结核病患者血清蛋白质组学研究实践的启示 被引量：1

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作者 刘玉美 李笑颜 +1 位作者 罗强生 刘志辉 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2012年第15期2642-2643,共2页

H37Rv全基因组序列图，标志着结核病研究进入后基因组时代。以双向电泳、生物质谱和生物信息学为核心技术的蛋白质组学开启了后基因组时代研究之门。蛋白质作为生物生命活动的直接体现者，必将体现于结核病发生、发展的各个环节和方面... H37Rv全基因组序列图，标志着结核病研究进入后基因组时代。以双向电泳、生物质谱和生物信息学为核心技术的蛋白质组学开启了后基因组时代研究之门。蛋白质作为生物生命活动的直接体现者，必将体现于结核病发生、发展的各个环节和方面，为探讨结核病血清学诊断新型标志物，笔者进行了结核病血清蛋白质组学的相关研究。在研究过程中，笔者获益匪浅．现总结报告如下。 展开更多

关键词 血清蛋白质组学 结核病患者 后基因组时代 生物信息学 全基因组序列 H37RV 血清学诊断 双向电泳

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不同结核病患者群血清蛋白质谱分析与比较 被引量：2

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作者 黄业伦 刘玉美 +5 位作者 谭守勇 刘健雄 李昕洁 罗强生 曹翌明 刘志辉 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2012年第23期4001-4003,共3页

目的:比较分析菌阳肺结核与菌阴肺结核、肺结核与肺外结核患者的血清蛋白质谱,从蛋白质组学层面了解不同结核病患者群血清蛋白质谱的特征,为结核病诊断标志物的筛选提供指导。方法:应用表面增强激光解吸-电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS... 目的:比较分析菌阳肺结核与菌阴肺结核、肺结核与肺外结核患者的血清蛋白质谱,从蛋白质组学层面了解不同结核病患者群血清蛋白质谱的特征,为结核病诊断标志物的筛选提供指导。方法:应用表面增强激光解吸-电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)蛋白质芯片系统,采用弱阳离子交换蛋白质芯片(WCX)对54例菌阳肺结核、45例菌阴肺结核、18例肺外结核患者的血清蛋白质进行检测;应用ClinProTools分析软件依据各蛋白质的质谱峰面积计算相对强度表示该血清蛋白质的丰度,采用t检验(对Anderson-Darling检验P>0.05的正态分布者)或Wilcoxon检验(对Anderson-Darling检验P<0.05的非正态分布者)分析比较菌阳肺结核与菌阴肺结核、肺结核与肺外结核患者各血清蛋白质的平均丰度。结果:(1)在3种不同结核病患者人群中均捕获到102种相对分子质量在1011.41～9435.07的不同血清蛋白质,经Anderson-Darling检验,在菌阳肺结核、菌阴肺结核、肺外结核患者人群中分别有31、23和29种血清蛋白质呈正态分布。(2)正态分布的血清蛋白质在不同结核病患者人群间其水平未见显著差异。(3)非正态分布的血清蛋白质:在菌阳肺结核与菌阴肺结核患者人群间其水平未见显著差异;在肺结核与肺外结核患者人群间发现1个差异血清蛋白质(P=0.0251),其相对分子质量为5753.76,在肺结核与肺外结核患者人群血清中的平均丰度分别为15.42±4.86和28.29±14.08。结论:不同结核病患者群的血清蛋白质谱具有同质性,为普遍适用性结核病血清学诊断标志物的筛选提供了科学依据。 展开更多

关键词 结核 血清蛋白质 表面增强激光解吸-电离飞行时间质谱 弱阳离子交换蛋白质芯片

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应用MPT64分泌为结核杆菌生长指示的适宜检测时点研究 被引量：2

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作者 许婉华 黄业伦 +4 位作者 刘燕文 胡丽环 罗少珍 孟繁荣 刘志辉 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2012年第13期2262-2264,共3页

