检索结果-维普期刊中文期刊服务平台

基于施孔数法筛选抗胎儿血红蛋白单克隆抗体及其在初步诊断β地中海贫血方法中的应用: 1; 作者尹茉莉徐婧哲 +3 位作者闫宇童祯骁刘磊王会岩《实用医学杂志》北大核心 2025年第2期271-277,共7页; 目的建立初步诊断β地中海贫血(BT)双抗体夹心ELISA方法。方法利用施孔数法筛选分泌抗胎儿血红蛋白(HbF)单抗的杂交瘤细胞株,采用ELISA、改良免疫细胞化学、Western blot方法进一步评价抗体的性质,采用戊二醛标记方法将碱性磷酸酶(ALP... 展开更多; 关键词胎儿血红蛋白单克隆抗体定量检测施孔数法; 在线阅读下载PDF 职称材料

基于单B细胞筛选技术制备PRRSV N蛋白单克隆抗体: 2; 作者李钰婷王衡平 +2 位作者李芳周昕王会岩《中国兽医杂志》北大核心 2025年第9期63-70,共8页; 为制备猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)核衣壳(N)蛋白的单克隆抗体。本试验构建和鉴定重组表达质粒pET28a(+)-sumo-N,以原核表达并纯化的N蛋白免疫BALB/c小鼠,应用单B细胞筛选技术获得分泌针对N蛋白的特异性抗体的单B细胞,再经单细胞测... 展开更多; 关键词猪繁殖与呼吸综合征(PRRSV) N蛋白单克隆抗体单B细胞筛选技术; 在线阅读下载PDF 职称材料

应用高效电融合技术制备小鼠抗人vasorin(VASN)单克隆抗体被引量：3: 3; 作者尹茉莉聂元旺 +4 位作者刘浩张爽刘磊李秀春王会岩《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第3期265-270,共6页; 目的通过电融合法制备肝癌候选标志物人vasorin(VASN)蛋白单克隆抗体并进行鉴定。方法以人带组氨酸标签的VASN重组蛋白(VASN-His)免疫小鼠后进行细胞电融合,间接ELISA筛选能够结合天然VASN的阳性克隆。通过ELISA检测抗体的效价及亲和力... 展开更多; 关键词肝细胞癌 vasorin(VASN) 电融合单克隆抗体; 在线阅读下载PDF 职称材料

成纤维细胞生长因子20单克隆抗体的制备及鉴定被引量：1: 4; 作者唐禄董丽平 +3 位作者尹茉莉刘磊董媛王会岩《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第10期179-185,共7页; 构建表达重组人成纤维细胞生长因子20(fibroblast growth factor 20,FGF20)原核表达载体,并制备抗FGF20单克隆抗体,为开发新的药物奠定基础。构建pET24a-SUMO-hFGF20原核表达载体,转化到大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达。经镍NTA亲和层析... 展开更多; 关键词成纤维细胞生长因子20 原核表达蛋白纯化单克隆抗体; 在线阅读下载PDF 职称材料

基于电融合方法的牛妊娠相关糖蛋白单克隆抗体制备及其应用: 5; 作者尹茉莉聂元旺 +5 位作者周婉婷张爽刘磊冀慧敏刘方圆王会岩《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2022年第12期25-30,共6页; 为了制备抗牛妊娠相关糖蛋白(bPAG)单克隆抗体,本试验提纯妊娠母牛子叶bPAG,免疫小鼠后进行细胞电融合,通过ELISA、Western blot方法对抗bPAG单克隆抗体进行筛选。结果显示:获得5株bPAG特异性强、灵敏度高的单克隆抗体,抗体最高效价为1... 展开更多; 关键词牛妊娠相关糖蛋白电融合单克隆抗体双抗夹心ELISA; 在线阅读下载PDF 职称材料

2-氧杂双环[3,3,0]辛-6-烯-3-酮对映异构体手性拆分及光学纯度的测定被引量：3: 6; 作者曹宏王淑红 +3 位作者赵春影胡川闽蔡建辉修志明《吉林大学学报（理学版）》 CAS 北大核心 2019年第6期1530-1534,共5页; 以表面涂覆纤维素-三(3,5-二甲基苯基氨基甲酸酯)手性硅胶为固定相,以V(正己烷)∶V(异丙醇)=95∶5的溶剂为流动相,拆分对映异构体2-氧杂双环[3,3,0]辛-6-烯-3-酮.流速为0.8mL/min,柱温25℃,检测波长205nm.结果表明:该条件下对映异构体... 展开更多; 关键词 2-氧杂双环[3 3 0]辛-6-烯-3-酮对映异构体拆分光学纯度; 在线阅读下载PDF 职称材料

