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共刺激分子B7-1与IL-6协同诱导T细胞活化的研究 被引量:5
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作者 刘然义 屈伸 +2 位作者 王剑波 过建莉 周华 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第2期96-98,共3页
目的:探讨B71单独或者与IL6联合在体外诱导T细胞活化的能力。方法:在混合淋巴细胞肿瘤细胞培养(MLTCs)后,测定淋巴细胞增殖指数和CTL杀伤活性。结果:B71+的B16细胞能够较有效地刺激淋巴细胞增殖、诱导特异CTL杀伤活性(与野生型B16细胞... 目的:探讨B71单独或者与IL6联合在体外诱导T细胞活化的能力。方法:在混合淋巴细胞肿瘤细胞培养(MLTCs)后,测定淋巴细胞增殖指数和CTL杀伤活性。结果:B71+的B16细胞能够较有效地刺激淋巴细胞增殖、诱导特异CTL杀伤活性(与野生型B16细胞和模拟转染的B16细胞比较,P<0.01),当与IL6结合时效果更加显著(与各对照组比较P<0.01)。结论:B71基因在肿瘤细胞中表达可增强其免疫原性,在体外有效诱导T细胞活化;在此过程中IL6与B71分子存在协同效应。 展开更多
关键词 B7-1 IL-6 T细胞 基因治疗 黑色素瘤
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血清胆碱酯酶与血脂的关系 被引量:7
2
作者 何善述 邓耀祖 +2 位作者 冯宗忱 龚成新 余英宏 《生物化学杂志》 CSCD 1992年第2期129-132,共4页
通过对749例40~60岁工人SChE和血脂水平的分析,结果显示SChE与TC、TG、LDL-C和VLDL-C呈正相关,与HDL-C呈负相关,相关系数分别为0.21,0.23,0.12,0.11和-0.08。高脂血症患者的SChE活性(2271.8±650.7u/L)高于血脂正常者(1968.6±... 通过对749例40~60岁工人SChE和血脂水平的分析,结果显示SChE与TC、TG、LDL-C和VLDL-C呈正相关,与HDL-C呈负相关,相关系数分别为0.21,0.23,0.12,0.11和-0.08。高脂血症患者的SChE活性(2271.8±650.7u/L)高于血脂正常者(1968.6±607.0u/L),但冠心病患者的SChE活性(2242.8±499.4u/L)与高脂血症组无差异。在各型高脂血症中,只有高甘油三酯血症(2241.5±623.9u/L)和混合性高脂血症患者(2561.5±704.8u/L)的SChE活性增高,而高胆固醇血症患者的SChE活性(2034.8±640.0u/L)与血脂正常者无差异(p>0.1)。提示SChE与血脂之间存在一定的联系,本文对此关系进行了讨论。 展开更多
关键词 血脂 胆固醇 血清胆碱硝酶
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氧化修饰极低密度脂蛋白增强其致动脉粥样硬化作用 被引量:12
3
作者 赖祥进 冯宗忱 王式平 《生物化学杂志》 CSCD 1994年第3期350-356,共7页
研究了氧化修饰极低密度脂蛋白(ox-VLDL)对小白鼠腹腔巨噬细胞内脂质堆积作用及其机制。经Cu^(2+)修饰后VLDL的电泳迁移率及脂质过氧化物含量均显著增加。ox-VLDL更易导致小鼠腹腔巨噬细胞内脂质堆积。以相... 研究了氧化修饰极低密度脂蛋白(ox-VLDL)对小白鼠腹腔巨噬细胞内脂质堆积作用及其机制。经Cu^(2+)修饰后VLDL的电泳迁移率及脂质过氧化物含量均显著增加。ox-VLDL更易导致小鼠腹腔巨噬细胞内脂质堆积。以相同浓度(300μgTG/mL)或不同浓度(200─500μgTG/mL)的ox-VLDL及正常VLDL(n-VLDL)与巨噬细胞温育24h,前者使巨噬细胞内TG堆积均比后者显著(P<0.01)。同时,随ox-VLDL的脂质过氧化物含量(TBARS水平)增加,巨噬细胞内TG含量的百分率相应增加。