目的:探讨应用免疫胶体金法检测结核分枝杆菌复合群特异分泌蛋白MPT64指示结核杆菌生长的适宜检测时间,为创建新型、实用的结核杆菌分离培养方法提供科学依据。方法:在第7、14、21、28、35、42天(即1～6周末)对BACTEC MGIT960分枝杆菌... 目的:探讨应用免疫胶体金法检测结核分枝杆菌复合群特异分泌蛋白MPT64指示结核杆菌生长的适宜检测时间,为创建新型、实用的结核杆菌分离培养方法提供科学依据。方法:在第7、14、21、28、35、42天(即1～6周末)对BACTEC MGIT960分枝杆菌快速培养样本实验瓶进行MPT64检测,以出现阳性检测结果或第42天为检测终点,以BACTEC MGIT960分枝杆菌快速培养及菌种鉴定结果为参照标准分析适宜的检测时间。结果:在1265例临床样本分枝杆菌分离培养中,依据后续分枝杆菌菌种鉴定结果,应用BACTEC MGIT960分枝杆菌快速培养法,178例样本分离到结核杆菌,其中168例MPT64检测阳性;168例MPT64检测阳性样本中,在第1、2、3、4、5、6周呈现MPT64检测阳性的样本数分别为29、75、47、9、6和2例,其阳性检出率分别占MPT64检测阳性的17.26%、61.90%、89.88%、95.23%、98.81%和100%。结论:应用免疫胶体金法检测结核分枝杆菌复合群特异分泌蛋白MPT64指示结核杆菌生长,在2、4周末可分别检测到60%与95%以上的MPT64阳性样本,可以分别视为快速检测和培养终点检测的适宜时点,但更望能有连续监测方法的问世。 展开更多

关键词 结核杆菌 MPT64 分离培养

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4种蛋白质／多肽在结核病患者与健康人血清中的表达和意义

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作者 刘志辉 刘玉美 +6 位作者 孟繁荣 谢贝 王楠 邓晓华 吴玲 张言斌 谭守勇 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2014年第23期3769-3771,共3页

目的:评价质荷比(m/z)分别为1 060、1 944、2 081和3 954的4种血清蛋白质/多肽(以下分别用A、B、C和D表示)区分结核病患者与健康人的能力。方法:应用表面增强激光解析-电离飞行时间质谱技术检测57例结核病患者和30例健康人的血清蛋白质... 目的:评价质荷比(m/z)分别为1 060、1 944、2 081和3 954的4种血清蛋白质/多肽(以下分别用A、B、C和D表示)区分结核病患者与健康人的能力。方法:应用表面增强激光解析-电离飞行时间质谱技术检测57例结核病患者和30例健康人的血清蛋白质谱,分析其A、B、C、D中的表达水平(用相对强度表示)并比较其差异,并应用诊断性试验评价方法分析其区分结核病患者群与健康人群的能力。结果:(1)A、B、C、D在结核病患者和健康人中的表达水平分别为1±11、1 597±3 102、460±765、1 208±1 003和123±201、47±98、36±93、397±355,两者差异显著。(2)以A、B、C、D血清表达水平为指标判定结核病患者和健康人的ROC曲线下面积分别为0.644、0.848、0.735和0.810,分界值分别为≤166、≥318、≥48和≥728。结论:B、C和D 3种血清蛋白质/多肽具有较好的区分结核病患者与健康人的能力,有望作为新型结核病诊断候选标志物。 展开更多

关键词 结核病 蛋白质/多肽 诊断性试验评价 表面增强激光解析-电离飞行时间质谱 (SELDI-TOF-MS)

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我国利福平敏感结核杆菌rpoB基因利福平耐药决定区序列循证分析 被引量：11

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作者 孟繁荣 刘志辉 +2 位作者 谢贝 张言斌 谭守勇 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2013年第21期3601-3604,共4页

目的:了解我国利福平敏感结核杆菌rpoB基因利福平耐药决定区(rifampicin resistancedetermining region,RRDR)序列的多态性特征。方法:采用"rpoB AND Mycobacterium tuberculosis AND(China OR Hong Kong OR Macon OR Taiwan)"... 目的:了解我国利福平敏感结核杆菌rpoB基因利福平耐药决定区(rifampicin resistancedetermining region,RRDR)序列的多态性特征。方法:采用"rpoB AND Mycobacterium tuberculosis AND(China OR Hong Kong OR Macon OR Taiwan)"检索策略在Pubmed数据库中检索文献,循证分析Pubmed数据库中截止至2013年4月30日有关我国结核杆菌rpoB基因突变分子特征的研究文献。结果:36篇文献纳入研究,5 136株利福平敏感结核杆菌rpoB基因RRDR序列信息得以分析,38株(0.74%)rpoB基因RRDR序列呈现基因突变,涉及8个位点,分别为511(11株)、533(7株)、531(6株)、526(5株)、516(4株)、518(2株)、519(2株)、521(2株)等,其中1株涉及511/526双位点。结论:我国结核杆菌rpoB基因RRDR序列存在沉默突变现象,并非所有RRDR序列改变均与结核杆菌利福平药物敏感性有关。 展开更多

关键词 分枝杆菌 结核 利福平 RPOB基因 利福平耐药决定区(RRDR) 沉默突变

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1819株非结核分枝杆菌行药物敏感性试验的结果分析 被引量：29