水通道蛋白4小分子抑制剂的筛选和验证: 7; 作者王楠郭健 +5 位作者闫冰刘晴张磊许会静李淼孙美艳《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期511-518,共8页; 目的:采用高通量筛选方法筛选出抑制视神经脊髓炎(NMO)-IgG与水通道蛋白4(AQP4)结合的小分子。方法:将FRT-AQP4细胞分为阴性对照组(不加小分子化合物)和筛选组,采用化学发光法检测辣根过氧化物酶(HRP)活性。将V79-AQP4细胞分为抑制剂组(... 展开更多; 关键词水通道蛋白视神经脊髓炎小分子抑制剂高通量筛选; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名基于施孔数法筛选抗胎儿血红蛋白单克隆抗体及其在初步诊断β地中海贫血方法中的应用: 1; 作者尹茉莉徐婧哲闫宇童祯骁刘磊王会岩; 机构吉林医药学院; 出处《实用医学杂志》北大核心 2025年第2期271-277,共7页; 基金吉林省科技厅项目(编号:20210204186YY)。; 文摘目的建立初步诊断β地中海贫血(BT)双抗体夹心ELISA方法。方法利用施孔数法筛选分泌抗胎儿血红蛋白(HbF)单抗的杂交瘤细胞株,采用ELISA、改良免疫细胞化学、Western blot方法进一步评价抗体的性质,采用戊二醛标记方法将碱性磷酸酶(ALP)和抗HbF单抗进行偶联,筛选最佳配对抗体用于双抗夹心ELISA方法,对40份临床血样进行检测。结果筛选到9株高亲和力分泌抗HbF单抗的杂交瘤细胞株,其中4株HbF单抗(3F7、4G1、6C1、9H7)与HbF特异性结合,与血红蛋白(HbA和HbA_2)不发生交叉反应,抗体最高效价为1∶256 000,亲和力最高可达到2.36×10^(8) L/mol。与高效液相色谱法比,以3F7作为捕获抗体与ALP-4G1配对建立的双抗夹心ELISA方法通过定量检测HbF含量以区分胎儿和健康人血样,其敏感度达80%。结论建立的夹心ELISA方法能够准确测量HbF水平,为临床上诊断BT提供帮助。; 关键词胎儿血红蛋白单克隆抗体定量检测施孔数法; Keywords fetal hemoglobin monoclonal antibody quantitative detection trailing count method; 分类号 R392-33 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名基于单B细胞筛选技术制备PRRSV N蛋白单克隆抗体: 2; 作者李钰婷王衡平李芳周昕王会岩; 机构扬州大学兽医学院吉林医药学院吉林省抗体工程科技协同创新中心; 出处《中国兽医杂志》北大核心 2025年第9期63-70,共8页; 基金吉林省科技发展计划项目(20240404022ZP)。; 文摘为制备猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)核衣壳(N)蛋白的单克隆抗体。本试验构建和鉴定重组表达质粒pET28a(+)-sumo-N,以原核表达并纯化的N蛋白免疫BALB/c小鼠,应用单B细胞筛选技术获得分泌针对N蛋白的特异性抗体的单B细胞,再经单细胞测序获得抗体基因序列并构建真核表达质粒,利用中华仓鼠卵巢(CHO)细胞瞬时转染表达并筛选和纯化单克隆抗体,通过酶联免疫吸附试验(ELISA)测定其效价,蛋白质免疫印迹(WB)鉴定其特异性,生物膜干涉(BLI)技术测定其亲和力和表位分组。结果显示,N蛋白呈可溶性表达,分子量约34 kDa。基于单B细胞筛选技术筛选出5株单克隆抗体。5株单克隆抗体效价均大于10~5,均可与PRRSV N蛋白产生特异性反应,亲和力解离常数(Kd)分别为8.72×10^(-9)、1.41×10^(-8)、1.14×10^(-10)、1.00×10^(-12)和1.54×10^(-11)mol/L,且表位均不相同。