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三七总皂苷对小鼠卵母细胞体外成熟的影响
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作者 周湘雨 尤宝仪 +3 位作者 胡嘉硕 程博文 赵家浩 高青山 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》 北大核心 2025年第5期734-742,共9页
为探究三七总皂苷(Panax notoginseng saponins, PNS)对小鼠卵母细胞体外成熟的影响及其机制,采用6~7周龄雌性昆明小鼠,在M16培养液中添加0(对照)、50、100、200μg/mL PNS,以卵母细胞第一极体排出率为指标筛选最适PNS质量浓度,并采用... 为探究三七总皂苷(Panax notoginseng saponins, PNS)对小鼠卵母细胞体外成熟的影响及其机制,采用6~7周龄雌性昆明小鼠,在M16培养液中添加0(对照)、50、100、200μg/mL PNS,以卵母细胞第一极体排出率为指标筛选最适PNS质量浓度,并采用免疫荧光染色法和实时荧光定量聚合酶链反应技术评估卵母细胞成熟质量及相关抗氧化基因的表达。结果显示:100μg/mL PNS可显著提高第一极体排出率,极显著降低细胞内活性氧(reactive oxygen species, ROS)水平(P<0.01),显著降低组织蛋白酶B与线粒体ROS水平(P<0.05),同时极显著提高谷胱甘肽含量与线粒体膜电位水平(P<0.01);此外,抗氧化基因Nrf2、Gpx3、Sod2、Cat的mRNA表达水平极显著或显著上调(P<0.01或P<0.05)。综上所述,100μg/mL PNS可以通过抑制氧化应激和细胞凋亡改善小鼠卵母细胞体外成熟质量,为优化卵母细胞体外成熟培养体系提供了实验依据。 展开更多
关键词 三七总皂苷 小鼠 卵母细胞 体外成熟
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千金藤素对牛体外卵母细胞和早期胚胎抗凋亡能力的影响
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作者 郑湘民 王玉琪 +4 位作者 徐冰洁 孙朝阳 高青山 方南洙 金庆国 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期2943-2952,共10页
【目的】探究千金藤素(Ceph)对牛卵母细胞及早期胚胎抗凋亡能力的影响,为提高牛体外胚胎生产效率提供参考,同时为Ceph抗癌过程中的药理作用提供新的数据。【方法】将牛卵母细胞分别在含不同浓度(0、10、100、500、1000μmol/L)Ceph的体... 【目的】探究千金藤素(Ceph)对牛卵母细胞及早期胚胎抗凋亡能力的影响,为提高牛体外胚胎生产效率提供参考,同时为Ceph抗癌过程中的药理作用提供新的数据。【方法】将牛卵母细胞分别在含不同浓度(0、10、100、500、1000μmol/L)Ceph的体外成熟培养液中培养,观测卵母细胞成熟率及受精后的早期胚胎发育,确定Ceph的最适浓度,并对牛卵母细胞组织蛋白酶B(CB)活性、细胞自噬相关蛋白LC3水平、凋亡相关基因Survivin和Caspase-3 mRNA表达水平及囊胚细胞凋亡率进行检测。【结果】经500μmol/L Ceph处理的牛卵母细胞成熟率及早期胚胎分裂率、囊胚率均显著高于其他组(P<0.05)。添加Ceph显著降低了牛卵母细胞CB活性和LC3水平(P<0.05),显著提高了抗凋亡相关基因Survivin mRNA表达水平(P<0.05),显著降低了促凋亡相关基因Caspase-3 mRNA表达水平及囊胚细胞凋亡率(P<0.05)。【结论】在体外胚胎生产过程中添加Ceph能够通过调控凋亡相关基因Survivin和Caspase-3的表达影响CB和LC3水平,提升牛卵母细胞抗凋亡能力和体外胚胎生产效率。 展开更多
关键词 千金藤素 卵母细胞 早期胚胎 抗凋亡
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Psammaplin A对牛老化卵母细胞体外发育的影响 被引量:3
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作者 王华清 高青山 +4 位作者 姜文杰 赵予晗 金庆国 李英花 许永男 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2019年第2期497-503,共7页