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作者 吴龙章 谭守勇 +5 位作者 谭耀驹 杨建良 潘美玉 陈剑锋 曾少芳 刘燕文 《中国防痨杂志》 CAS 2012年第12期821-824,共4页

目的对广州市1819株非结核分枝杆菌临床分离株行药物敏感度试验的结果进行回顾性分析,为临床第一线治疗非结核分枝杆菌病提供可靠的科学依据。方法按照中国防痨协会制定的《结核病诊断实验室检验规程》,对2009—2011年来自广州市胸科医... 目的对广州市1819株非结核分枝杆菌临床分离株行药物敏感度试验的结果进行回顾性分析,为临床第一线治疗非结核分枝杆菌病提供可靠的科学依据。方法按照中国防痨协会制定的《结核病诊断实验室检验规程》,对2009—2011年来自广州市胸科医院门诊就诊和住院患者以及少部分院外单位在实验室中从痰液、支气管冲洗液、胸腹腔积液、尿液以及咽拭子等样品培养出的14 095株分枝杆菌进行菌型鉴定,对确认为NTM的实验菌株3264株,选择没有混合感染的株种1819株采用临床上常用的一、二线药物(包括INH、RFP、S、EMB、Am、Clr、Lfx、Mfx、环丙沙星(CIP)、力克菲蒺、Rfb、Pto和Cm共计13种药物)进行敏感度试验。结果非结核分枝杆菌对INH和力克菲蒺耐药率达96.15%(1749/1819)和95.41%(1248/1308);其他依次为S 76.25%(1387/1819)、Pto 73.94%(817/1105)、Lfx 72.94%(954/1308)、RFP 72.51%(1319/1819)、EMB 70.42%(1281/1819)、Mfx65.29%(854/1308)、CIP 60.13%(543/903)、Rfb 56.87%(236/415)和Cm 50.50%(102/202);而Clr和Am对非结核分枝杆菌的敏感率为88.17%(1163/1319)和67.73%(892/1317)。结论非结核分枝杆菌对一线抗结核药物具有高度的原始耐受性,而大环内酯类的Clr和氨基糖甙类的Am则对非结核分枝杆菌有较强的抑菌效能,因而对实验室中分离出的非结核分枝杆菌有必要进行药物敏感度试验。 展开更多

关键词 微生物敏感性试验 分枝杆菌 非典型性 回顾性研究

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母牛分枝杆菌菌苗辅助治疗对糖尿病并肺结核患者细胞免疫功能低下的疗效 被引量：12

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作者 李艳 谭守勇 +4 位作者 邝浩斌 刘志辉 覃红娟 冯治宇 汪敏 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2012年第12期1994-1996,共3页

目的:探讨母牛分枝杆菌菌苗对糖尿病并肺结核患者免疫功能低下及其治疗效果的影响。方法:以糖尿病并肺结核患者为研究对象,CD4+淋巴细胞低下者随机分为治疗组和对照组Ⅰ,CD4+淋巴细胞正常者为对照组Ⅱ,3组均予以降糖和抗痨治疗,治疗组... 目的:探讨母牛分枝杆菌菌苗对糖尿病并肺结核患者免疫功能低下及其治疗效果的影响。方法:以糖尿病并肺结核患者为研究对象,CD4+淋巴细胞低下者随机分为治疗组和对照组Ⅰ,CD4+淋巴细胞正常者为对照组Ⅱ,3组均予以降糖和抗痨治疗,治疗组联用母牛分枝杆菌菌苗,比较分析3组患者治疗2个月后痰菌阴转,肺部病灶吸收情况。结果:在强化治疗1个月末和2个月末,对照组Ⅱ痰菌阴转率均较高(59.0%、75.0%)。空洞缩小闭合率以治疗组最高(92.0%)。治疗有效率以治疗组最高(72.4%)。结论:免疫功能低下的糖尿病并肺结核患者联用母牛分枝杆菌菌苗治疗,可促进痰菌阴转和空洞愈合。 展开更多

关键词 结核 肺 糖尿病 细胞免疫功能

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结核性胸膜炎患者结核分枝杆菌培养滤液、胸腔积液和血清蛋白质组分析 被引量：15

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作者 刘志辉 彭德虎 +6 位作者 孟繁荣 谢贝 牛群 雷杰 高俊文 张言斌 谭守勇 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2014年第17期2745-2747,共3页

