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基于重测序鉴定耐盐转基因大豆事件外源T-DNA整合位点及特异性检测
被引量：
2
1
作者
魏嘉
王秀东
+3 位作者
卜显峰
马瑞
于志晶
蔡勤安
《南京农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第4期710-717,共8页
[目的]转基因大豆事件L8014是本研究前期利用农杆菌介导的大豆子叶节高效遗传转化技术体系,将来源于山菠菜的基因BADH导入大豆(Glycine max)‘Williams 82’而获得具有良好耐盐(1.5%NaCl)性状的转基因大豆(该材料已经完成环境释放试验)...
[目的]转基因大豆事件L8014是本研究前期利用农杆菌介导的大豆子叶节高效遗传转化技术体系,将来源于山菠菜的基因BADH导入大豆(Glycine max)‘Williams 82’而获得具有良好耐盐(1.5%NaCl)性状的转基因大豆(该材料已经完成环境释放试验)。T-DNA插入位点侧翼序列的获得与分析对于转基因事件的安全评价及应用非常重要,本文旨在明确该转基因大豆材料的分子特征及其检测方法,以进一步推进安全评价。[方法]利用Southern杂交检测转基因大豆外源基因的拷贝数;基于基因组重测序技术,采用BWA(Burrows-Wheeler-Alignment)方法将重测序数据与T-DNA序列以及大豆基因组序列进行比对分析。[结果]T-DNA在大豆基因组10号染色体上的基因组区间3925017—3926022位点,插入方式为反向插入;结合PCR扩增技术获得外源T-DNA整合位点的左、右边界侧翼序列,基于该序列建立了转BADH基因大豆事件L8014的特异性PCR检测方法。[结论]本研究获得了转基因事件的整合位点及侧翼序列,方法快速、结果可靠,为转基因大豆及其衍生产品的检测提供了技术支撑。
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关键词
转基因大豆
重测序
BADH基因
T-DNA侧翼序列
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职称材料
题名
基于重测序鉴定耐盐转基因大豆事件外源T-DNA整合位点及特异性检测
被引量：
2
1
作者
魏嘉
王秀东
卜显峰
马瑞
于志晶
蔡勤安
机构
吉林省
农业
科学院
农业
生物技术研究所/
吉林省
农业
生物技术重点实验室
吉林省万发农业站
吉林省
农业
技术推广总
站
出处
《南京农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第4期710-717,共8页
基金
吉林省农业科技创新工程-博士后启动基金(C92070521)
吉林省农业科技创新工程-人才基金(C92070524)
+1 种基金
国家转基因作物新品种培育重大专项(2016ZX08004002-009)
吉林省科技厅重点项目(20130206005NY)。
文摘
[目的]转基因大豆事件L8014是本研究前期利用农杆菌介导的大豆子叶节高效遗传转化技术体系,将来源于山菠菜的基因BADH导入大豆(Glycine max)‘Williams 82’而获得具有良好耐盐(1.5%NaCl)性状的转基因大豆(该材料已经完成环境释放试验)。T-DNA插入位点侧翼序列的获得与分析对于转基因事件的安全评价及应用非常重要,本文旨在明确该转基因大豆材料的分子特征及其检测方法,以进一步推进安全评价。[方法]利用Southern杂交检测转基因大豆外源基因的拷贝数;基于基因组重测序技术,采用BWA(Burrows-Wheeler-Alignment)方法将重测序数据与T-DNA序列以及大豆基因组序列进行比对分析。[结果]T-DNA在大豆基因组10号染色体上的基因组区间3925017—3926022位点,插入方式为反向插入;结合PCR扩增技术获得外源T-DNA整合位点的左、右边界侧翼序列,基于该序列建立了转BADH基因大豆事件L8014的特异性PCR检测方法。[结论]本研究获得了转基因事件的整合位点及侧翼序列,方法快速、结果可靠,为转基因大豆及其衍生产品的检测提供了技术支撑。
关键词
转基因大豆
重测序
BADH基因
T-DNA侧翼序列
Keywords
transgenic soybean
re-sequencing
BADH gene
T-DNA flanking sequence
分类号
S565.1 [农业科学—作物学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
基于重测序鉴定耐盐转基因大豆事件外源T-DNA整合位点及特异性检测
魏嘉
王秀东
卜显峰
马瑞
于志晶
蔡勤安
《南京农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2023
2
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