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5-Aza-CdR通过DNMT1调控卵巢癌细胞ERCC1基因甲基化及其表达 被引量:3
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作者 陈慧雁 李晓翠 沈宗姬 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期627-631,共5页
目的:研究5-氮杂-2'-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)在卵巢癌细胞系SKOV3中对核苷酸切除交叉修复互补基因1(excision repair cross complementation group 1,ERCC1)表达的影响及可能的机制。方法:设计特异性针对DNA甲基转移酶1(DNA methyltran... 目的:研究5-氮杂-2'-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)在卵巢癌细胞系SKOV3中对核苷酸切除交叉修复互补基因1(excision repair cross complementation group 1,ERCC1)表达的影响及可能的机制。方法:设计特异性针对DNA甲基转移酶1(DNA methyltransferase 1,DNMT1)基因的shRNA转染入人卵巢癌细胞系SKOV3细胞中,Western blotting检测SKOV3细胞DNMT1以及ERCC1的表达变化;利用不同浓度5-Aza-CdR于不同时间点处理卵巢癌SKOV3细胞,Western blotting检测DNMT1和ERCC1蛋白在处理前后的变化,利用亚硫酸氢钠法检测ERCC1基因启动子区域甲基化水平。结果:0.5、1.0、2.0、4.0μmol/L的5-Aza-CdR作用于SKOV3细胞后,DNMT1表达水平呈浓度依赖性降低,而ERCC1表达水平呈浓度依赖性升高;使用终浓度为1.0μmol/L的5-Aza-CdR处理SKOV3细胞12、24、36 h后,DNMT1表达水平呈时间依赖性降低,而ERCC1表达水平呈时间依赖性升高,亚硫酸氢钠法检测示药物处理前ERCC1启动子区域处于高甲基化水平,在用1.0μmol/L的5-Aza-CdR处理后,其启动子发生了去甲基化。结论:5-Aza-CdR通过DNMT1调控卵巢癌SKOV3细胞中ERCC1基因的甲基化及其表达水平。 展开更多
关键词 卵巢癌 甲基化 DNA甲基转移酶1基因 切除交叉修复互补基因1
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ERCC1基因在卵巢癌中作用的研究进展 被引量:8
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作者 陈慧雁 沈宗姬 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期453-456,共4页
卵巢癌是妇科恶性肿瘤中导致女性死亡的主要原因,目前主要治疗手段是手术切除并辅助以铂类为基础的化疗,但疗效受耐药性影响。顺铂耐药的机制尚不十分清楚,目前普遍认为核苷酸切除修复(nucleotide excision repair,NER)是顺铂耐药的重... 卵巢癌是妇科恶性肿瘤中导致女性死亡的主要原因,目前主要治疗手段是手术切除并辅助以铂类为基础的化疗,但疗效受耐药性影响。顺铂耐药的机制尚不十分清楚,目前普遍认为核苷酸切除修复(nucleotide excision repair,NER)是顺铂耐药的重要机制之一。切除修复交叉互补基因1(excision repair cross-complementation gene group 1,ERCC1)是NER途径的限速酶,ERCC1表达与卵巢癌临床病理因素无明显相关性,ERCCl的表达与顺铂耐受性相关,下调ERCCI的表达可克服顺铂耐药性。 展开更多
关键词 卵巢癌 ERCC1 化疗耐药基因多态性
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促卵泡激素通过活性氧途径调控卵巢癌细胞Nrf2蛋白的表达 被引量:4
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作者 马洁 王倩倩 +5 位作者 廖虹 杨永彬 金志军 张箴波 祝亚平 丰有吉 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期935-939,共5页
目的通过观察促卵泡激素(FSH)、活性氧(ROS)及其特异性抑制剂对卵巢癌细胞中红系衍生的核因子2相关因子2(nuclear factor-erythroid 2-related factor-2,Nrf2)表达的影响,探讨FSH是否通过ROS途径调控卵巢癌细胞Nrf2的表达。方法 (1)采... 目的通过观察促卵泡激素(FSH)、活性氧(ROS)及其特异性抑制剂对卵巢癌细胞中红系衍生的核因子2相关因子2(nuclear factor-erythroid 2-related factor-2,Nrf2)表达的影响,探讨FSH是否通过ROS途径调控卵巢癌细胞Nrf2的表达。方法 (1)采用免疫组织化学方法检测Nrf2在卵巢癌良恶性组织中的表达。(2)用不同浓度的FSH刺激卵巢癌Hey细胞不同时间,采用蛋白质印迹法检测细胞内Nrf2蛋白的表达。(3)采用ROS检测试剂盒检测80 mIU/ml的FSH刺激后不同时间Hey细胞内ROS的生成情况。(4)Hey细胞经不同浓度的H2O2刺激48 h后,或经ROS特异性抑制剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)预处理后加入150 mmol/L的H2O2处理48 h,观察细胞内Nrf2的表达。(5)Hey细胞经不同浓度的NAC预处理1 h,加入80 mIU/ml的FSH共孵育48 h,观察细胞内Nrf2表达的变化。结果 (1)10例良性卵巢囊肿组织中仅3例有Nrf2蛋白的弱阳性表达,而64例卵巢癌组织中42例(65.6%)有Nrf2蛋白的阳性表达,两组差异有统计学意义(P=0.042)。(2)FSH可上调Hey细胞内Nrf2的表达,并呈一定的剂量、时间依赖效应。(3)FSH可促进Hey细胞ROS的产生。(4)H2O2可诱导Hey细胞Nrf2蛋白的表达,且其作用可被NAC阻断。(5)NAC可阻断FSH所诱导的Nrf2蛋白的表达。结论 FSH可促进卵巢癌Hey细胞中ROS产生,上调Nrf2蛋白表达,抑制ROS途径可阻断FSH诱导的Nrf2高表达。提示FSH可能通过ROS途径调控卵巢癌Nrf2的表达,进而促进肿瘤发生。 展开更多
关键词 卵巢肿瘤 促卵泡激素 活性氧 红系衍生的核因子2相关因子2
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