目的观察目的基因在新鲜和保存羊膜中表达的完整性。方法取新鲜羊膜深低温保存,以FDA/PI和台盼蓝染色确定上皮细胞活性。用real-tim e RT-PCR评估TGF-β1、EGF、IL1β和IL1RA各阶段的表达能力,结果以2△△CT表示。结果深低温保存后,羊...目的观察目的基因在新鲜和保存羊膜中表达的完整性。方法取新鲜羊膜深低温保存,以FDA/PI和台盼蓝染色确定上皮细胞活性。用real-tim e RT-PCR评估TGF-β1、EGF、IL1β和IL1RA各阶段的表达能力,结果以2△△CT表示。结果深低温保存后,羊膜上皮细胞经染色证实全部死亡,但细胞培养3周后,会有大量的新生细胞游离出来。如羊膜解冻后立即行总RNA提取,在不同阶段保存羊膜中的总RNA无明显减少,且目的基因的表达同新鲜羊膜中的相同(P>0.05)。如解冻半小时后提取总RNA,其量明显减少(P<0.01)。结论传统的羊膜深低温保存法可有效保护基因的完整性,据此我们提出一个羊膜基因保存库的新概念。展开更多
文摘目的观察目的基因在新鲜和保存羊膜中表达的完整性。方法取新鲜羊膜深低温保存,以FDA/PI和台盼蓝染色确定上皮细胞活性。用real-tim e RT-PCR评估TGF-β1、EGF、IL1β和IL1RA各阶段的表达能力,结果以2△△CT表示。结果深低温保存后,羊膜上皮细胞经染色证实全部死亡,但细胞培养3周后,会有大量的新生细胞游离出来。如羊膜解冻后立即行总RNA提取,在不同阶段保存羊膜中的总RNA无明显减少,且目的基因的表达同新鲜羊膜中的相同(P>0.05)。如解冻半小时后提取总RNA,其量明显减少(P<0.01)。结论传统的羊膜深低温保存法可有效保护基因的完整性,据此我们提出一个羊膜基因保存库的新概念。