目的:寻找结核性胸膜炎特异性体液蛋白质标志物,以开发新型结核性胸膜炎实验诊断方法。方法:应用表面增强激光解析电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术检测5例结核性胸膜炎患者结核分枝杆菌分离株Middlebrook 7H9液体培养早中期(7 d与14... 目的:寻找结核性胸膜炎特异性体液蛋白质标志物,以开发新型结核性胸膜炎实验诊断方法。方法:应用表面增强激光解析电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术检测5例结核性胸膜炎患者结核分枝杆菌分离株Middlebrook 7H9液体培养早中期(7 d与14 d)培养滤液及其血清、胸腔积液蛋白质组,并进行描述性比较分析,寻找其共有蛋白质组分。结果:培养滤液蛋白质组蛋白质种类数量远多于胸腔积液和血清蛋白质组,4例患者胸腔积液蛋白质组蛋白质种类数量多于血清蛋白质组;5例患者3类样本蛋白质组中,存在种类数量各不相同的培养滤液-胸腔积液、培养滤液-血清、血清-胸腔积液和培养滤液-胸腔积液-血清共有蛋白质,但在所有患者培养滤液、胸腔积液、血清中均存在相对分子质量为2 660的蛋白质。结论:相对分子质量为2 660的蛋白质具备结核性胸膜炎特异性体液蛋白质标志物的表征,但尚需进一步大样本量研究予以证实。 展开更多

关键词 结核 胸膜 结核分枝杆菌 蛋白质组 表面增强激光解析电离飞行时间质谱

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61例依赖利福平结核杆菌肺结核临床特点分析 被引量：9

9

作者 李艳 黄冬生 +3 位作者 罗春明 冯志宇 覃红娟 黎燕琼 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2013年第12期1990-1992,共3页

目的:分析依赖利福平结核杆菌(简称依R菌)肺结核临床特点。方法:2008年10月至2012年1月在我院住院或门诊的61例依R菌肺结核患者,记录人口学资料、肺结核病程、抗结核药使用时间、结核病灶范围、是否合并空洞及数量、药敏试验结果、合并... 目的:分析依赖利福平结核杆菌(简称依R菌)肺结核临床特点。方法:2008年10月至2012年1月在我院住院或门诊的61例依R菌肺结核患者,记录人口学资料、肺结核病程、抗结核药使用时间、结核病灶范围、是否合并空洞及数量、药敏试验结果、合并症。结果:61例依R菌肺结核患者中男40例,女21例。依R菌肺结核以中青年为主,30～44岁年龄组26例(42.62%)。均发生于继发性肺结核,合并症多。肺结核病情重,病情分级:中度者14例,重度41例。61株依R菌有52(85.24%)株耐2种及以上抗结核药,至少耐HR耐多药结核分枝杆菌(MDR-TB)的达49例(80.3%)。结论:依赖R菌肺结核患者以中青年为主,病情重。与耐多药肺结核的产生有相关性,需要早期发现依R菌肺结核,并实施合理正规化疗方案,才能控制依R菌肺结核的发展和蔓延。 展开更多

关键词 结核 肺 依赖利福平 结核分枝杆菌

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耐多药肺结核手术治疗时机选择的初步探讨 被引量：4

10

作者 姜友定 谭守勇 +7 位作者 徐宁 高健齐 陈穗 江涛 黄盛晶 张茂 蔡晓婷 曾定科 《中国防痨杂志》 CAS 2017年第7期751-756,共6页

目的 探讨耐多药肺结核的手术治疗时机.方法 回顾性分析2009年1月至2016年3月广州市胸科医院39例耐多药肺结核患者的临床资料和随诊结果.患者手术前接受了2～24个月的化疗,化疗强化期末（8个月末）、中期考核（12个月末）和总疗程结束时... 目的 探讨耐多药肺结核的手术治疗时机.方法 回顾性分析2009年1月至2016年3月广州市胸科医院39例耐多药肺结核患者的临床资料和随诊结果.患者手术前接受了2～24个月的化疗,化疗强化期末（8个月末）、中期考核（12个月末）和总疗程结束时（24个月末）的患者分别为19例、9例和11例;耐多药、广泛耐药患者分别为21例和18例;病灶范围≤1个肺叶和＞1个肺叶的患者分别为17例和22例.分析耐多药肺结核患者的手术治愈率、并发症发生率,以及不同术前化疗时间、不同耐药种类、不同病灶范围患者的治愈率.结果 39例患者的手术治愈率和成功率均为89.7％（35/39）,失败率为10.3％（4/39）;手术并发症发生率为20.5％（8/39）,包括支气管胸膜瘘（10.3％,4/39）、胸腔感染（5.1％,2/39）、内出血（2.6％,1/39）和伤口感染（2.6％,1/39）;术前化疗时间0～、8～、12～24个月的患者的治愈比分别为18/19、8/9、9/11,三组差异无统计学意义（双向无序R＆#215;C表的Fisher确切概率法,P=0.665）;耐多药、广泛耐药患者的治愈率分别为100.0％（21/21）、77.8％（14/18）,差异有统计学意义（χ^2=5.20,P=0.037）.病灶范围≤1个肺叶和＞1个肺叶的患者的手术治愈率分别为94.1％（16/17）、86.4％（19/22）,差异无统计学意义（χ^2=0.63,P=0.429）;手术并发症发生率分别为5.9％（1/17）、31.8％（7/22）,差异有统计学意义（χ^2=4.58,P=0.032）.结论 耐多药肺结核患者的手术治愈率不会随着术前化疗时间的延长而提高,建议术前进行规则化疗8个月后、广泛耐药肺结核发生之前、病灶范围≤1个肺叶时,积极进行手术治疗. 展开更多

