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细胞间质上皮转化因子(c-Met)中和抗体的筛选及鉴定
1
作者
蒋明
于丽华
+2 位作者
付敏
毛玉婷
尹衍新
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第9期777-782,共6页
目的通过抗体的随机突变库和细胞展示技术,对具有中和活性的细胞间质上皮转化因子(c-Met)抗体进行结构和活性优化,获得亲和力高、激动活性低的抗体,并使其保持亲本抗体的中和及内化活性,提高抗体偶联药物(ADC)的成药性。方法构建和筛选c...
目的通过抗体的随机突变库和细胞展示技术,对具有中和活性的细胞间质上皮转化因子(c-Met)抗体进行结构和活性优化,获得亲和力高、激动活性低的抗体,并使其保持亲本抗体的中和及内化活性,提高抗体偶联药物(ADC)的成药性。方法构建和筛选c-Met中和激动型抗体3E1D7的重链互补决定区3(CDR3)随机突变库,获得CDR3区有4个氨基酸突变的候选抗体2G5。通过ELISA检测2G5的中和活性,流式细胞术检测其在A549细胞的内化,CCK-8法检测2G5对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖的影响,通过Transwell^(TM)小室检测2G5对A549细胞迁移的影响,通过Western blot法检测2G5对c-Met磷酸化的影响。结果突变抗体2G5与抗原c-Met保持较高的结合能力,半数有效浓度(EC_(50))为41.53 ng/mL,并具有较高的中和活性。在A549细胞中,2G5引起显著的内化效应,但不激活c-Met信号通路和细胞迁移。2G5不能引起HUVEC增殖。结论通过建立抗体随机突变库可优化c-Met抗体的活性,获得成药性更高的突变型抗体。
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关键词
细胞间质上皮转化因子(c-Met)
中和抗体
流式细胞术
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题名
细胞间质上皮转化因子(c-Met)中和抗体的筛选及鉴定
1
作者
蒋明
于丽华
付敏
毛玉婷
尹衍新
机构
同济大学苏州研究院生物医药研究中心
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第9期777-782,共6页
基金
国家科技重大专项-重大新药创制(2019ZX09732002-012)
国家科技重大专项-重大新药创制(2019ZX09732002-007-002)
+1 种基金
国家自然科学基金(82071473)
山东省重点研发计划(2020CXGC011301)。
文摘
目的通过抗体的随机突变库和细胞展示技术,对具有中和活性的细胞间质上皮转化因子(c-Met)抗体进行结构和活性优化,获得亲和力高、激动活性低的抗体,并使其保持亲本抗体的中和及内化活性,提高抗体偶联药物(ADC)的成药性。方法构建和筛选c-Met中和激动型抗体3E1D7的重链互补决定区3(CDR3)随机突变库,获得CDR3区有4个氨基酸突变的候选抗体2G5。通过ELISA检测2G5的中和活性,流式细胞术检测其在A549细胞的内化,CCK-8法检测2G5对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖的影响,通过Transwell^(TM)小室检测2G5对A549细胞迁移的影响,通过Western blot法检测2G5对c-Met磷酸化的影响。结果突变抗体2G5与抗原c-Met保持较高的结合能力,半数有效浓度(EC_(50))为41.53 ng/mL,并具有较高的中和活性。在A549细胞中,2G5引起显著的内化效应,但不激活c-Met信号通路和细胞迁移。2G5不能引起HUVEC增殖。结论通过建立抗体随机突变库可优化c-Met抗体的活性,获得成药性更高的突变型抗体。
关键词
细胞间质上皮转化因子(c-Met)
中和抗体
流式细胞术
分类号
R392-33 [医药卫生—免疫学]
Q279 [生物学—细胞生物学]
R979.19 [医药卫生—药品]
S852.43 [农业科学—基础兽医学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
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1
细胞间质上皮转化因子(c-Met)中和抗体的筛选及鉴定
蒋明
于丽华
付敏
毛玉婷
尹衍新
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2024
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