以50μg蛋白/mL的n-LDL,ox-LDL,n-VLDL及ox-VLDL与巨噬细胞温育60h。细胞内CE堆积中氧化组均比正常组高(P<0.01)。巨噬细胞对^(125)I-n-VLDL与^(125)I-ox-VLDL的结合、降曲线均有饱和趋势。两结合曲线无明显差异,但细胞对后者降解的量比前者多。结合的竞争实验表明,n-VLDL能抑制大部分^(125)I-ox-VLDL与细胞结合,而Ac-LDL只能抑制小部分。结果表明ox-VLDL主要通过受体途径:大部分经过n-VLDL受体,小部分经过清道夫受体被巨噬细胞摄? 展开更多
关键词 动脉粥样硬化 低密度脂蛋白 氧化
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高胆固醇高脂肪膳食对家兔β-VLDL组成及其与巨噬细胞相互作用的影响的初步研究 被引量:2
4
作者 冯宗忱 王式平 +5 位作者 冯友梅 吴万生 王淳本 江卫国 戴五星 梁驹卿 《生物化学杂志》 CSCD 1989年第1期66-70,共5页
给家兔喂以1%胆固醇及10%菜油(A组)或猪油(B组)50多天后A组血胆固醇水平(824.2±265.1mg/dl)明显低于B组(1666±693.8mg/dl);A组甘油三酯水平(51.9±19.1mg/dl)亦低于B组(104±40.2mg/dl)。二组家兔的β—VLDL的脂类... 给家兔喂以1%胆固醇及10%菜油(A组)或猪油(B组)50多天后A组血胆固醇水平(824.2±265.1mg/dl)明显低于B组(1666±693.8mg/dl);A组甘油三酯水平(51.9±19.1mg/dl)亦低于B组(104±40.2mg/dl)。二组家兔的β—VLDL的脂类组成无差别,但A组β—VLDL的apoE高于B组,分别为45.2%及37.5%。高分子量apoB(apoB_h)为33.6%,低于B组β-VLDL(47.3%)。A组β-VLDL促进小鼠腹腔巨噬细胞胆固醇堆积的程度大于B组,可能与apoE含量高有关。我们认为多不饱和脂酸减轻动脉粥样硬化(As)的作用不在于改变脂蛋白构成后阻碍泡沫细胞的形成而是促进β—VLDL从体内清除。 展开更多
关键词 多不饱和脂肪 β-VLDL 巨噬细胞
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兔主动脉平滑肌细胞低密度脂蛋白受体相关蛋白(LRP)的诱导表达调节 被引量:1
5
作者 从容 冯友梅 +3 位作者 王淳本 宗义强 邓耀祖 冯宗忱 《中国生物化学与分子生物学报》 CSCD 2000年第4期510-513,共4页
在兔主动脉平滑肌细胞 ( SMC)培养基中分别加入正常低密度脂蛋白 ( N- LDL)、氧化低密度脂蛋白 ( ox- LDL)、正常极低密度脂蛋白 ( N- VLDL)、氧化极低密度脂蛋白 ( ox- VLDL)和 β-极低密度脂蛋白 (β- VLDL )培养 2 4 h后 ,用定量 RT-... 在兔主动脉平滑肌细胞 ( SMC)培养基中分别加入正常低密度脂蛋白 ( N- LDL)、氧化低密度脂蛋白 ( ox- LDL)、正常极低密度脂蛋白 ( N- VLDL)、氧化极低密度脂蛋白 ( ox- VLDL)和 β-极低密度脂蛋白 (β- VLDL )培养 2 4 h后 ,用定量 RT- PCR和配体结合实验检测平滑肌细胞 LRP的m RNA和蛋白质水平的表达 .结果表明 :五种脂蛋白均能在转录和翻译水平诱导兔主动脉平滑肌细胞的 LRP表达 ,尤以富含胆固醇的 N- LDL ,ox- LDL和β- VLDL的刺激作用更明显 .用胆固醇单独或与脂蛋白共同温育 SMC后 ,发现胆固醇本身可促进 SMC的 LRP蛋白水平的表达 ,脂蛋白与胆固醇的共同刺激作用更为显著 .结果提示 :上述五种脂蛋白对 SMC上 LRP的表达有上调作用 ,其机制可能主要是通过其中的胆固醇来实现的 . 展开更多
关键词 LRP 表达调控 泡沫细胞 动脉粥样硬化 SMC
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极低密度脂蛋白对巨噬细胞载脂蛋白E基因表达的调节 被引量:1
