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MicroRNA-155对人肺癌95D细胞生长的影响
被引量：
6
1
作者
秦安东
周涯
+3 位作者
盛美霞
费广茹
任涛
徐林
《中国肺癌杂志》
CAS
2011年第7期575-580,共6页
背景与目的近年来的研究发现miRNAs(microRNAs)家族成员miR-155与肺癌的发生相关,然而具体机制不明。本研究拟探讨上调miR-155表达对人肺癌95D细胞体外生长的影响及其可能的作用机制,为后续深入研究miR-155在肺癌发生、发展中的作用提...
背景与目的近年来的研究发现miRNAs(microRNAs)家族成员miR-155与肺癌的发生相关,然而具体机制不明。本研究拟探讨上调miR-155表达对人肺癌95D细胞体外生长的影响及其可能的作用机制,为后续深入研究miR-155在肺癌发生、发展中的作用提供新的实验依据。方法人肺癌95D细胞分为空白对照组、miR-155阴性对照组和miR-155转染组,分别作加入转染试剂、转染miR-155阴性对照和转染miR-155处理。Real-time PCR特异性探针法检测转染后95D细胞中miR-155的表达水平;应用MTT法检测miR-155对95D细胞增殖的抑制作用;流式细胞术检测95D细胞周期的分布;Western blot检测95D细胞SOS1蛋白的表达变化。结果 Real-time PCR结果显示,与对照组相比,转染组95D细胞miR-155的表达水平明显增加(P<0.05);镜下可见转染miR-155的95D细胞生长减缓,形态发生改变;M结果表明miR-155转染后,95D细胞增殖受到抑制,转染组和对照组存在明显差异(P<0.05);流式细胞术分析显示,与对照组相比,转染miR-155的95D细胞周期发生改变,G0/G1期细胞明显增多,而S期则明显减少(P<0.05);Western blot结果显示转染组95D细胞SOS1蛋白的表达明显降低(P<0.05)。结论 miR-155能明显抑制人肺癌95D细胞的体外生长,这可能与miR-155下调SOS1表达及诱导95D细胞G0/G1期阻滞相关。
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关键词
MicroRNA-155
肺肿瘤
细胞增殖
细胞周期阻滞
SOS1
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职称材料
miR-155对人肺癌95D细胞生物学行为的影响
被引量：
1
2
作者
赵娟娟
李永菊
+4 位作者
陈超
郭萌萌
陶弋婧
任涛
徐林
《中国肿瘤生物治疗杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第5期510-515,共6页
目的:构建携microRNA-155(miR-155)的真核表达载体并观察其转染高转移性人巨细胞肺癌95D细胞后细胞的生物学行为变化。方法:以95D细胞基因组RNA为模板,经PCR法扩增miR-155的前体序列,由BamHⅠ和HindⅢ双酶切后将其亚克隆入真核表达载体p...
目的:构建携microRNA-155(miR-155)的真核表达载体并观察其转染高转移性人巨细胞肺癌95D细胞后细胞的生物学行为变化。方法:以95D细胞基因组RNA为模板,经PCR法扩增miR-155的前体序列,由BamHⅠ和HindⅢ双酶切后将其亚克隆入真核表达载体pcDNA 3.1(-),并进行双酶切及测序鉴定;将构建成功的pcDNA3.1(-)-pri-miR-155载体(命名为p-miR-155)体外瞬时转染人肺癌95D细胞,利用Real-time PCR探针法检测miR-155成熟体的表达水平,并利用CCK-8法、克隆形成实验和划痕法检测95D细胞的增殖、克隆形成以及体外迁移能力。结果:成功构建携miR-155的真核表达载体;与空白(Mock)和对照组(p-Ctrl)相比,转染后的95D细胞过表达miR-155[(2.04±0.62)vs(0.76±0.62)、(1.00±0.45),均P<0.01]、p-miR-155载体转染组95D细胞的增殖抑制明显增加[(46.70±6.89)%vs(3.70±1.40)%、(1.11±0.75)%,P<0.01]、克隆形成能力(在100和1 000个细胞/孔接种条件下)明显下降[(12±3)vs(34±3)、(35±3)个,P<0.01;(78±4)vs(159±4)、(165±4)个,P<0.01)],此外,细胞的迁移细胞数也明显减少[(110±5)vs(295±5)、(325±5)个,P<0.01]。结论:通过miR-155真核表达载体转染产生的过表达miR-155可显著抑制人肺癌95D细胞的增殖和迁移能力。
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关键词
microRNA-155(miR-155)
真核表达
肺癌
95D细胞
增殖
迁移
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职称材料
题名
MicroRNA-155对人肺癌95D细胞生长的影响
被引量：
6
1
作者
秦安东
周涯
盛美霞
费广茹
任涛
徐林
机构
遵义医学院免疫学教研室
医学物理学教研室
同济大学附属上海东方医院呼吸内科
出处
《中国肺癌杂志》
CAS
2011年第7期575-580,共6页