关键词 结核 肺 结核 抗多种药物性 肺外科手术 外科手术 选择性 评价研究

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95例耐多药结核菌株rpoB基因突变的分子特征 被引量：6

11

作者 苏雯婕 苏政军 +3 位作者 孟繁荣 谭守勇 刘志辉 张言斌 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2012年第14期2333-2335,共3页

目的:探讨广东地区MDR-TB菌株rpoB基因突变的分子特征。方法:对95例MDR-TB菌株rpoB基因453-564位密码子片段进行PCR-直接测序。结果:95例MDR-TB菌株rpoB基因突变率91.58%。86例为点突变,1例插入突变,未发现缺失。常见位点为531(63.22%)... 目的:探讨广东地区MDR-TB菌株rpoB基因突变的分子特征。方法:对95例MDR-TB菌株rpoB基因453-564位密码子片段进行PCR-直接测序。结果:95例MDR-TB菌株rpoB基因突变率91.58%。86例为点突变,1例插入突变,未发现缺失。常见位点为531(63.22%)、526(20.69%)、516(9.20%)。其中:单位点突变69例(80.23%),双位点突变16例(18.60%),三位点突变1例(1.17%)。511位点突变常同时伴有其他位点突变(57.14%)。结论:主要突变位点与国内外报道基本相同,但各位点所占比例具有地域差异;联合突变率较高,占19.54%。512位点插入(AGGAGC)突变可能为新突变类型。 展开更多

关键词 耐多药结核菌 RPOB基因 突变

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2010～2015年广州市越秀区肺结核可疑症状者人群年龄性别特征分析 被引量：3

12

作者 刘玉美 刘志辉 +6 位作者 宋涛 李笑颜 刘国标 梁志强 周惠贤 张言斌 谭守勇 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2016年第12期2048-2050,共3页

目的：通过肺结核可疑症状者人群年龄性别特征分析，深入了解广州市越秀区结核病流行状况以及影响结核病发生发展的重要因素。方法：应用广州市结核病控制项目初诊患者登记本和广州市结核病临床医学研究与转化中心结核病生物样本库资料... 目的：通过肺结核可疑症状者人群年龄性别特征分析，深入了解广州市越秀区结核病流行状况以及影响结核病发生发展的重要因素。方法：应用广州市结核病控制项目初诊患者登记本和广州市结核病临床医学研究与转化中心结核病生物样本库资料对2010－2015年广州市越秀区肺结核可疑症状者人群的年龄、性别特征进行频数分布分析。结果：6年间共有6154例肺结核可疑症状者来广州市越秀区结核病防治所就诊，男女性别总体构成比为1．70，且在2010－2015年期间随时间变化趋势不明显；40岁以下各年龄组男女性别比例差异不明显，40岁以上各年龄组人群的性别构成则相差较大，构成比接近2︰1；以35～年龄组为分界线，无论男女均在25～年龄组呈现一个小高峰、在50～年龄组均呈现出一个最高峰。结论：广州市越秀区肺结核可疑症状者男性多于女性，高峰年龄在50～60岁之间。 展开更多

关键词 结核/肺 可疑症状 广州市

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培养滤液MPT64抗原检测结核分枝杆菌复合群生长的效能分析 被引量：2