6
作者 从容 冯友梅 +3 位作者 宗义强 张建明 屈伸 邓耀祖 《生物化学杂志》 CSCD 1997年第1期118-121,共4页
Normal human very low density lipoprotein (VLDL) can be separated into two subfractions on Heparin-Sepharose 6B chromatography. one is called ApoE-poor VLDL and the other, ApoE-rich VLDL. They are different in composi... Normal human very low density lipoprotein (VLDL) can be separated into two subfractions on Heparin-Sepharose 6B chromatography. one is called ApoE-poor VLDL and the other, ApoE-rich VLDL. They are different in compositions. Mouse peritoneal macrophages (MPM)were incubated with ApoE-poor VLDL or ApoE-rich VLDL at same concentrations for 24 hours.Increases of ApoE mRNA contents in both groups were higher than that in control and the highestApoE mRNA content was seen in MPM incubated with ApoE-poor VLDL. The results suggestthat VLDL can stimulate ApoEgene expression in MPM and the ApoE-poor VLDL exhibits morepronounced effect. It was predicted that the ApoE secreted by MPM might incorporate intoVLDL, especially the ApoE-poor VLDL, and enhance the uptake of these lipoproteins by MPM orother local cells via ApoE mediated receptor pathways. 展开更多
关键词 动脉粥样硬化 低密度脂蛋白 巨噬细胞 载脂蛋白E
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mB7-1基因转染小鼠黑色素瘤细胞诱导的抗瘤效应研究
7
作者 刘然义 王剑波 +1 位作者 屈伸 周华 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 1999年第12期924-927,共4页
目的 :研究共刺激B7- 1(CD80 )在诱导有效的抗肿瘤免疫反应中所起的作用。方法 :在体外 ,三种肿瘤细胞与同源小鼠脾淋巴细胞混合培养 (MLTCs)后 ,测定淋巴细胞增殖指数 (MTT法 )和特异杀伤活性 (LDH释放改良法 ) ;MTT法测定肿瘤细胞体... 目的 :研究共刺激B7- 1(CD80 )在诱导有效的抗肿瘤免疫反应中所起的作用。方法 :在体外 ,三种肿瘤细胞与同源小鼠脾淋巴细胞混合培养 (MLTCs)后 ,测定淋巴细胞增殖指数 (MTT法 )和特异杀伤活性 (LDH释放改良法 ) ;MTT法测定肿瘤细胞体外增殖能力后 ,将B16 -neo和B16 -mB7- 1细胞分别接种于C57BL/6小鼠皮下后观察成瘤期、荷瘤小鼠存活期以及肿瘤结节生长速度。结果 :与野生型B16细胞和模拟转染的B16细胞 (B16 -neo)比较 ,mB7- 1基因转染的B16细胞 (B16 -mB7- 1)在体外刺激淋巴细胞增殖和诱导CTLs的能力明显增强(P <0 0 5 ) ;尽管两种细胞在体外无明显差异 ,但是与B16 -neo相比 ,B16 -mB7- 1细胞在同源小鼠体内生长速度明显减慢 (P <0 0 5 ) ,成瘤潜伏期和荷瘤小鼠存活期均明显延长 (P <0 0 5 )。结论 :将B7- 1基因导入弱免疫原性的黑色素瘤B16细胞中表达能增强其免疫原性 ,在体内外较有效地诱导CTL介导的抗肿瘤免疫反应。 展开更多