基金
贵州省省长基金(No.2009C-457)
上海市科学技术委员会医学引导类科技项目(No.09411966400)资助~~
文摘
背景与目的近年来的研究发现miRNAs(microRNAs)家族成员miR-155与肺癌的发生相关,然而具体机制不明。本研究拟探讨上调miR-155表达对人肺癌95D细胞体外生长的影响及其可能的作用机制,为后续深入研究miR-155在肺癌发生、发展中的作用提供新的实验依据。方法人肺癌95D细胞分为空白对照组、miR-155阴性对照组和miR-155转染组,分别作加入转染试剂、转染miR-155阴性对照和转染miR-155处理。Real-time PCR特异性探针法检测转染后95D细胞中miR-155的表达水平;应用MTT法检测miR-155对95D细胞增殖的抑制作用;流式细胞术检测95D细胞周期的分布;Western blot检测95D细胞SOS1蛋白的表达变化。结果 Real-time PCR结果显示,与对照组相比,转染组95D细胞miR-155的表达水平明显增加(P<0.05);镜下可见转染miR-155的95D细胞生长减缓,形态发生改变;M结果表明miR-155转染后,95D细胞增殖受到抑制,转染组和对照组存在明显差异(P<0.05);流式细胞术分析显示,与对照组相比,转染miR-155的95D细胞周期发生改变,G0/G1期细胞明显增多,而S期则明显减少(P<0.05);Western blot结果显示转染组95D细胞SOS1蛋白的表达明显降低(P<0.05)。结论 miR-155能明显抑制人肺癌95D细胞的体外生长,这可能与miR-155下调SOS1表达及诱导95D细胞G0/G1期阻滞相关。
关键词
MicroRNA-155
肺肿瘤
细胞增殖
细胞周期阻滞
SOS1
Keywords
MicroRNA-155
Lung neoplasms
Cell proliferation
Cell cycle
SOS1
分类号
R734.2 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
miR-155对人肺癌95D细胞生物学行为的影响
被引量：
1
2
作者
赵娟娟
李永菊
陈超
郭萌萌
陶弋婧
任涛
徐林
机构
遵义医学院免疫学教研室
同济大学附属上海东方医院呼吸内科
出处
《中国肿瘤生物治疗杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第5期510-515,共6页
基金
国家自然科学基金资助项目(No.81260398
No.31370918)
教育部新世纪优秀人才计划(No.NCET-12-0661)~~
文摘
目的:构建携microRNA-155(miR-155)的真核表达载体并观察其转染高转移性人巨细胞肺癌95D细胞后细胞的生物学行为变化。方法:以95D细胞基因组RNA为模板,经PCR法扩增miR-155的前体序列,由BamHⅠ和HindⅢ双酶切后将其亚克隆入真核表达载体pcDNA 3.1(-),并进行双酶切及测序鉴定;将构建成功的pcDNA3.1(-)-pri-miR-155载体(命名为p-miR-155)体外瞬时转染人肺癌95D细胞,利用Real-time PCR探针法检测miR-155成熟体的表达水平,并利用CCK-8法、克隆形成实验和划痕法检测95D细胞的增殖、克隆形成以及体外迁移能力。结果:成功构建携miR-155的真核表达载体;与空白(Mock)和对照组(p-Ctrl)相比,转染后的95D细胞过表达miR-155[(2.04±0.62)vs(0.76±0.62)、(1.00±0.45),均P<0.01]、p-miR-155载体转染组95D细胞的增殖抑制明显增加[(46.70±6.89)%vs(3.70±1.40)%、(1.11±0.75)%,P<0.01]、克隆形成能力(在100和1 000个细胞/孔接种条件下)明显下降[(12±3)vs(34±3)、(35±3)个,P<0.01;(78±4)vs(159±4)、(165±4)个,P<0.01)],此外,细胞的迁移细胞数也明显减少[(110±5)vs(295±5)、(325±5)个,P<0.01]。结论:通过miR-155真核表达载体转染产生的过表达miR-155可显著抑制人肺癌95D细胞的增殖和迁移能力。
关键词
microRNA-155(miR-155)
真核表达
肺癌
95D细胞
增殖
迁移
Keywords
microRNA-155（miR-155）
eukaryotic expression
lung cancer
95D cell
proliferation
migration
分类号
R734.2 [医药卫生—肿瘤]
R730.54 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
MicroRNA-155对人肺癌95D细胞生长的影响
秦安东
周涯
盛美霞
费广茹
任涛
徐林
《中国肺癌杂志》
CAS
2011
6
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
miR-155对人肺癌95D细胞生物学行为的影响
赵娟娟
李永菊
陈超
郭萌萌
陶弋婧
任涛
徐林
《中国肿瘤生物治疗杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2014
1
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