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细胞自噬在牙髓损伤修复过程中的作用 被引量:5
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作者 陈杰 徐华兴 +1 位作者 程抒华 张旗 《口腔医学研究》 CAS 北大核心 2019年第6期531-536,共6页
目的:研究大鼠牙髓损伤修复过程中细胞自噬表达的变化,探讨其在这一过程中可能发挥的作用。方法: 60只8周龄SD大鼠上颌第一磨牙开髓后直接盖髓,术后第1、3、7、14天取材,苏木素-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色、Masson染色观察牙髓损... 目的:研究大鼠牙髓损伤修复过程中细胞自噬表达的变化,探讨其在这一过程中可能发挥的作用。方法: 60只8周龄SD大鼠上颌第一磨牙开髓后直接盖髓,术后第1、3、7、14天取材,苏木素-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色、Masson染色观察牙髓损伤修复情况,免疫组织荧光染色检测炎症因子肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、CD68以及自噬蛋白LC3B和Beclin1的表达。分别提取损伤牙髓组织及体外培养牙髓细胞加脂多糖(lipopolysaccharide,LPS),实时荧光定量聚合酶链反应(quantitative Real-time PCR)检测损伤后不同时间点炎症、矿化和自噬相关基因的表达变化。结果:术后第1天大量中性粒细胞浸润,第3天炎症浸润逐渐减轻,第14天炎症明显好转,有新胶原纤维形成( P <0.05)。这一过程可见自噬蛋白LC3B、Beclin1主要表达在牙髓细胞、成牙本质细胞及血管内皮细胞胞质及胞膜上。mRNA水平表明炎症因子白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、CD68、TNF-α在损伤后3天表达达高峰,随后降低;矿化指标Ⅰ型胶原(collagen type I,COL1)、牙本质涎磷蛋白(dentin sialophosphoprotein,DSPP)及牙本质基质蛋白1 (dentin matrix protein1,DMP1)在损伤修复过程中表达逐渐升高。自噬基因LC3B与Atg5在损伤后12 h表达量至高峰,24 h表达量最低,随后逐渐升高;Atg12与Beclin1在损伤后出现先降低后升高趋势。体外细胞与体内组织mRNA趋势一致,差异有统计学意义( P <0.05)。结论:牙髓损伤修复过程中,自噬参与牙髓炎症的发生发展,并促进牙髓组织修复。 展开更多
关键词 细胞自噬 牙髓炎症 牙髓损伤修复
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牙髓成纤维细胞内质网应激在牙髓炎中的作用 被引量:4
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作者 李丹 张旗 《口腔医学研究》 CAS CSCD 北大核心 2022年第11期1064-1070,共7页
目的:探究内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)在牙髓炎症进程中的发生和作用,以及对人牙髓成纤维细胞(human dental pulp fibroblasts,hDPFs)炎症因子的影响。方法:构建大鼠牙髓炎模型,0、6、12、24、48 h取材。苏木素-伊红... 目的:探究内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)在牙髓炎症进程中的发生和作用,以及对人牙髓成纤维细胞(human dental pulp fibroblasts,hDPFs)炎症因子的影响。方法:构建大鼠牙髓炎模型,0、6、12、24、48 h取材。苏木素-伊红染色观察炎症浸润;RT-qPCR检测ERS及炎症因子相关mRNA表达水平。体外培养hDPFs,分对照组、4-苯基丁酸(4-phenylbutyric acid,4-PBA)组、LPS组、LPS+4-PBA组,1 d收样,透射电镜观察内质网形态;免疫荧光检测ERS标志蛋白表达;RT-qPCR检测ERS标志物及炎症因子mRNA表达。体内髓腔应用4-PBA进行“挽救”,1、3、7 d收样。结果:随暴露时间延长,牙髓组织炎症浸润增加,TNF-α、IL-1β、IL-6和GRP78、CHOP、XBP1 mRNA表达升高(P<0.05)。体外,LPS组内质网形态发生肿胀、扩张,GRP78、CHOP蛋白表达增加,TNF-α、IL-1β、IL-6和GRP78、CHOP、XBP1 mRNA表达升高,4-PBA改善内质网损伤,GRP78、CHOP表达降低,促炎因子mRNA表达降低(P<0.05)。体内“挽救”表明4-PBA减轻炎症浸润,抑制TNF-α、IL-1β、GRP78、CHOP表达(P<0.05)。结论:牙髓炎症进程中,伴随ERS发生和炎症因子分泌增加,4-PBA抑制ERS,减轻炎症反应。 展开更多
关键词 牙髓炎 牙髓成纤维细胞 内质网应激
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消退素E1对牙髓炎中性粒细胞凋亡的影响 被引量:3