关键词 B16-neo 免疫原性 肿瘤疫苗 肿瘤 基因治疗
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热休克蛋白90α、70、27mRNA在急性白血病细胞中表达的研究
8
作者 肖侃艳 刘文励 +3 位作者 屈伸 孙汉英 张瑶珍 唐锦治 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 1996年第2期158-163,共6页
运用RNA分子杂交的方法,观察了热休克蛋白(heat shock protein,HSP)90α、70、27在22例白血病病人细胞,正常血细胞及K562红白血病细胞系中的表达。结果表明:16例白血病病人中,4例急性淋巴细胞白血病(ALL),6例急性非淋巴白血病(ANLL)、1... 运用RNA分子杂交的方法,观察了热休克蛋白(heat shock protein,HSP)90α、70、27在22例白血病病人细胞,正常血细胞及K562红白血病细胞系中的表达。结果表明:16例白血病病人中,4例急性淋巴细胞白血病(ALL),6例急性非淋巴白血病(ANLL)、1例慢性粒细胞白血病急变期(慢粒急变)和2例骨髓增生异常综合征(MDS)血细胞呈现HSP27高水平表达,较正常血细胞显著增多,ALL(5例)与ANLL(7例)白血病细胞HSP27表达水平无明显改变。检测了7例白血病细胞HSP70的表达水平,除1例ALL及1例MDS明显升高外,其余5例(包括1例ALL,3例ANLL和1例慢粒急变)显著低于正常血细胞。17例白血病病人细胞(包括9例ANLL、5例ALL、2例慢粒急变和1例MDS)HSP90α表达水平均升高,明显高于正常。结果提示:白血病细胞HSP90α表达水平的升高可能与白血病细胞活跃异常增殖有关,而HSP27基因的高表达可能不是某种急性白血病的特殊标志。 展开更多
关键词 急性白血病 白血病细胞 热休克蛋白
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酸性α-1,4葡萄糖苷酶交叉免疫反应物的火箭电泳检测法
9
作者 唐玉珠 尤颖健 何善述 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1995年第2期105-105,124,共2页
酸性α-1,4葡萄糖苷酶交叉免疫反应物的火箭电泳检测法唐玉珠,尤颖健,何善述(同济医科大学生化教研室武汉430030)酸性α-1,4葡萄糖苷酶(Acidα-Glucosidase,GAA)是Pompe病的缺陷酶。由于... 酸性α-1,4葡萄糖苷酶交叉免疫反应物的火箭电泳检测法唐玉珠,尤颖健,何善述(同济医科大学生化教研室武汉430030)酸性α-1,4葡萄糖苷酶(Acidα-Glucosidase,GAA)是Pompe病的缺陷酶。由于遗传缺陷的基础不同,有些患者其GA... 展开更多
关键词 葡萄糖苷酶 酸性 交叉免疫反应物 火箭电泳法
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利用复感儿T淋巴细胞作为外源性ADA基因表达效应细胞的实验探讨
10
作者 尤颖健 屈伸 +2 位作者 何善述 王晓琳 沈关心 《生物化学杂志》 CSCD 1997年第4期396-400,共5页
对41例健康儿童和17例反复呼吸道感染患儿(复咸儿)的外周血淋巴细胞ADA活性进行了检测.两例ADA活性明显低下的复感儿的外周血T淋巴细胞被选作实验样品,经体外培养后,采用lipofectin介导的的方法导入外源性A... 对41例健康儿童和17例反复呼吸道感染患儿(复咸儿)的外周血淋巴细胞ADA活性进行了检测.两例ADA活性明显低下的复感儿的外周血T淋巴细胞被选作实验样品,经体外培养后,采用lipofectin介导的的方法导入外源性ADA基因.结果表明:体外培养的两例复感儿淋巴细胞中ADA活性较基因转移前升高; 展开更多
