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人CDC2基因的克隆和原核表达及鉴定
被引量：
1
1
作者
徐波
郑永晨
费邵阳
《吉林大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第5期834-836,共3页
目的:从人肝癌组织中克隆出人细胞分裂周期基因2(CDC2),并在大肠杆菌中表达CDC2蛋白。方法:从人肝癌组织中提取RNA,采用RT-PCR法扩增CDC2cDNA,用DNA凝胶回收试剂盒纯化并回收RT-PCR产物,将RT-PCR产物插入pET28a(+)载体NdeⅠ和XhoⅠ两酶...
目的:从人肝癌组织中克隆出人细胞分裂周期基因2(CDC2),并在大肠杆菌中表达CDC2蛋白。方法:从人肝癌组织中提取RNA,采用RT-PCR法扩增CDC2cDNA,用DNA凝胶回收试剂盒纯化并回收RT-PCR产物,将RT-PCR产物插入pET28a(+)载体NdeⅠ和XhoⅠ两酶切位点之间,转化大肠杆菌BL21(DE3);IPTG诱导表达人CDC2蛋白。结果:RT-PCR扩增出约894bp的DNA片段,与GenBank中的CDC2基因序列完全一致。经限制性内切图谱和测序鉴定,成功构建了pET28a(+)/CDC2原核表达载体。SDS-PAGE分析结果显示人CDC2蛋白在大肠杆菌中得已表达。结论:从人肝癌组织中成功地扩增出CDC2基因,并在大肠杆菌中表达。
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关键词
人细胞分裂周期基因2
基因克隆
原核表达
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职称材料
题名
人CDC2基因的克隆和原核表达及鉴定
被引量：
1
1
作者
徐波
郑永晨
费邵阳
机构
吉林
大学第二
医院
中心实验室
吉林省第三人民医院神经外科
出处
《吉林大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第5期834-836,共3页
基金
吉林省科学技术厅资助课题(20030434)
文摘
目的:从人肝癌组织中克隆出人细胞分裂周期基因2(CDC2),并在大肠杆菌中表达CDC2蛋白。方法:从人肝癌组织中提取RNA,采用RT-PCR法扩增CDC2cDNA,用DNA凝胶回收试剂盒纯化并回收RT-PCR产物,将RT-PCR产物插入pET28a(+)载体NdeⅠ和XhoⅠ两酶切位点之间,转化大肠杆菌BL21(DE3);IPTG诱导表达人CDC2蛋白。结果:RT-PCR扩增出约894bp的DNA片段,与GenBank中的CDC2基因序列完全一致。经限制性内切图谱和测序鉴定,成功构建了pET28a(+)/CDC2原核表达载体。SDS-PAGE分析结果显示人CDC2蛋白在大肠杆菌中得已表达。结论:从人肝癌组织中成功地扩增出CDC2基因,并在大肠杆菌中表达。
关键词
人细胞分裂周期基因2
基因克隆
原核表达
Keywords
human cell division cycle gene 2
gene clone
prokaryotic expression
分类号
Q784 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
人CDC2基因的克隆和原核表达及鉴定
徐波
郑永晨
费邵阳
《吉林大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2007
1
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