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作者 潘亮亮 张旗 《口腔医学研究》 CAS CSCD 北大核心 2022年第8期742-746,共5页
目的:探讨消退素E1(resolvin E1,RvE1)影响牙髓炎中性粒细胞凋亡及机制。方法:建立大鼠牙髓炎模型,RvE1盖髓后1、3、7 d收样。苏木素-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色检测炎症浸润情况,免疫组织化学检测炎症因子表达;免疫荧光CD11b/Tune... 目的:探讨消退素E1(resolvin E1,RvE1)影响牙髓炎中性粒细胞凋亡及机制。方法:建立大鼠牙髓炎模型,RvE1盖髓后1、3、7 d收样。苏木素-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色检测炎症浸润情况,免疫组织化学检测炎症因子表达;免疫荧光CD11b/Tunel共染检测中性粒细胞凋亡水平。分离培养人中性粒细胞,RvE1预处理后加入热灭活变形链球菌(Streptococcus mutans,S.mutan)或脂多糖,6、12、24 h收样。Annexin V/PI检测细胞凋亡水平,qPCR检测凋亡调控因子mRNA表达水平。结果:大鼠牙髓炎模型中,RvE1处理减少了牙髓炎症浸润与TNF-α和IL-1β水平,提高中性粒细胞凋亡水平。体外RvE1提高了S.mutan刺激后中性粒细胞凋亡水平。qPCR结果显示促生存基因Akt,Mcl-1表达降低,促凋亡基因Bax表达升高。结论:RvE1调控Akt、Mcl-1、Bax表达,增强中性粒细胞细菌刺激后凋亡,促进牙髓炎症消退。 展开更多
关键词 中性粒细胞 凋亡 炎症消退 牙髓炎
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巨噬细胞极化在糖尿病合并根尖周炎中作用的研究 被引量:6
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作者 孙熹 张旗 《口腔医学研究》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期412-417,共6页
目的:探究巨噬细胞极化在糖尿病合并根尖周炎中作用,及高糖环境对巨噬细胞极化影响。方法:8周龄雄性Wistar大鼠(对照组)和GK大鼠(糖尿病组)构建根尖周炎模型,2周、4周取材。苏木素-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色观察根尖炎症浸润;免... 目的:探究巨噬细胞极化在糖尿病合并根尖周炎中作用,及高糖环境对巨噬细胞极化影响。方法:8周龄雄性Wistar大鼠(对照组)和GK大鼠(糖尿病组)构建根尖周炎模型,2周、4周取材。苏木素-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色观察根尖炎症浸润;免疫组化观察炎症因子表达;免疫荧光观察巨噬细胞极化情况。体外培养Raw264.7小鼠巨噬细胞系,高浓度葡萄糖(40 mmol/L)处理,实时荧光定量聚合酶链反应(quantitative real-time PCR)检测巨噬细胞极化及炎症因子相关mRNA表达水平。结果:建模4周,与对照组相比,糖尿病组根尖炎症浸润增多,促炎因子TNF-α、IL-1β、IL-6增多,抗炎因子IL-10减少(P<0.05);M2型巨噬细胞占总巨噬细胞比值(CD206/CD68)减少,巨噬细胞iNOS表达增多,凋亡细胞数目增多(P<0.05)。高糖处理Raw264.7小鼠巨噬细胞系,iNOS mRNA表达升高,CD206表达降低,CD68表达无明显差异;TNF-α、IL-1β、IL-6 mRNA表达升高,IL-10 mRNA表达降低(P<0.05)。结论:糖尿病所致高糖环境通过影响巨噬细胞极化,促进炎性浸润,加重根尖周炎。 展开更多
关键词 根尖周炎 糖尿病 巨噬细胞极化
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血管内皮生长因子促进根尖周囊肿骨吸收 被引量:6
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作者 刘春燕 张旗 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期596-600,共5页
目的:探讨血管内皮生长因子(VEGF)在根尖周囊肿骨破坏过程中的作用。方法:免疫组织化学染色检测32例根尖周囊肿囊壁中VEGF表达及微血管密度,分析其与骨破坏的关系;分离囊壁及正常间充质对照成纤维细胞,ELISA和RT-qPCR检测其中VEGF表达... 目的:探讨血管内皮生长因子(VEGF)在根尖周囊肿骨破坏过程中的作用。方法:免疫组织化学染色检测32例根尖周囊肿囊壁中VEGF表达及微血管密度,分析其与骨破坏的关系;分离囊壁及正常间充质对照成纤维细胞,ELISA和RT-qPCR检测其中VEGF表达。条件培养基诱导RAW264.7细胞破骨向分化,贝伐单抗阻断VEGF,计数TRAP阳性破骨细胞。结果:囊壁中VEGF呈强阳性,其表达及微血管密度与骨破坏面积正相关。囊壁成纤维细胞VEGF及破骨诱导效率显著高于对照,并受贝伐单抗抑制(P<0.05)。结论:根尖周囊肿囊壁VEGF能促血管增生及破骨细胞分化,导致骨破坏。 展开更多
关键词 根尖周囊肿 血管内皮生长因子 骨破坏 破骨细胞
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