为探讨组蛋白去乙酰化抑制剂Psammaplin A(PsA)对牛老化卵母细胞体外发育的影响,本试验将卵母细胞随机分为对照组、老化组和50mmol/L PsA处理的老化组(PsA组)。应用免疫荧光染色和JC-1检测牛卵母细胞孤雌激活后的囊胚率、囊胚中的细胞... 为探讨组蛋白去乙酰化抑制剂Psammaplin A(PsA)对牛老化卵母细胞体外发育的影响,本试验将卵母细胞随机分为对照组、老化组和50mmol/L PsA处理的老化组(PsA组)。应用免疫荧光染色和JC-1检测牛卵母细胞孤雌激活后的囊胚率、囊胚中的细胞数、细胞凋亡、活性氧(reactive oxygen species,ROS)、谷胱甘肽(glutathione,GSH)和胚胎线粒体膜电位强度。结果显示,老化组囊胚率显著低于PsA组及对照组(P<0.05),PsA组囊胚率与对照组间无显著差异(P>0.05)。对照组及PsA组囊胚内细胞数显著高于老化组(P<0.05),PsA组囊胚内细胞数与对照组间无显著差异(P>0.05);老化组细胞凋亡率显著高于对照组及PsA组(P<0.05),PsA组细胞凋亡率显著高于对照组(P<0.05)。老化组MⅡ期卵母细胞的GSH水平显著低于对照组与PsA组(P<0.05),对照组与PsA组的GSH水平无显著差异(P>0.05)。老化组1细胞期胚胎ROS水平显著高于对照组和PsA组(P<0.05),PsA组ROS水平显著高于对照组(P<0.05)。老化组4-8细胞早期胚胎的线粒体膜电位强度显著低于对照组和PsA组(P<0.05),对照组线粒体膜电位强度显著高于PsA组(P<0.05)。综上所述,PsA可有效延缓牛卵母细胞的老化并提高卵母细胞和胚胎质量。 展开更多
关键词 牛卵母细胞 Psammaplin A(PsA) 活性氧 线粒体膜电位
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乙草胺对小鼠卵母细胞体外成熟的影响 被引量:1
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作者 王宇 赵予晗 +2 位作者 焦安惠 王玉琪 高青山 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2022年第10期3909-3917,共9页
【目的】研究乙草胺对小鼠卵母细胞体外成熟的影响,为研究体内乙草胺对卵母细胞质量的影响提供参考。【方法】将收集的卵丘-卵母细胞复合体(cumulus-oocyte complexes,COCs)置于含有不同浓度(0(对照组)、10、50、100、130、200μmol/L)... 【目的】研究乙草胺对小鼠卵母细胞体外成熟的影响,为研究体内乙草胺对卵母细胞质量的影响提供参考。【方法】将收集的卵丘-卵母细胞复合体(cumulus-oocyte complexes,COCs)置于含有不同浓度(0(对照组)、10、50、100、130、200μmol/L)乙草胺的体外成熟培养液中培养14 h,统计卵母细胞第一极体排出率,进行体外受精后,统计体外受精胚胎的囊胚率,筛选出适宜于卵母细胞体外培养的乙草胺浓度。将COCs在对照组和筛选出的适宜浓度的乙草胺组成熟培养液中培养14 h后,利用DCFH-DA检测卵母细胞活性氧(ROS)水平;利用CellTracker蓝色染料检测卵母细胞谷胱甘肽(GSH)水平;利用JC-1染色法检测卵母细胞线粒体膜电位水平(mitochondrial membrane potential,MMP);利用实时荧光定量PCR检测卵母细胞内凋亡相关基因的表达水平,利用Hoechst 33342染色检测体外受精胚胎的囊胚细胞总数,用Fluorescein-dUTP染色法检测囊胚细胞凋亡率。【结果】与对照组相比,100、130、200μmol/L乙草胺组卵母细胞的第一极体排出率显著降低(P<0.05),100和130μmol/L乙草胺组体外受精胚胎的囊胚率显著降低(P<0.05),200μmol/L乙草胺组体外受精胚胎未发育到囊胚期,因此选择100和130μmol/L乙草胺进行后续试验。与对照组相比,在100和130μmol/L乙草胺组中,卵母细胞ROS水平显著升高(P<0.05),GSH水平及MMP显著降低(P<0.05),卵母细胞中促凋亡基因Caspase-9的相对表达量显著升高(P<0.05),而抗凋亡基因Bax、Bcl-2的相对表达量显著降低(P<0.05);100和130μmol/L乙草胺组囊胚细胞总数显著降低(P<0.05),囊胚细胞凋亡率显著升高(P<0.05)。【结论】乙草胺通过提高卵母细胞内ROS及促进卵母细胞凋亡降低卵母细胞的质量,从而影响卵母细胞受精后胚胎的发育潜力。 展开更多
关键词 乙草胺 小鼠 卵母细胞 体外成熟 体外受精 早期胚胎
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柠檬苦素对小鼠卵母细胞体外成熟及其体外受精胚胎发育的影响 被引量:1