关键词 反复呼吸道感染 腺苷脱氨酶 淋巴细胞 基因表达
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胆汁β-葡萄糖醛酸苷酶的性质及其计算荧光法
11
作者 宋立新 何善述 《生物化学杂志》 CSCD 1990年第6期499-504,共6页
胆汁经Sephadex G-25分子筛层析和DEAE-纤维素吸附处理,除去其中直接胆红素及胆汁酸盐,然后对其中的β-葡萄糖醛酸苷酶(GUSB)的性质进行了详细研究:该酶的最适温度为56℃;最适pH为4.5;以4mu Gr为底物测得Km为0.68mmol/L;直接胆红素是其... 胆汁经Sephadex G-25分子筛层析和DEAE-纤维素吸附处理,除去其中直接胆红素及胆汁酸盐,然后对其中的β-葡萄糖醛酸苷酶(GUSB)的性质进行了详细研究:该酶的最适温度为56℃;最适pH为4.5;以4mu Gr为底物测得Km为0.68mmol/L;直接胆红素是其竞争性抑制剂,其k_i=2.04×10^(-3)mmol/L;PI_1=6.0—6.2,PI_2=7.2—7.4,MW=280kD。根据竞争性抑制的米氏方程式设计建立了一个在直接胆红素并存的条件下,定量测定胆汁GUSB的计算荧光法,准确性为97.97±1.79%,重复性CV=1.2%,测定时间大大缩短。利用本法在pH4.5和7.0条件下测定了20例胆红素胆结石和17例胆固醇胆结石患者的胆汁GUSB的真实活性。结果指出:不论在pH4.5或7.0条件下,前组活性均显著高于后组(P<0.01)。证明胆汁中高GUSB活性与胆红素胆结石的形成有密切关系。 展开更多
关键词 胆汁 GUSB 荧光法
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人胎盘酸性β-1,4葡萄糖苷酶的纯化及部分性质
12
作者 王瑞秀 何善述 《生物化学杂志》 CSCD 1990年第6期517-521,共5页
本文以正常人胎盘为材料,通过匀浆、硫酸铵分级分离、20%正丁醇抽提、Sephadex G-200凝胶过滤及Concanavalin A-Sepharose 4B亲和层析等分离纯化步骤,制备获得了纯化3705倍的酸性β-1,4葡萄糖苷酶,其比活性和获得率分别为277261.33n mo... 本文以正常人胎盘为材料,通过匀浆、硫酸铵分级分离、20%正丁醇抽提、Sephadex G-200凝胶过滤及Concanavalin A-Sepharose 4B亲和层析等分离纯化步骤,制备获得了纯化3705倍的酸性β-1,4葡萄糖苷酶,其比活性和获得率分别为277261.33n mol·(mg Prot·h)^(-1)和14.3%。 经agarosn-IEF检验,该纯化的酸性β-1,4葡萄糖苷酶已达蛋白电泳单点纯,PI为5.2。经3~28%梯度PAGE,求知该酶单体分子量为74kD。该纯制酶极不稳定,4℃贮存6天后活性即降低50%以上,与其特异性抗体结合后,活性全部被抑制。 展开更多
关键词 Β-葡萄糖苷酶 纯化
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遗传性代谢性疾病的产前诊断
13
作者 何善述 《实用妇产科杂志》 CAS CSCD 北大核心 1994年第2期66-67,共2页
遗传性代谢性疾病的产前诊断430030同济医科大学生化教研室何善述随着诊断技术及分子生物学的进展,人类遗传性疾病的种类(包括Ⅱ型)已报道近达6000种,其中极大多数仍属于单基因遗传病。在这些单基因遗传病中,已被单基因... 遗传性代谢性疾病的产前诊断430030同济医科大学生化教研室何善述随着诊断技术及分子生物学的进展,人类遗传性疾病的种类(包括Ⅱ型)已报道近达6000种,其中极大多数仍属于单基因遗传病。在这些单基因遗传病中,已被单基因遗传病。在这些单基因遗传病中,已被... 展开更多
关键词 遗传性 代谢性疾病 产前诊断
