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裂谷热病毒TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立 被引量:4
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作者 朱晓文 李林 +6 位作者 桑晓宇 高玉伟 胡桂学 冯娜 王铁成 步志高 夏咸柱 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期315-318,共4页
目的根据裂谷热病毒(Rift Valley Fever Virus,RVFV)M片段的保守序列设计并合成特异性引物和TaqMan探针,建立鉴定裂谷热病毒的TaqMan实时荧光定量PCR检测方法。方法合成裂谷热病毒M片段基因,PCR扩增后将其连入pMD18-T载体,构建重组质粒... 目的根据裂谷热病毒(Rift Valley Fever Virus,RVFV)M片段的保守序列设计并合成特异性引物和TaqMan探针,建立鉴定裂谷热病毒的TaqMan实时荧光定量PCR检测方法。方法合成裂谷热病毒M片段基因,PCR扩增后将其连入pMD18-T载体,构建重组质粒作为阳性标准品,以10倍系列稀释的标准品进行荧光定量PCR扩增,并绘制标准曲线。结果所绘制标准曲线的相关系数为0.999,该检测方法的灵敏度达40copies/μL,特异性好,对除裂谷热病毒外其他病毒(PPRV、HFV、RV、SPPV和GIPV)检测均为阴性。该方法重复性好,批内重复和批间重复的变异系数均小于1%。结论裂谷热病毒TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立为裂谷热病毒的快速准确诊断及流行病学调查提供了有效的手段。 展开更多
关键词 裂谷热病毒 实时荧光定量PCR TAQMAN探针
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两株B型流感病毒的基因组序列分析 被引量:4
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作者 岳秀芳 夏咸柱 +12 位作者 于志君 朱晓文 刘红 李硕 范宝静 王世申 吴静 武艳丽 王铁成 杨松涛 黄耕 高玉伟 胡桂学 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期267-273,共7页
目的了解两株B型流感病毒的基因组序列特征。方法对两株B型流感病毒进行全基因组序列测定和基因进化特性的分析。结果成功扩增出两株B型流感病毒的全基因组序列,并且两毒株的基因组均属于Yamagata系类似株Ⅱ系。两株病毒的基因组序列与... 目的了解两株B型流感病毒的基因组序列特征。方法对两株B型流感病毒进行全基因组序列测定和基因进化特性的分析。结果成功扩增出两株B型流感病毒的全基因组序列,并且两毒株的基因组均属于Yamagata系类似株Ⅱ系。两株病毒的基因组序列与疫苗株B/Florida/4/2006(Yamagata系)以及Victoria系代表株B/Brisbane/60/2008、B/Malay-sia/2506/2004相比,HA基因同源性为89.7%~97.3%,NB基因同源性则为95.4%~98.4%。两株病毒的HA蛋白与WHO推荐的疫苗株B/Florida/4/2006(Yamagata系)相比,存在11处氨基酸突变,其中HA的N131K氨基酸位点突变,可能对抗原性产生影响。NB的S198N氨基酸位点突变可能影响神经氨酸酶抑制剂的灵敏度。结论两株B型流感病毒的遗传进化状态稳定,但是与同分支中的毒株基因序列部分位点存在差异。 展开更多
关键词 B型流感病毒 基因序列 进化树
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A型流感病毒跨种传播和致病性相关蛋白研究进展 被引量:5
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作者 于志君 朱晓文 +10 位作者 刘红 李硕 范宝静 王世申 吴静 武艳丽 王铁成 杨松涛 黄耕 高玉伟 夏咸柱 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2011年第11期90-94,共5页
A型流感病毒是重要的人和动物病原体,每年都会在人群中引发季节性流感流行,偶尔还会引发全球流感大流行,对公共卫生安全构成严重威胁。研究发现,A型流感病毒的跨种传播与该病毒的多个蛋白有关,其中血凝素是该病毒宿主范围的主要限制因素... A型流感病毒是重要的人和动物病原体,每年都会在人群中引发季节性流感流行,偶尔还会引发全球流感大流行,对公共卫生安全构成严重威胁。研究发现,A型流感病毒的跨种传播与该病毒的多个蛋白有关,其中血凝素是该病毒宿主范围的主要限制因素,但聚合酶蛋白和非结构蛋白1(NS1)的作用也不容忽视。A型流感病毒通过不断地适应各类宿主和长期地进化,每年都能够产生大量致病性未知且具有潜在流行性的新毒株,人们经过长期地研究发现,A型流感病毒的致病性主要受该病毒的聚合酶蛋白、血凝素蛋白和非结构蛋白1(NS1)上某些特定氨基酸的影响。论文从以上几方面对A型流感病毒跨种传播和致病性分子机制的研究进展进行综述。 展开更多
关键词 A型流感病毒 跨种传播 致病性 分子机制
