最高,里脊的酯类与醇类化合物相对含量最高,脊肋排的烯烃类与烷烃类化合物相对含量最高,酮类化合物并没有在脊肋排中被检测到,臀肉中富含较多的酮类化合物。 展开更多

关键词 延边牛 不同部位 风味物质 气相色谱-质谱联用

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基于低共熔溶剂的分散液液微萃取/超高效液相色谱-串联质谱法测定马肉中非甾体抗炎药 被引量：12

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作者 郑书展 任彩霞 +2 位作者 张春艳 王晓敏 盛万里 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期760-766,共7页

采用氯化胆碱和苯酚合成低共熔溶剂(DES),以其为萃取剂建立了分散液液微萃取(DLLME)结合超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)测定马肉中10种非甾体抗炎药的方法。优化了提取溶剂、萃取剂、分散剂和盐的加入量等条件,最佳萃取条件为:以... 采用氯化胆碱和苯酚合成低共熔溶剂(DES),以其为萃取剂建立了分散液液微萃取(DLLME)结合超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)测定马肉中10种非甾体抗炎药的方法。优化了提取溶剂、萃取剂、分散剂和盐的加入量等条件,最佳萃取条件为:以氯化胆碱和苯酚(比例为1∶2)合成的低共熔溶剂为萃取剂,马肉样品经5 mL含10 mmol/L抗坏血酸的20 mmol/L醋酸铵缓冲液(乙酸调至pH 3.5)提取,加入1.0 g氯化钠、0.8 mL萃取剂和0.8 mL分散剂,旋涡混合1 min,离心后取上清液经超高效液相色谱-串联质谱测定,外标法定量。结果显示,10种非甾体抗炎药在各自质量浓度范围内呈良好线性关系,相关系数(r 2)均大于0.996,检出限为0.05~2.0μg/kg,定量下限为0.10~5.0μg/kg,平均回收率为73.5%~94.6%,相对标准偏差(RSD)为1.1%~8.1%。该方法操作简单、准确高效、绿色环保,可用于马肉中非甾体抗炎药的测定。 展开更多

关键词 低共熔溶剂 分散液液微萃取 马肉 非甾体抗炎药 超高效液相色谱-串联质谱

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炭疽杆菌RPA等温检测方法的建立和应用 被引量：8

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作者 王素华 袁淑辉 +3 位作者 帅江冰 王忠才 蔡军 赵治国 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期590-594,共5页

为建立一种简单、快速的炭疽杆菌(Bacillus anthracis)分子检测方法,本研究基于炭疽杆菌BA5345基因保守序列,设计合成1对重组酶聚合酶扩增(RPA)引物,通过对反应时间的优化,建立39℃恒温水浴锅检测炭疽杆菌的RPA方法。结果显示,所建立的... 为建立一种简单、快速的炭疽杆菌(Bacillus anthracis)分子检测方法,本研究基于炭疽杆菌BA5345基因保守序列,设计合成1对重组酶聚合酶扩增(RPA)引物,通过对反应时间的优化,建立39℃恒温水浴锅检测炭疽杆菌的RPA方法。结果显示,所建立的RPA方法在39℃水浴锅中恒温反应30 min,能够特异性的检测炭疽杆菌;以重组质粒pUC57-BA5345作为模板,RPA方法对其检测下限为102拷贝/μL,与荧光定量PCR检测试剂盒检测下限一致,比常规PCR方法敏感性高100倍;RPA方法对污染皮毛临床样品的阳性检出率为65.71%,略低于荧光定量PCR试剂盒的检出率(71.43%),明显高于常规PCR的检出率(42.86%)。本研究建立的RPA方法操作简单、反应快速,结果确实可靠,适用于炭疽杆菌的快速检测。 展开更多

关键词 炭疽杆菌 BA5345基因 等温扩增 聚合酶重组酶扩增 快速检测

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基于网络药理学和分子对接探究诃子鞣酸防治奶牛子宫内膜炎的作用机制 被引量：3

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作者 刘鑫煜 崔强 +3 位作者 张兰欣 范佺荣 李政忆 高瑞峰 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期1632-1641,共10页