13

作者 许婉华 黄业伦 +4 位作者 刘燕文 胡丽环 罗少珍 孟繁荣 刘志辉 《中国防痨杂志》 CAS 2012年第8期542-545,共4页

目的评价以培养滤液MPT64抗原作为结核分枝杆菌复合群(Mycobacterium tuberculosis complex,MTBC)生长指示实验(简称"MPT64检测法")的检测效能,为建立新型结核分枝杆菌培养方法提供科学依据。方法对799例应用BACTEC MGIT 960... 目的评价以培养滤液MPT64抗原作为结核分枝杆菌复合群(Mycobacterium tuberculosis complex,MTBC)生长指示实验(简称"MPT64检测法")的检测效能,为建立新型结核分枝杆菌培养方法提供科学依据。方法对799例应用BACTEC MGIT 960分枝杆菌快速培养仪器法(简称"仪器法")进行分枝杆菌培养的培养液在培养的第42天进行MPT64检测,对1265例每隔7d(即培养第1～6周末)进行1次MPT64检测,以出现阳性检测结果或第42天为检测终点,并和仪器法比较。应用χ2检验统计分析所有样本(2064例)的检测结果,分析MPT64检测法的准确度;对1265例监测样本应用t检验分析MPT64检测法的快速性。结果 (1)在2064例分枝杆菌培养的临床样本中,仪器法报告298例MTBC、108例非结核分枝杆菌(non-tuberculous mycobacteria,NTM)、1521例培养阴性及137例污染(后三者即无MTBC生长),其中分别有279、6、0、2例MPT64检测阳性(即有MTBC生长),两者间差异无统计学意义(χ2=0.12,P=0.742);与仪器法的总体一致性为98.69%(2037/2064);对仪器法报告为MTBC者MPT64检测法的阳性率为93.62%(279/298),具有较高的阳性符合水平。(2)在每周进行MPT64监测的1265例培养液样本中,两种方法均检测到MTBC者168例。其中:仪器法在培养1～6周报告阳性率分别为25.60%(43/168)、66.67%(112/168)、92.26%(155/168)、98.21%(165/168)、98.81%(166/168)和100.00%(168/168);MPT64检测法的阳性检出率则分别为17.26%(29/168)、61.90%(104/168)、89.88%(151/168)、95.24%(160/168)、98.81%(166/168)和100.00%(168/168)。两者阳性报告时间差异无统计学意义(t=1.68,P=0.366)。结论MPT64检测法具有准确、快速、简便的特点,值得在临床中推广应用。 展开更多

关键词 分枝杆菌 结核 抗原 细菌 细菌蛋白质类 细菌学技术

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应用四聚体技术检测肺结核患者外周血及病变组织C5特异性CD4^+T细胞 被引量：2

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作者 邓向斌 黄利荣 +4 位作者 谢丹 李研 刘志辉 赖小敏 谭守勇 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2012年第13期2181-2184,共4页

目的:探讨C5特异性CD4+T细胞在肺结核患者外周血及在肺病变组织中的分布。方法:应用四聚体检测肺结核患者外周血及肺病变组织C5特异性四聚体阳性CD4+T细胞,同时以健康成人及非结核呼吸道感染患者外周血和肺炎病变组织作为对照。结果:应... 目的:探讨C5特异性CD4+T细胞在肺结核患者外周血及在肺病变组织中的分布。方法:应用四聚体检测肺结核患者外周血及肺病变组织C5特异性四聚体阳性CD4+T细胞,同时以健康成人及非结核呼吸道感染患者外周血和肺炎病变组织作为对照。结果:应用C5/HLA-DRB1*090102四聚体检测肺结核组、非结核呼吸道感染组和健康成人组的C5特异性CD4+T细胞的中位数分别为0.15%、0.09%、0.03%,而C5/HLA-DRB1*130201则分别为0.19%、0.10%、0.04%,肺结核患者组外周血C5特异性CD4+T细胞的中位数高于对照组(P﹤0.05)。在肺结核患者的肺病变组织中可观察到C5特异性CD4+T细胞。结论:四聚体技术可用于结核特异性T细胞的检测,为结核特异性T细胞的进一步研究和应用奠定基础。 展开更多

关键词 结核 肺 四聚体 CD4+T淋巴细胞

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结核杆菌临床分离菌早期培养滤液蛋白质组的比较 被引量：1

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作者 黄业伦 孟繁荣 +8 位作者 谢贝 曹翌明 牛群 雷杰 谭守勇 张言斌 吴玲 邓晓华 刘志辉 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2013年第15期2456-2458,共3页

