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重组人β-淀粉样蛋白1-42大规模发酵及纯化工艺
被引量:
1
1
作者
申茉函
王全才
+3 位作者
刘佳伟
韦安慧
朱洁
颜炜群
《吉林大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第1期34-38,共5页
目的:在毕赤酵母(Pichia pastoris)中高效表达人β-淀粉样蛋白1-42(hAβ1-42),用80L的发酵罐大量制备hAβ1-42。方法:在成功构建表达载体pPICZα—hAβ1-42并电转化至毕赤酵母X-33的基础上,筛选高表达hAβ1-42工程菌,对发酵液...
目的:在毕赤酵母(Pichia pastoris)中高效表达人β-淀粉样蛋白1-42(hAβ1-42),用80L的发酵罐大量制备hAβ1-42。方法:在成功构建表达载体pPICZα—hAβ1-42并电转化至毕赤酵母X-33的基础上,筛选高表达hAβ1-42工程菌,对发酵液的pH值、溶解氧、甲醇流加速度以及诱导表达的时间等发酵条件进行系统优化,通过阳离子交换层析和反向疏水层析对其进行纯化,实现其大规模制备。结果:筛选出的高表达工程菌采用80L发酵罐甲醇诱导补料批式发酵,在pH4.0、溶解氧浓度20%~30%、罐内压力为10psi、甲醇诱导48h时产量最高可达150mg·L^-1;纯化的hAβ1-42经SDS-PAGE分析显示单一区带,相对分子质量约为4200。结论:构建、筛选出高效表达hAβ1-42的毕赤酵母工程菌,并建立稳定的发酵和纯化制备工艺。
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关键词
Β-淀粉样蛋白
发酵
分离
提纯
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职称材料
题名
重组人β-淀粉样蛋白1-42大规模发酵及纯化工艺
被引量:
1
1
作者
申茉函
王全才
刘佳伟
韦安慧
朱洁
颜炜群
机构
吉林
大学药学院医学生物工程研究室
中国医科大学盛京
医院
神经外科
吉林省长春市第六医院ect醒脉通治疗室
出处
《吉林大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第1期34-38,共5页
基金
国家高技术研究发展计划(863计划)资助课题(2004AA205020)
文摘
目的:在毕赤酵母(Pichia pastoris)中高效表达人β-淀粉样蛋白1-42(hAβ1-42),用80L的发酵罐大量制备hAβ1-42。方法:在成功构建表达载体pPICZα—hAβ1-42并电转化至毕赤酵母X-33的基础上,筛选高表达hAβ1-42工程菌,对发酵液的pH值、溶解氧、甲醇流加速度以及诱导表达的时间等发酵条件进行系统优化,通过阳离子交换层析和反向疏水层析对其进行纯化,实现其大规模制备。结果:筛选出的高表达工程菌采用80L发酵罐甲醇诱导补料批式发酵,在pH4.0、溶解氧浓度20%~30%、罐内压力为10psi、甲醇诱导48h时产量最高可达150mg·L^-1;纯化的hAβ1-42经SDS-PAGE分析显示单一区带,相对分子质量约为4200。结论:构建、筛选出高效表达hAβ1-42的毕赤酵母工程菌,并建立稳定的发酵和纯化制备工艺。
关键词
Β-淀粉样蛋白
发酵
分离
提纯
Keywords
β-amyloid protein
fermentation
separation
purification
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
重组人β-淀粉样蛋白1-42大规模发酵及纯化工艺
申茉函
王全才
刘佳伟
韦安慧
朱洁
颜炜群
《吉林大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2009
1
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