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作者 焦安惠 张笑梦 +2 位作者 赵予晗 王宇 高青山 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2022年第10期3891-3900,共10页
【目的】研究柠檬苦素(limonin,Lim)对小鼠卵母细胞体外成熟(IVM)及后续体外受精(IVF)胚胎发育潜能的影响,旨在为体外成熟培养系统的优化提供参考。【方法】在小鼠体外成熟培养液中添加不同浓度的Lim(0、10、20、50μmol/L),成熟培养12 ... 【目的】研究柠檬苦素(limonin,Lim)对小鼠卵母细胞体外成熟(IVM)及后续体外受精(IVF)胚胎发育潜能的影响,旨在为体外成熟培养系统的优化提供参考。【方法】在小鼠体外成熟培养液中添加不同浓度的Lim(0、10、20、50μmol/L),成熟培养12 h后统计小鼠卵母细胞第一极体(PBI)排出率,筛选体外成熟培养液中添加Lim的最适浓度;在体外成熟培养液中添加最适浓度的Lim,以0μmol/L Lim为对照组,成熟培养12 h,通过免疫荧光染色检测活性氧(ROS)、谷胱甘肽(GSH)以及线粒体膜电位(MMP)水平;通过实时荧光定量PCR检测卵母细胞抗氧化及凋亡相关基因的mRNA表达水平。将最适Lim组及对照组卵母细胞体外成熟24 h后进行体外受精,于体外受精24 h和3.5 d分别统计胚胎卵裂率和囊胚率,并用Fluorescein-dUTP和Hoechst 33342染色分别检测囊胚总细胞数及囊胚内凋亡细胞比率。【结果】与0μmol/L Lim组相比,20μmol/L Lim组小鼠卵母细胞PBI排出率显著升高(P<0.05),后续试验均用20μmol/L Lim进行处理。与对照组组相比,20μmol/L Lim组小鼠卵母细胞内ROS水平显著降低(P<0.05),GSH、MMP水平均显著增加(P<0.05),抗氧化相关基因(GPx3、CAT和Prdx3)、抗凋亡相关基因(Bcl-2、Bcl-xl)表达水平均显著上调(P<0.05),促凋亡相关基因(Caspase-3)表达水平显著下调(P<0.05);体外受精胚胎的卵裂率、囊胚率、囊胚总细胞数均显著增加(P<0.05),囊胚内细胞凋亡比率显著下降(P<0.05)。【结论】在体外成熟培养液中添加20μmol/L Lim可以通过抑制氧化应激和细胞凋亡、增加MMP水平提高小鼠卵母细胞质量,从而提高体外受精胚胎的发育潜力。 展开更多
关键词 小鼠 卵母细胞 柠檬苦素 体外成熟 氧化应激
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芝麻素对小鼠早期胚胎体外发育的影响
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作者 何道宏 韩国波 +4 位作者 孙敬宇 鄂志强 崔宇新 许永男 高青山 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2019年第12期3666-3673,共8页
本试验旨研究在体外培养(in vitro culture,IVC)中添加芝麻素(sesamin,SES)对小鼠早期胚胎体外发育的影响。采集6周龄雌性昆明小鼠受精卵,随机分为对照组和不同浓度(10、50、100μmol/L)SES组。采用Fluorescein-dUTP和Hoechst 33342免... 本试验旨研究在体外培养(in vitro culture,IVC)中添加芝麻素(sesamin,SES)对小鼠早期胚胎体外发育的影响。采集6周龄雌性昆明小鼠受精卵,随机分为对照组和不同浓度(10、50、100μmol/L)SES组。采用Fluorescein-dUTP和Hoechst 33342免疫荧光染色分别检测囊胚内细胞凋亡率和总细胞数;采用DCFH-DA检测早期胚胎内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平;采用CMF 2HC检测早期胚胎内谷胱甘肽(glutathione,GSH)水平;采用JC-1检测早期胚胎线粒体膜电位强度。结果显示,不同浓度SES组分裂率和囊胚率较对照组均有提高,但无显著差异(P>0.05);50μmol/L SES组细胞数较对照组显著提高(P<0.05),细胞凋亡率较对照组显著降低(P<0.05);与对照组相比,50μmol/L SES组ROS水平显著降低(P<0.05),GSH水平和线粒体膜电位水平显著提高(P<0.05)。结果表明,在IVC中添加SES可提高囊胚内细胞数、减少细胞凋亡率,降低细胞内ROS水平,提高细胞内GSH水平,改善早期胚胎线粒体功能,减少胚胎氧化应激的损伤,提高小鼠早期胚胎发育质量。 展开更多
关键词 小鼠 胚胎发育 芝麻素 活性氧 线粒体膜电位
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