目的：初步了解结核杆菌体外液培养条件下的早期蛋白质代谢和分泌活动状况。方法：将2株对抗结核一线药物敏感的结核杆菌临床分离茵接种Middlebrook7H9液体培养基进行培养，并于培养第7天用0．22μm滤纸过滤培养液制备早期培养滤液，应... 目的：初步了解结核杆菌体外液培养条件下的早期蛋白质代谢和分泌活动状况。方法：将2株对抗结核一线药物敏感的结核杆菌临床分离茵接种Middlebrook7H9液体培养基进行培养，并于培养第7天用0．22μm滤纸过滤培养液制备早期培养滤液，应用与弱阳离子交换蛋白质芯片（WCX2）捕获滤液蛋白行表面增强激光解吸一电离飞行时间质谱（SELDI-TOF-Ms）检测，描述性分析比较其蛋白质组。结果：在2株结核杆菌7d培养滤液中分别检测到相对分子质量为982～9329与941。9331、丰度为7～210与11-368（通过质谱峰面积计算相对强度值表示）的164与194种蛋白质；与Middlebrook7H9液体培养基本身蛋白质组比较，在2株结核杆菌7d培养滤液中分别有153和183种蛋白质新产生（其中10种在2份滤液中均有存在）、92和90种蛋白质消失、10和13种蛋白质丰度变小。结论：在体外液体培养条件下，结核杆菌蛋白质代谢和分泌活动活跃。且不同菌株间有较大差异。 展开更多

关键词 结核杆菌 滤液蛋白 表面增强激光解吸-电离飞行时间质谱 弱阳离子交换蛋白质芯片

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漫话结核分枝杆菌的人类旅程与示踪 被引量：2

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作者 刘志辉 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2013年第23期3803-3804,共2页

谁是“十痨九死”的始作俑者？1882年德国科学家RobertKoch终于捕猎到了这个侵扰人类至少7000余年的宿敌——结核分枝杆菌．从此人们开始了科学征服结核病梦魇的长途跋涉。130年过去了，我们曾经有过“防有措施、治有办法”的巨大喜悦... 谁是“十痨九死”的始作俑者？1882年德国科学家RobertKoch终于捕猎到了这个侵扰人类至少7000余年的宿敌——结核分枝杆菌．从此人们开始了科学征服结核病梦魇的长途跋涉。130年过去了，我们曾经有过“防有措施、治有办法”的巨大喜悦，也正面临着“耐药盛行、无药可用”的严酷现实．真可谓“几多欢喜几多忧愁”。何以至此。 展开更多

关键词 结核分枝杆菌 人类 示踪 科学家 结核病

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耐高温的结核分枝杆菌二株

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作者 吴龙章 蔡杏珊 +4 位作者 谭耀驹 杨建良 刘燕文 钟炳棠 陈剑锋 《中国防痨杂志》 CAS 2012年第11期746-747,共2页

分枝杆菌菌型鉴定在结核病流行病学调研和临床用药指导方面起到了至关重要的作用[1]，因由Mtb或非结核分枝杆菌（non-tuberculosisMycobacteria，NTM）引致的肺部疾病，其临床症状和X线影像表现没有任何的区别，但临床治疗有很大的差异... 分枝杆菌菌型鉴定在结核病流行病学调研和临床用药指导方面起到了至关重要的作用[1]，因由Mtb或非结核分枝杆菌（non-tuberculosisMycobacteria，NTM）引致的肺部疾病，其临床症状和X线影像表现没有任何的区别，但临床治疗有很大的差异甚至完全不同心]，因此结核分枝杆菌复合群（MTC）与NTM正确的区分尤为重要。故中国防痨协会基础专业委员会在1995年制定并于2006年再版修订了《结核病诊断实验室检验规程》（简称“规程”）[3]，其中分枝杆菌的鉴定程序为结核病流行病学调研和指导临床用药方面提供了可靠的业务保障。 展开更多

关键词 非结核分枝杆菌 耐高温 结核分枝杆菌复合群 流行病学调研 结核病诊断 临床症状 中国防痨协会 检验规程

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中国利福平耐药结核分枝杆菌株rpoB基因耐药决定区基因突变的分子特征 被引量：11

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作者 李丽 孟繁荣 刘志辉 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2015年第14期2372-2375,共4页

目的:明晰我国利福平耐药结核杆菌株rpoB基因突变的分子特征。方法:在Pubmed数据库中检索有关我国结核分枝杆菌rpoB基因突变研究文献,对合格文献中rpoB基因利福平耐药决定区(RRDR)基因突变位点及类型等计数资料信息进行合并。结果:54篇... 目的:明晰我国利福平耐药结核杆菌株rpoB基因突变的分子特征。方法:在Pubmed数据库中检索有关我国结核分枝杆菌rpoB基因突变研究文献,对合格文献中rpoB基因利福平耐药决定区(RRDR)基因突变位点及类型等计数资料信息进行合并。结果:54篇文献、4 149株利福平耐药结核分枝杆菌株纳入研究,93.64%检测到RRDR序列突变,共发现204种基因突变类型。其中:单位点、双位点、多位点碱基突变及碱基插入、碱基缺失、无突变的发生率分别为86.88%、6.05%、0.27%、0.21%、0.29%和6.29%;在碱基突变类型中,按突变位点统计,突变发生率的前5顺位分别为531(52.49%)、526(24.66%)、516(9.26%)、511(3.76%)和533(3.45%)。结论:结核分枝杆菌rpoB基因RRDR序列突变以单位点碱基突变为主,且主要发生在531、526、516等基因位点。 展开更多

