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人清道夫受体SR-AⅠ过表达对293T细胞摄脂和黏附功能的影响
1
作者
杨红
戴亚蕾
+1 位作者
徐婷
田菲
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第10期1937-1942,共6页
目的:构建重组真核表达质粒pEGFP-C1-SR-AⅠ在293T细胞上获得高表达,并对A类Ⅰ型清道夫受体(SR-AⅠ)相应的功能进行鉴定。方法:依据人A类Ⅰ型清道夫受体基因MSR1的cDNA设计引物,用PCR等分子克隆技术构建重组真核表达载体pEGFP-C1-SR-AⅠ...
目的:构建重组真核表达质粒pEGFP-C1-SR-AⅠ在293T细胞上获得高表达,并对A类Ⅰ型清道夫受体(SR-AⅠ)相应的功能进行鉴定。方法:依据人A类Ⅰ型清道夫受体基因MSR1的cDNA设计引物,用PCR等分子克隆技术构建重组真核表达载体pEGFP-C1-SR-AⅠ,测序证实后,用脂质体法转染293T细胞。用RT-PCR和Western blotting检测SR-AⅠ受体的表达,脂质油红O化学染色法检测实验组细胞的脂质摄取量的变化,通过细胞黏附性实验检测其黏附性的改变。结果:转染后实验组SR-AⅠmRNA表达及蛋白合成明显高于对照组和空载体组,同时发现泡沫细胞转化率由对照组和空载体组的10%显著增加到实验组的20%,且细胞黏附性也提高2倍以上。结论:成功构建了重组真核表达质粒,并在293T细胞获得了高表达,提高了293T细胞的摄脂能力和黏附性,为进一步研究此受体功能的改变对动脉粥样硬化病理发生过程的影响奠定基础。
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关键词
受体
清道夫
脂蛋白类
LDL
动脉硬化
泡沫细胞
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题名
人清道夫受体SR-AⅠ过表达对293T细胞摄脂和黏附功能的影响
1
作者
杨红
戴亚蕾
徐婷
田菲
机构
同济大学基础医学院免疫学教研室
出处
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第10期1937-1942,共6页
基金
国家自然科学基金资助项目(No.30671969)
文摘
目的:构建重组真核表达质粒pEGFP-C1-SR-AⅠ在293T细胞上获得高表达,并对A类Ⅰ型清道夫受体(SR-AⅠ)相应的功能进行鉴定。方法:依据人A类Ⅰ型清道夫受体基因MSR1的cDNA设计引物,用PCR等分子克隆技术构建重组真核表达载体pEGFP-C1-SR-AⅠ,测序证实后,用脂质体法转染293T细胞。用RT-PCR和Western blotting检测SR-AⅠ受体的表达,脂质油红O化学染色法检测实验组细胞的脂质摄取量的变化,通过细胞黏附性实验检测其黏附性的改变。结果:转染后实验组SR-AⅠmRNA表达及蛋白合成明显高于对照组和空载体组,同时发现泡沫细胞转化率由对照组和空载体组的10%显著增加到实验组的20%,且细胞黏附性也提高2倍以上。结论:成功构建了重组真核表达质粒,并在293T细胞获得了高表达,提高了293T细胞的摄脂能力和黏附性,为进一步研究此受体功能的改变对动脉粥样硬化病理发生过程的影响奠定基础。
关键词
受体
清道夫
脂蛋白类
LDL
动脉硬化
泡沫细胞
Keywords
Receptors, scavenger
Lipoprotein, LDL
Arteriosclerosis
Foam cells
分类号
R392 [医药卫生—免疫学]
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作者
出处
发文年
被引量
操作
1
人清道夫受体SR-AⅠ过表达对293T细胞摄脂和黏附功能的影响
杨红
戴亚蕾
徐婷
田菲
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2008
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