本试验应用单B细胞筛选技术成功制备出抗PRRSV N蛋白的特异性单克隆抗体,为进一步研究PRRSV N蛋白的结构特性、功能作用以及建立高效且快速的PRRSV抗体检测方法提供参考。; 关键词猪繁殖与呼吸综合征(PRRSV) N蛋白单克隆抗体单B细胞筛选技术; Keywords porcine reproductive and respiratory syndrome(PRRSV) N protein monoclonal antibody single B cell screen⁃ing technology; 分类号 S855.3 [农业科学—临床兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名应用高效电融合技术制备小鼠抗人vasorin(VASN)单克隆抗体被引量：3: 3; 作者尹茉莉聂元旺刘浩张爽刘磊李秀春王会岩; 机构吉林医药学院吉林省抗体工程科技协同创新中心吉林市园林管理中心吉林铁道职业技术学院组织人事部教师发展科; 出处《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第3期265-270,共6页; 基金吉林省科技厅技术攻关项目(20190301088NY,20170204005YY) 吉林省科技厅项目(20180623045TC) 吉林省大学生创新创业训练项目(201913706017,202013706002)。; 文摘目的通过电融合法制备肝癌候选标志物人vasorin(VASN)蛋白单克隆抗体并进行鉴定。方法以人带组氨酸标签的VASN重组蛋白(VASN-His)免疫小鼠后进行细胞电融合,间接ELISA筛选能够结合天然VASN的阳性克隆。通过ELISA检测抗体的效价及亲和力、Western blot法检测抗体能否识别HepG2细胞中VASN蛋白。结果在脾细胞与Sp2/0细胞的比例为2∶1,交变电场场强50 V 2 MHz 20 s,直流脉冲强度500 V 0.5 s时,融合率达0.31%。获得2株小鼠抗人VASN单克隆抗体(4H1和8B9),抗体最高效价为1∶256000,亲和力最高可达到4.9×10^(6)L/mol;2株抗体均可识别HepG2细胞的VASN蛋白。结论运用细胞电融合法成功制备2株小鼠抗人VASN的单克隆抗体。; 关键词肝细胞癌 vasorin(VASN) 电融合单克隆抗体; Keywords hepatocellular carcinoma vasorin electrofusion monoclonal antibody; 分类号 R735.7 [医药卫生—肿瘤] R392 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名成纤维细胞生长因子20单克隆抗体的制备及鉴定被引量：1: 4; 作者唐禄董丽平尹茉莉刘磊董媛王会岩; 机构吉林医药学院吉林省抗体工程科技协同创新中心; 出处《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第10期179-185,共7页; 基金吉林省教育厅资助项目(JJKH20180822KJ) 吉林省科技厅资助项目(20180623045TC) 吉林省大学生创新创业训练资助项目(201813743007)。; 文摘构建表达重组人成纤维细胞生长因子20(fibroblast growth factor 20,FGF20)原核表达载体,并制备抗FGF20单克隆抗体,为开发新的药物奠定基础。构建pET24a-SUMO-hFGF20原核表达载体,转化到大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达。经镍NTA亲和层析柱纯化融合蛋白,SUMO酶酶切后,再次经镍NTA亲和层析柱纯化,SDS-PAGE法检测目的蛋白纯度。以重组FGF20蛋白免疫Balb/c小鼠,常规方法制备FGF20单克隆抗体,采用protein G柱分离纯化,SDS-PAGE法检测抗体纯度,ELISA法检测抗体效价和亚型,Western blot和SPR法测定抗体亲和力。