关键词 结核分枝杆菌 中国 利福平 RPOB基因 基因突变 循证分析

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利用自主发光结核分枝杆菌快速连续检测抗结核药物的细胞内活性 被引量：5

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作者 梁镇兴 张可 +2 位作者 张天宇 谭耀驹 谭守勇 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2013年第23期3823-3826,共4页

目的:建立无筛选标记的自主发光结核分枝杆菌感染巨噬细胞模型并利用该模型直接快速连续检测抗结核药物的细胞内活性。方法:将小鼠巨噬细胞株(Raw264.7)接入96孔板中贴壁过夜处理,然后利用UAlRv菌感染4 h后进行清洗,加入抗结核药物后进... 目的:建立无筛选标记的自主发光结核分枝杆菌感染巨噬细胞模型并利用该模型直接快速连续检测抗结核药物的细胞内活性。方法:将小鼠巨噬细胞株(Raw264.7)接入96孔板中贴壁过夜处理,然后利用UAlRv菌感染4 h后进行清洗,加入抗结核药物后进行培养。分别在感染后的第0～7天对同一样品进行发光值的检测,直接通过发光值的变化进行药效的判断。结果:成功构建UAlRv感染小鼠巨噬细胞的模型,并利用该模型成功对利福平(RIF),异烟肼(INH),莫西沙星(MFX)和利奈唑胺(LZD)等抗结核药物进行细胞内抗结核作用评价。UAlRv体外检测药物活性的最小抑菌浓度(MIC,μg/mL)分别为RIF 0.125,INH 0.06,MFX 0.5和LZD 2.0,与之前报道过的利用带抗性标记的自主发光结核杆菌体外检测药物活性一致。在UAlRv感染巨噬细胞模型中药物的MIC(μg/mL)分别为RIF 0.125,INH 0.015,MFX 0.5和LZD 4.0,这与报道过的利用普通H37Rv结核菌感染巨噬细胞模型检测的结果相一致。结论:利用UAlRv感染巨噬细胞模型可快速、经济、连续地检测抗结核药物的细胞内活性,并可能用于高通量筛选/评价抗结核药物。 展开更多

关键词 分枝杆菌 结核 巨噬细胞感染模型 高通量筛选 利奈唑胺 莫西沙星

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新疆乌鲁木齐市2009-2011年非结核分枝杆菌药物敏感性试验结果分析 被引量：8

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作者 王泉 吴龙章 +3 位作者 李君莲 綦迎成 许苗 马瑞英 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2012年第22期3827-3829,共3页

目的:了解和分析新疆乌鲁木齐市3年来非结核分枝杆菌(NTM)的感染趋势、分布及耐药情况和临床特点,为临床治疗NTM病提供科学依据。方法:收集2009年1月至2011年12月3年间新疆乌鲁木齐市患者痰标本分枝杆菌培养阳性的菌株,按照中国防痨协... 目的:了解和分析新疆乌鲁木齐市3年来非结核分枝杆菌(NTM)的感染趋势、分布及耐药情况和临床特点,为临床治疗NTM病提供科学依据。方法:收集2009年1月至2011年12月3年间新疆乌鲁木齐市患者痰标本分枝杆菌培养阳性的菌株,按照中国防痨协会制定的《结核病诊断细菌学检验规程》进行分枝杆菌菌型鉴定。对鉴定为NTM的菌株采用比例法进行链霉素(SM),异烟肼(INH),利福平(RFP)和乙胺丁醇(EMB)的药物敏感性试验。结果:3年间共收集到3674株分枝杆菌,其中分离出NTM183株,占4.98%。对INH、SM、RFP和EMB的耐药率分别为97.3%、92.9%、73.2%和78.1%。临床主要症状为咳嗽、咳痰、发热、咯血等,其临床症状酷似MTB引致的结核病,一线抗结核药物治疗疗效差甚至无效。结论:NTM肺病的临床特征无特异性,病程长,常规的抗结核药物治疗效果差并呈现高度的耐药性。因此如何解决NTM肺病临床治疗差,是迫在眉睫而又亟待解决的一道重要难题。 展开更多

关键词 非结核分枝杆菌 药物耐药性 临床症状

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