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重组人β-淀粉样蛋白1-42大规模发酵及纯化工艺 被引量:1
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作者 申茉函 王全才 +3 位作者 刘佳伟 韦安慧 朱洁 颜炜群 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期34-38,共5页
目的:在毕赤酵母(Pichia pastoris)中高效表达人β-淀粉样蛋白1-42(hAβ1-42),用80L的发酵罐大量制备hAβ1-42。方法:在成功构建表达载体pPICZα—hAβ1-42并电转化至毕赤酵母X-33的基础上,筛选高表达hAβ1-42工程菌,对发酵液... 目的:在毕赤酵母(Pichia pastoris)中高效表达人β-淀粉样蛋白1-42(hAβ1-42),用80L的发酵罐大量制备hAβ1-42。方法:在成功构建表达载体pPICZα—hAβ1-42并电转化至毕赤酵母X-33的基础上,筛选高表达hAβ1-42工程菌,对发酵液的pH值、溶解氧、甲醇流加速度以及诱导表达的时间等发酵条件进行系统优化,通过阳离子交换层析和反向疏水层析对其进行纯化,实现其大规模制备。结果:筛选出的高表达工程菌采用80L发酵罐甲醇诱导补料批式发酵,在pH4.0、溶解氧浓度20%~30%、罐内压力为10psi、甲醇诱导48h时产量最高可达150mg·L^-1;纯化的hAβ1-42经SDS-PAGE分析显示单一区带,相对分子质量约为4200。结论:构建、筛选出高效表达hAβ1-42的毕赤酵母工程菌,并建立稳定的发酵和纯化制备工艺。 展开更多
关键词 Β-淀粉样蛋白 发酵 分离 提纯
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