【目的】基于网络药理学结合分子对接技术探究诃子鞣酸防治奶牛子宫内膜炎的作用,并阐明其潜在机制。【方法】通过SwissTargetPrediction和PharmMapper数据库收集和预测诃子鞣酸的作用靶点,通过UniProt数据库标准化并去重。从OMIM和DRUG... 【目的】基于网络药理学结合分子对接技术探究诃子鞣酸防治奶牛子宫内膜炎的作用,并阐明其潜在机制。【方法】通过SwissTargetPrediction和PharmMapper数据库收集和预测诃子鞣酸的作用靶点,通过UniProt数据库标准化并去重。从OMIM和DRUGBANK数据库中获取奶牛子宫内膜炎相关基因并去重,绘制Venn图获取诃子鞣酸和奶牛子宫内膜炎交集靶点。使用STRING数据库构建蛋白-蛋白相互作用(PPI)网络,使用DAVID数据库进行GO功能和KEGG通路富集分析。利用分子对接技术对KEGG通路富集分析后得到的关键通路靶点进行分子对接,以验证网络药理学分析结果的准确性。【结果】通过多个数据库检索及筛选获得诃子鞣酸潜在靶点基因333个,奶牛子宫内膜炎相关靶点基因342个,共有18个交集靶点。PPI结果显示,诃子鞣酸可能作用于前列腺素-内过氧化物酶合酶1(prostaglandin G/H synthase 1,PTGS1)、PTGS2、花生四烯酸12-脂氧合酶(arachidonate 12-lipoxygenase,ALOX12)、ALOX15等18个关键靶点。GO功能和KEGG通路富集分析结果显示,诃子鞣酸可通过脂氧合酶途径、花生四烯酸代谢通路、雌激素信号等通路防治奶牛子宫内膜炎。分子对接结果显示,诃子鞣酸与所得关键靶点均具有良好的结合活性,诃子鞣酸可通过多靶点发挥防治奶牛子宫内膜炎的作用,证明网络药理学预测结果准确。【结论】诃子鞣酸可能通过与PTGS1、PTGS2、ALOX12、细胞肿瘤抗原p53(cellular tumor antigen p53,TP53)结合,在脂氧合酶通路、花生四烯酸代谢过程上发挥防治奶牛子宫内膜炎的作用。 展开更多

关键词 诃子鞣酸 奶牛子宫内膜炎 网络药理学 靶点 分子对接

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2018—2020年内蒙古畜牧从业人员布鲁氏菌病首诊阳性病例分析 被引量：2

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作者 刘丹 李菁雯 +3 位作者 延涵 陈林军 赵治国 崔强 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2023年第12期144-152,共9页

为了分析2018—2020年呼和浩特市某布鲁氏菌病门诊畜牧相关从业人员首诊阳性病例,了解该地区畜牧从业人员感染者的流行病学特点,为布鲁氏菌病预防和人畜疫情控制提供科学依据和合理建议。本试验通过调查统计畜牧从业人员布鲁氏菌病首诊... 为了分析2018—2020年呼和浩特市某布鲁氏菌病门诊畜牧相关从业人员首诊阳性病例,了解该地区畜牧从业人员感染者的流行病学特点,为布鲁氏菌病预防和人畜疫情控制提供科学依据和合理建议。本试验通过调查统计畜牧从业人员布鲁氏菌病首诊阳性就诊者的就诊时间、性别、年龄、职业、地区和动物接触史等,并用SPSS 18.0软件对数据进行分析。结果显示,从该门诊共筛选出畜牧从业人员布鲁氏菌病首诊阳性就诊者合格资料4594份,男性占比高于女性;集中分布在45~55岁;散养农户占比远高于其他职业;高发时间集中在每年的3~6月份;主要集中在呼和浩特市及周边旗县;感染者动物接触史以接触过羊类的占比最高。显性感染病例中,男性占比高于女性;高年龄段占比高于低年龄段;散养农户占比高于其他职业;5月份占比高于其他月份;呼和浩特市及周边旗县占比高于其他地区;仅有羊类接触史的人员占比高于其他人员。隐性感染病例中,仅有牛类接触史的人员占比高于其他人员。 展开更多

关键词 布鲁氏菌病 畜牧 首诊阳性 病例分析

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马驽巴贝斯虫PCR和qPCR检测方法的建立 被引量：1

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作者 李菁雯 杨帆 +3 位作者 崔强 张鹏飞 聂芝君 陈少博 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2022年第1期134-140,共7页

马驽巴贝斯虫是一种寄生于马属动物的血液原虫,给马产业造成巨大的经济损失。本研究旨在建立两种高效、可靠的PCR诊断技术,为进一步提高口岸检疫工作效率奠定基础。根据马驽巴贝斯虫Bc48基因序列,设计了一对特异性引物和荧光探针,建立了... 马驽巴贝斯虫是一种寄生于马属动物的血液原虫,给马产业造成巨大的经济损失。本研究旨在建立两种高效、可靠的PCR诊断技术,为进一步提高口岸检疫工作效率奠定基础。根据马驽巴贝斯虫Bc48基因序列,设计了一对特异性引物和荧光探针,建立了PCR和qPCR检测方法,测试了两种方法的特异性、灵敏性、稳定性。结果显示:建立的两种方法均具有良好的特异性;PCR方法的最低检出限为4.04×10^(2) copies/μL,qPCR方法的最低检出限为4.04×10^(1) copies/μL;对33份马血样品进行检测,结果qPCR检出的阳性样品数为23份(69.7%),而PCR检出的阳性样品数为9份(27.3%)。表明两种方法均可成功用于马驽巴贝斯虫的检验,但是荧光定量PCR方法的灵敏度明显优于PCR方法。 展开更多

