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沙门氏菌LAMP检测方法的建立
被引量：
13
1
作者
李佳桐
王楠
+3 位作者
金贞爱
许尧
邵洪泽
金鑫
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2014年第3期91-94,共4页
本试验旨在建立一种能快速、灵敏、特异的检测沙门氏菌的LAMP方法。据GenBank公布的沙门氏菌高度保守的STN基因序列设计引物,继而进行一系列的LAMP反应条件的优化、特异性、敏感性、稳定性、酶切试验,并将LAMP与常规PCR进行比较。结果显...
本试验旨在建立一种能快速、灵敏、特异的检测沙门氏菌的LAMP方法。据GenBank公布的沙门氏菌高度保守的STN基因序列设计引物,继而进行一系列的LAMP反应条件的优化、特异性、敏感性、稳定性、酶切试验,并将LAMP与常规PCR进行比较。结果显示,LAMP方法最佳反应温度为65℃,只扩增沙门氏菌,最低可检出浓度为101 CFU/mL,比常规PCR的最低检出浓度高1个数量级。本试验结果表明LAMP方法对沙门氏菌的检测特异性强、敏感性高、耗时短、方法简便,有望发展成为快速检测沙门氏菌的有效手段。
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关键词
环介导等温扩增
沙门氏菌
检测
STN
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职称材料
利用SOE-PCR与TD-PCR技术对气肿疽梭菌FliA(C)-NanA融合基因扩增方法的构建
被引量：
4
2
作者
李香春
金鑫
+2 位作者
朴春宇
金成德
朴春实
《安徽农业科学》
CAS
2013年第24期9921-9923,共3页
[目的]构建联合表达气肿疽梭菌的鞭毛蛋白与分泌蛋白神经氨酸酶的方法,用以制备气肿疽生物工程亚单位疫苗。[方法]根据已公布的气肿疽梭菌FliA(C)和NanA序列设计引物,联合使用SOE-PCR与TD-PCR技术,建立融合基因FliA(C)-NanA的扩增方法。...
[目的]构建联合表达气肿疽梭菌的鞭毛蛋白与分泌蛋白神经氨酸酶的方法,用以制备气肿疽生物工程亚单位疫苗。[方法]根据已公布的气肿疽梭菌FliA(C)和NanA序列设计引物,联合使用SOE-PCR与TD-PCR技术,建立融合基因FliA(C)-NanA的扩增方法。[结果]试验成功扩增出了融合基因FliA(C)-NanA。[结论]SOE-PCR方法无需在引物设计中加入酶切位点进行连接,降低了试验成本,且2个基因间未加入其他核酸序列,避免了表达出影响免疫效果的蛋白;TD-PCR的应用节省了试验时间,避免了筛选退火温度的繁琐步骤,解决了基因丢失的问题。
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关键词
气肿疽梭菌
融合基因
SOE-PCR
TD-PCR
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职称材料
题名
沙门氏菌LAMP检测方法的建立
被引量：
13
1
作者
李佳桐
王楠
金贞爱
许尧
邵洪泽
金鑫
机构
延边大学农学院
吉林省
动物
疫病预防控制中心
吉林省珲春市动物卫生监督所
吉林省
畜牧兽医科学研究院
出处
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2014年第3期91-94,共4页
基金
吉林省食品安全地方标准制(修)订项目(DBS22/045-2012)
文摘
本试验旨在建立一种能快速、灵敏、特异的检测沙门氏菌的LAMP方法。据GenBank公布的沙门氏菌高度保守的STN基因序列设计引物,继而进行一系列的LAMP反应条件的优化、特异性、敏感性、稳定性、酶切试验,并将LAMP与常规PCR进行比较。结果显示,LAMP方法最佳反应温度为65℃,只扩增沙门氏菌,最低可检出浓度为101 CFU/mL,比常规PCR的最低检出浓度高1个数量级。本试验结果表明LAMP方法对沙门氏菌的检测特异性强、敏感性高、耗时短、方法简便,有望发展成为快速检测沙门氏菌的有效手段。
关键词
环介导等温扩增
沙门氏菌
检测
STN
Keywords
loop mediated isothermal amplification
Salmonella
detection
STN
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
利用SOE-PCR与TD-PCR技术对气肿疽梭菌FliA(C)-NanA融合基因扩增方法的构建
被引量：
4
2
作者
李香春
金鑫
朴春宇
金成德
朴春实
机构
延边大学农学院
动物
医学系
延吉市
动物
卫生
检疫站
吉林省
晖春畜牧管理局
吉林省珲春市动物卫生监督所
出处
《安徽农业科学》
CAS
2013年第24期9921-9923,共3页
文摘
[目的]构建联合表达气肿疽梭菌的鞭毛蛋白与分泌蛋白神经氨酸酶的方法,用以制备气肿疽生物工程亚单位疫苗。[方法]根据已公布的气肿疽梭菌FliA(C)和NanA序列设计引物,联合使用SOE-PCR与TD-PCR技术,建立融合基因FliA(C)-NanA的扩增方法。[结果]试验成功扩增出了融合基因FliA(C)-NanA。[结论]SOE-PCR方法无需在引物设计中加入酶切位点进行连接,降低了试验成本,且2个基因间未加入其他核酸序列,避免了表达出影响免疫效果的蛋白;TD-PCR的应用节省了试验时间,避免了筛选退火温度的繁琐步骤,解决了基因丢失的问题。
关键词
气肿疽梭菌
融合基因
SOE-PCR
TD-PCR
Keywords
Clostridium chauvoei
Fusion gene
SOE-PCR
TD-PCR
分类号
S188 [农业科学—农业基础科学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
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1
沙门氏菌LAMP检测方法的建立
李佳桐
王楠
金贞爱
许尧
邵洪泽
金鑫
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2014
13
在线阅读
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职称材料
2
利用SOE-PCR与TD-PCR技术对气肿疽梭菌FliA(C)-NanA融合基因扩增方法的构建
李香春
金鑫
朴春宇
金成德
朴春实
《安徽农业科学》
CAS
2013
4
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职称材料
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