成功构建pET24a-SUMO-hFGF20重组质粒。经分离纯化后获得FGF20蛋白相对分子质量为23 kD。得到1株ELISA检测强阳性杂交瘤细胞株,单克隆抗体纯化后,效价为1:25600,亚型为IgG1,可以与商品化抗原结合,亲和力为1.07×10^(-7)mol/L。通过构建、表达和纯化重组蛋白,成功制备出抗FGF20蛋白高亲和力单克隆抗体。; 关键词成纤维细胞生长因子20 原核表达蛋白纯化单克隆抗体; Keywords fibroblast growth factor 20(FGF20) prokaryotic expression protein purification monoclonal antibody; 分类号 R392-33 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名基于电融合方法的牛妊娠相关糖蛋白单克隆抗体制备及其应用: 5; 作者尹茉莉聂元旺周婉婷张爽刘磊冀慧敏刘方圆王会岩; 机构吉林医药学院吉林省抗体工程科技协同创新中心吉林省吉林市园林管理中心吉林特研生物技术有限责任公司; 出处《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2022年第12期25-30,共6页; 基金吉林省科技厅技术攻关项目(20190301088 NY)。; 文摘为了制备抗牛妊娠相关糖蛋白(bPAG)单克隆抗体,本试验提纯妊娠母牛子叶bPAG,免疫小鼠后进行细胞电融合,通过ELISA、Western blot方法对抗bPAG单克隆抗体进行筛选。结果显示:获得5株bPAG特异性强、灵敏度高的单克隆抗体,抗体最高效价为1∶256000,亲和力最高可达到3.75×10^(7) L/mol,5株单克隆抗体均能识别天然bPAG蛋白。采用高碘酸钠法对单抗标记辣根过氧化物酶(HRP),将最佳配对抗体用于建立双抗夹心ELISA方法,对64个血清样本进行检测。结果显示:以10H2作为捕获抗体与HRP-5G1配对建立的双抗夹心ELISA方法检测bPAG阳性和阴性血清样本,与爱德士牛早孕检测试剂盒比较符合率达95.2%。结果表明,本试验运用细胞电融合法制备的抗bPAG单克隆抗体可应用于建立双抗夹心ELISA体系,为下一步bPAG检测试剂盒的研制提供技术支持。; 关键词牛妊娠相关糖蛋白电融合单克隆抗体双抗夹心ELISA; Keywords bovine pregnancy associated glycoprotein electrofusion monoclonal antibody double antibody-sandwich ELISA; 分类号 S823.91 [农业科学—畜牧学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名2-氧杂双环[3,3,0]辛-6-烯-3-酮对映异构体手性拆分及光学纯度的测定被引量：3: 6; 作者曹宏王淑红赵春影胡川闽蔡建辉修志明; 机构吉林医药学院吉林省抗体工程科技协同创新中心吉林大学中日联谊医院长春百纯和成医药科技有限公司; 出处《吉林大学学报（理学版）》 CAS 北大核心 2019年第6期1530-1534,共5页; 基金吉林省科技发展计划项目(批准号:20180803002HJ 20190801021ZX); 文摘以表面涂覆纤维素-三(3,5-二甲基苯基氨基甲酸酯)手性硅胶为固定相,以V(正己烷)∶V(异丙醇)=95∶5的溶剂为流动相,拆分对映异构体2-氧杂双环[3,3,0]辛-6-烯-3-酮.流速为0.8mL/min,柱温25℃,检测波长205nm.