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人牙周膜干细胞的分离培养及体外诱导分化研究 被引量:14
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作者 徐斌 徐婕 刘宏伟 《口腔医学研究》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期702-705,共4页
目的:从成体人牙周组织中分离培养牙周膜干细胞,研究其生物学特性并进行诱导分化,为牙周组织工程提供可靠的种子细胞来源。方法:选取12~20岁的年轻患者因正畸拔除的健康牙齿,采用酶消化组织块培养法得到牙周膜细胞,待细胞达一定量后用... 目的:从成体人牙周组织中分离培养牙周膜干细胞,研究其生物学特性并进行诱导分化,为牙周组织工程提供可靠的种子细胞来源。方法:选取12~20岁的年轻患者因正畸拔除的健康牙齿,采用酶消化组织块培养法得到牙周膜细胞,待细胞达一定量后用有限元稀释法进行单细胞克隆,筛选牙周膜干细胞(PDLSCs)。计算细胞克隆形成率(CFU-F);免疫细胞化学染色检测细胞的表面蛋白表达;通过对牙周膜干细胞进行体外成骨、成软骨、成脂肪诱导,检测其多向分化潜能。结果:获得纯化的人牙周膜干细胞,其在体外具有一定的克隆形成能力,该细胞免疫细胞化学检测显示波形丝蛋白(vimentin)、STRO-1表达阳性,诱导条件下可向成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞方向分化,符合干细胞的特征。结论:从人年轻恒牙牙周膜中可以分离培养得到牙周膜干细胞,其具有较高的增殖能力和间充质干细胞表面特征,在体外诱导下能分化为成骨样细胞、软骨细胞、脂肪细胞,证实该细胞具有多向分化能力,具有作为牙周组织工程种子细胞来源的可能,为牙周组织工程的应用奠定了实验基础。 展开更多
关键词 牙周膜 干细胞 诱导分化
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β-磷酸三钙复合骨髓基质细胞构建组织工程骨的实验研究 被引量:12
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作者 万蕾蕾 刘宏伟 《口腔医学研究》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期497-500,共4页
目的:验证β-磷酸三钙与骨髓基质细胞复合形成组织工程骨的可行性。方法:取犬骨髓,贴壁法获得骨髓基质细胞,经成骨诱导培养液体外培养,倒置相差显微镜观察其形态、增殖情况,选择CD29,CD90,hamIgG应用流式细胞术检测细胞表面抗原,VonKoss... 目的:验证β-磷酸三钙与骨髓基质细胞复合形成组织工程骨的可行性。方法:取犬骨髓,贴壁法获得骨髓基质细胞,经成骨诱导培养液体外培养,倒置相差显微镜观察其形态、增殖情况,选择CD29,CD90,hamIgG应用流式细胞术检测细胞表面抗原,VonKossa染色,将培养的第3代细胞接种于多孔支架材料β-磷酸三钙(β-TCP),进行细胞增殖率检测,并于1、3、7d扫描电镜观察细胞材料的复合情况。结果:原代培养20d后分离获得骨髓基质细胞,VonKossa染色鉴定其成骨能力;细胞表面抗原检测显示CD29+,CD90+,hamIgG-,与文献报道一致;细胞增殖率曲线结果显示,细胞粘附多孔β-TCP后增殖率没有明显差异;扫描电镜观察可见细胞生长附着于材料网孔内表面。结论:β-磷酸三钙/骨髓基质细胞复合物显示良好的成骨活性,β-TCP可以用于骨组织工程支架材料。 展开更多
关键词 骨髓基质细胞 Β-磷酸三钙 骨组织工程
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