关键词 马驽巴贝斯虫病 PCR qPCR 检测

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山羊痘病毒和绵羊痘病毒荧光PCR检测方法的建立与应用

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作者 啜微微 耿庆华 +5 位作者 赵永刚 孟祥勇 张敏 韩小虎 赵治国 付海滨 《农业与技术》 2023年第9期93-97,共5页

为了建立山羊痘病毒(Goat pox virus,GTPV)和绵羊痘病毒(Sheep pox virus,SPPV)快速荧光PCR检测方法,本研究对2种病毒的保守基因P32基因在GeneBank上进行Blast比对,设计合成特异性荧光PCR引物和探针,构建了该病原特异性基因P32的重组质... 为了建立山羊痘病毒(Goat pox virus,GTPV)和绵羊痘病毒(Sheep pox virus,SPPV)快速荧光PCR检测方法,本研究对2种病毒的保守基因P32基因在GeneBank上进行Blast比对,设计合成特异性荧光PCR引物和探针,构建了该病原特异性基因P32的重组质粒。建立了可以同时检测山羊痘病毒和绵羊痘病毒荧光PCR方法,对方法的特异性、敏感性和重复性进行研究,结果显示该方法具有高度的特异性,除了识别山羊痘病毒和绵羊痘病毒基因组外,对羊的基因组及山羊和绵羊常见病原的基因组均不发生交叉反应。在敏感性和重复性实验中,该方法对山羊痘病毒和绵羊痘病毒的检测限为1000Copies·mL-1,变异系数小于3%,因此具有优良的敏感性和稳定性。用该方法检测实验室模拟制备的样品,检测结果与预期相符合。 展开更多

关键词 山羊痘病毒 绵羊痘病毒 荧光PCR方法

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保泰松在马病治疗中的应用

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作者 李政忆 崔强 +3 位作者 张兰欣 刘鑫煜 范佺荣 高瑞峰 《动物医学进展》 北大核心 2022年第6期109-114,共6页

在马病的临床治疗中,保泰松(PBZ)是最为常用的非甾体抗炎药物(NSAID),且对多种疾病有着良好的治疗效果。例如在对软组织损伤及骨骼、肌肉等方面的疾病治疗上,尤其是对轻度跛行治疗效果最佳。但保泰松也具有一定的毒性,主要是对胃肠道的... 在马病的临床治疗中,保泰松(PBZ)是最为常用的非甾体抗炎药物(NSAID),且对多种疾病有着良好的治疗效果。例如在对软组织损伤及骨骼、肌肉等方面的疾病治疗上,尤其是对轻度跛行治疗效果最佳。但保泰松也具有一定的毒性,主要是对胃肠道的影响以及肾脏毒性。论文将保泰松在国内外马病治疗上应用的文献进行整理和总结,对保泰松的理化性质、药理作用、临床应用以及与其他药物的相互作用等方面进行综述,对马匹产生的不良反应进行了分析和讨论,以期为进一步开展保泰松在马病治疗上的应用研究提供参考。 展开更多

关键词 保泰松 马 药物应用 不良反应

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A型牛轮状病毒SYBR Green I RT-qPCR检测方法的建立

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作者 焦迪 王瑞 +8 位作者 郝艳霞 张晓倩 崔强 王海艳 陈林军 延涵 罗晓平 李军燕 赵治国 《中国动物检疫》 2025年第9期69-76,共8页

A型牛轮状病毒(BRV-A)是引起牛腹泻的重要病原之一,对养牛业危害最大。为建立一种针对BRV-A的快速、高通量、低成本检测方法,根据BRV-A的VP6基因保守区设计特异性引物,建立了检测BRV-A的SYBR Green I RT-qPCR方法。该方法对浓度梯度为4.... A型牛轮状病毒(BRV-A)是引起牛腹泻的重要病原之一,对养牛业危害最大。为建立一种针对BRV-A的快速、高通量、低成本检测方法,根据BRV-A的VP6基因保守区设计特异性引物,建立了检测BRV-A的SYBR Green I RT-qPCR方法。该方法对浓度梯度为4.41×10^(8)~4.41×10^(2) copies/μL质粒标准品的扩增Ct值与拷贝数浓度呈良好的线性关系,熔解曲线为单峰;与其他引起牛腹泻的常见病原无交叉反应,最低检测限为4.41×10^(1) copies/μL,批内、批间重复性试验Ct值变异系数均低于1%;对临床粪便样品的阳性检出率高于地方标准中的PCR方法,且检测结果符合性较好。综上,本研究建立的BRV-A SYBR Green I RT-qPCR检测方法灵敏、特异、稳定,且操作简单、成本低,为临床样品的大规模BRV-A检测及其感染的早期诊断提供了技术支撑。 展开更多

关键词 牛轮状病毒 SYBR Green I荧光RT-PCR 检测方法

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