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水貂犬瘟热动物模型的建立 被引量:4
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作者 王胜乐 王铁成 +13 位作者 冯娜 李元果 于志君 丁洁 许薇薇 忻悦 岳秀芳 王铮 郑学星 杨松涛 黄耕 赵永坤 高玉伟 夏咸柱 《中国比较医学杂志》 CAS 2012年第11期54-58,I0003,共6页
目的建立水貂犬瘟热动物模型,并利用水貂犬瘟热模型评价不同犬瘟热强毒株的毒力,为水貂犬瘟热病毒疫苗的研究奠定基础。方法从猴、藏獒、犬的病料中分离犬瘟热病毒,测定犬瘟热病毒的毒力,并进行传代培养。利用犬的犬瘟热动物模型筛选稳... 目的建立水貂犬瘟热动物模型,并利用水貂犬瘟热模型评价不同犬瘟热强毒株的毒力,为水貂犬瘟热病毒疫苗的研究奠定基础。方法从猴、藏獒、犬的病料中分离犬瘟热病毒,测定犬瘟热病毒的毒力,并进行传代培养。利用犬的犬瘟热动物模型筛选稳定的犬瘟热强毒株,进行水貂犬瘟热动物模型的建立及其毒力评估。结果筛选出了稳定的犬瘟热强毒株并进行了家犬动物实验,同时表现出了强烈的临床症状,并利用不同的代次毒进行了犬瘟热动物模型的建立。结论成功建立了犬瘟热动物模型并对不同来源的犬瘟热病毒毒力进行了评估。 展开更多
关键词 水貂 模型 动物 毒力评估 大瘟热病毒
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不同宿主来源犬瘟热病毒的分离及致病相关基因序列分析 被引量:1
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作者 李天松 王磊 +7 位作者 王胜乐 姜雪 许微微 李元果 高玉伟 王铁成 黄耕 夏咸柱 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2012年第7期3-7,共5页
利用Vero-DST细胞从死亡犬、狐狸肺、脾内分离到4株犬瘟热病毒-CDV-TM-CC、CDV-Dog-SCh、CDV-Fox-SY、CDV-Fox-WF,在Vero-DST细胞上传5代没有细胞病变,5代细胞培养物经电镜、间接免疫荧光及PCR鉴定为阳性。与本实验室保存的CDV-Monkey-B... 利用Vero-DST细胞从死亡犬、狐狸肺、脾内分离到4株犬瘟热病毒-CDV-TM-CC、CDV-Dog-SCh、CDV-Fox-SY、CDV-Fox-WF,在Vero-DST细胞上传5代没有细胞病变,5代细胞培养物经电镜、间接免疫荧光及PCR鉴定为阳性。与本实验室保存的CDV-Monkey-BJ进行基因测序,并对与致病相关的F蛋白、V蛋白进行分析,F蛋白分析5株毒具有6个潜在N-末端糖基化位点,与强毒株同源性在92%~99.7%,与疫苗株不高于93.3%,在F1亚基内有7个特有氨基酸位点,这可能与其对灵长类致病有关。V蛋白分析表明,其与强毒株同源性在94%~99.7%之间,而与疫苗株不高于93.3%,CDV-Monkey-BJ C272R突变使其Zn结合能力丧失。试验结果显示,所有分离株均为强毒株,不同宿主毒株序列存在差异,值得进一步研究。 展开更多
关键词 犬瘟热病毒 V蛋白 F蛋白
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宠物与宠物保健品 被引量:2
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作者 夏咸柱 《中国兽药杂志》 2010年第10期6-8,19,共4页
介绍了宠物的定义与分类,宠物与人类健康的新理念,宠物福利与保健等与宠物相关的常识。重点阐述了宠物保健品特别是宠物生物制品的研发现状,并对宠物保健品的监管提出了几点建议。
关键词 宠物 宠物保健品 宠物生物制品
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犬瘟热病毒引起啮齿类动物肥胖症的机制研究进展
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作者 刘玉秀 高玉伟 +10 位作者 李天松 王磊 于志君 李林 张钊伟 朱晓文 冯娜 黄耕 杨松涛 王铁成 夏咸柱 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2010年第12期83-86,共4页
在过去的30年中,已报道8种病原体可引起人和动物的肥胖,其中犬瘟热病毒是首个报道的可引起动物肥胖症的病毒。研究发现感染犬瘟热病毒的啮齿动物后期表现为病态肥胖。早期犬瘟热病毒的复制对感染鼠下丘脑造成不可逆的损伤,感染鼠表现为... 在过去的30年中,已报道8种病原体可引起人和动物的肥胖,其中犬瘟热病毒是首个报道的可引起动物肥胖症的病毒。研究发现感染犬瘟热病毒的啮齿动物后期表现为病态肥胖。早期犬瘟热病毒的复制对感染鼠下丘脑造成不可逆的损伤,感染鼠表现为体重增加、脂肪细胞增大、体内瘦素受体表达水平下降、黑色素浓集激素前体(ppMCH)mRNA水平下降,高胰岛素血症,儿茶酚胺水平降低,这些因子与机体的食欲增强和(或)能量消耗减少有密切关系,与肥胖症的特征相一致。论文综述了有关犬瘟热病毒引起啮齿类动物肥胖症机制的研究进展。 展开更多
关键词 犬瘟热病毒 啮齿动物 肥胖症
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