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全长及缺失VLDL受体基因转染的CHO细胞与β-VLDL的结合效应 被引量:6
14
作者 冯宁 周华 +4 位作者 屈伸 邓耀祖 冯宗忱 陆国平 龚兰生 《中国生物化学与分子生物学报》 CSCD 2000年第4期478-482,共5页
为探讨 VLDL受体结合域中 8个重复序列在结合 VLDL中所起的作用 ,利用构建的全长VLDL受体 c DNA和缺失 5个重复序列的该受体 c DNA重组表达载体分别导入 CHO细胞中 .RT- PCR可检测到外源性 VLDL受体基因的表达 .受体与配体结合研究表明 ... 为探讨 VLDL受体结合域中 8个重复序列在结合 VLDL中所起的作用 ,利用构建的全长VLDL受体 c DNA和缺失 5个重复序列的该受体 c DNA重组表达载体分别导入 CHO细胞中 .RT- PCR可检测到外源性 VLDL受体基因的表达 .受体与配体结合研究表明 ,转染全长 VLDLR重组体的 CHO细胞结合β- VLDL的能力明显高于转染 VLDLR缺失重组体的 CHO细胞 ,表明人VLDL受体在 CHO细胞中能有效表达 ,而缺失 5个重复序列的 展开更多
关键词 VLDL受体 基因表达 β-VLDL CHO细胞 结合效应
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巨噬细胞极低密度脂蛋白受体的调节作用 被引量:1
15
作者 黄强 冯宗忱 +1 位作者 邓耀祖 王淳本 《生物化学杂志》 CAS CSCD 1992年第2期234-241,共8页
本文研究了小鼠腹腔巨噬细胞极低密度脂蛋白(VLDL)受体的调节。用富含甘油三酯(TG)的VLDL与小鼠巨噬细胞预温育后,细胞结合^(125)I-VLDL的最大结合容量(Bmax)比对照细胞只降低5%(1071/1127ng/mg细胞蛋白质),当细胞内TG增加到对照的2.5... 本文研究了小鼠腹腔巨噬细胞极低密度脂蛋白(VLDL)受体的调节。用富含甘油三酯(TG)的VLDL与小鼠巨噬细胞预温育后,细胞结合^(125)I-VLDL的最大结合容量(Bmax)比对照细胞只降低5%(1071/1127ng/mg细胞蛋白质),当细胞内TG增加到对照的2.5倍时,细胞摄取及降解^(125)I-VLDL的量分别下降40%和22%;乙酰-低密度脂蛋白(AC-LDL)预温育的细胞结合^(125)I-VLDL的Bmax比对照细胞只降低14%(633/831ng/mg细胞蛋白质),当细胞内胆固醇(Ch)增加到对照的23倍时,细胞摄取及降解^(125)I-VLDL的量只分别下降10%和21%。此后随着细胞内TG或Ch含量的增加,摄取及降解^(125)I-VLDL的量仍保持不变。 结论:细胞内TG或Ch含量对VLDL受体的调节作用微弱,与TG相比,Ch的调节作用更弱。 展开更多
关键词 VLDL 巨噬细胞 动脉粥样硬化
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巨噬细胞对正常人极低密度脂蛋白亚组分代谢的研究
16
作者 李巍 冯宗忱 邓耀祖 《生物化学杂志》 CSCD 1993年第3期287-292,共6页
本文研究了小鼠腹腔巨噬细胞对正常人极低密度脂蛋白(N-VLDL)两种亚组分VLDL_1和VLDL_3的代谢。两种亚组分都能以受体方式和非特异性方式被巨噬细胞摄取和降解。在受体途径中以VLDL_1的摄入量居多。对胞内甘油三酯(TG)的堆积作用以VLDL_... 本文研究了小鼠腹腔巨噬细胞对正常人极低密度脂蛋白(N-VLDL)两种亚组分VLDL_1和VLDL_3的代谢。两种亚组分都能以受体方式和非特异性方式被巨噬细胞摄取和降解。在受体途径中以VLDL_1的摄入量居多。对胞内甘油三酯(TG)的堆积作用以VLDL_1较强,对胆固醇酶(CE)的堆积则以VLDL_3较强。表明两者在促进巨噬细胞向泡沫细胞转变中的作用有所不同。 展开更多
关键词 巨噬细胞 低密度脂蛋白 亚组分
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