结果表明:该条件下对映异构体的分离度为3.0,能有效拆分,用面积归一化方法可确定光学纯度.; 关键词 2-氧杂双环[3 3 0]辛-6-烯-3-酮对映异构体拆分光学纯度; Keywords 2-oxabicyclo[3 3 0]oct-6-en-3-one enantiomer separation optical purity; 分类号 O641.6 [理学—物理化学] R917 [医药卫生—药物分析学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名水通道蛋白4小分子抑制剂的筛选和验证: 7; 作者王楠郭健闫冰刘晴张磊许会静李淼孙美艳; 机构吉林医药学院基础医学院实验中心吉林医药学院检验学院实验中心吉林省抗体工程科技协同创新中心吉林大学中日联谊医院神经外科; 出处《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期511-518,共8页; 基金国家自然科学基金项目(81771304) 吉林省科技厅科技计划发展项目(20200201623JC,20200404099YY) +3 种基金吉林省吉林市科技局科技创新发展计划项目(20190104127)。; 文摘目的:采用高通量筛选方法筛选出抑制视神经脊髓炎(NMO)-IgG与水通道蛋白4(AQP4)结合的小分子。方法:将FRT-AQP4细胞分为阴性对照组(不加小分子化合物)和筛选组,采用化学发光法检测辣根过氧化物酶(HRP)活性。将V79-AQP4细胞分为抑制剂组(neosutchuenenine)和二甲基亚砜(DMSO)组,采用免疫荧光法检测各组细胞荧光强度,荧光猝灭法检测各组细胞的水通透性,CellTiter-Glo~?发光法检测补体依赖的细胞毒性,水溶性四氮唑1(WST-1)法检测细胞活性,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测细胞凋亡情况。结果:与阴性对照组比较,筛选组HRP活性明显升高(P<0.01)。与DMSO组比较,抑制剂组红色荧光强度明显降低,而绿色荧光无明显变化;与DMSO组比较,抑制剂组水通透性无明显变化(P>0.05),补体依赖的细胞毒性明显降低(P<0.01),细胞活性和细胞凋亡无明显变化(P>0.05)。结论:成功建立高通量筛选AQP4小分子抑制剂的方法,并筛选出具有阻断作用的小分子抑制剂neosutchuenenine。; 关键词水通道蛋白视神经脊髓炎小分子抑制剂高通量筛选; Keywords aquaporin neuromyelitis optica small molecule inhibitors high throughput screening; 分类号 Q503 [生物学—生物化学] R744.5 [医药卫生—神经病学与精神病学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	基于施孔数法筛选抗胎儿血红蛋白单克隆抗体及其在初步诊断β地中海贫血方法中的应用	尹茉莉徐婧哲闫宇童祯骁刘磊王会岩	《实用医学杂志》北大核心	2025	0	在线阅读下载PDF 职称材料
2	基于单B细胞筛选技术制备PRRSV N蛋白单克隆抗体	李钰婷王衡平李芳周昕王会岩	《中国兽医杂志》北大核心	2025	0	在线阅读下载PDF 职称材料
3	应用高效电融合技术制备小鼠抗人vasorin(VASN)单克隆抗体	尹茉莉聂元旺刘浩张爽刘磊李秀春王会岩	《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2021	3	在线阅读下载PDF 职称材料
4	成纤维细胞生长因子20单克隆抗体的制备及鉴定	唐禄董丽平尹茉莉刘磊董媛王会岩	《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心	2021	1	在线阅读下载PDF 职称材料
5	基于电融合方法的牛妊娠相关糖蛋白单克隆抗体制备及其应用	尹茉莉聂元旺周婉婷张爽刘磊冀慧敏刘方圆王会岩	《中国兽医杂志》 CAS 北大核心	2022	0	在线阅读下载PDF 职称材料
6	2-氧杂双环[3,3,0]辛-6-烯-3-酮对映异构体手性拆分及光学纯度的测定	曹宏王淑红赵春影胡川闽蔡建辉修志明	《吉林大学学报（理学版）》 CAS 北大核心	2019	3	在线阅读下载PDF 职称材料
7	水通道蛋白4小分子抑制剂的筛选和验证	王楠郭健闫冰刘晴张磊许会静李淼孙美艳	《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心	2021	0	在线阅读下载PDF 职称材料