目的通过电融合法制备肝癌候选标志物人vasorin(VASN)蛋白单克隆抗体并进行鉴定。方法以人带组氨酸标签的VASN重组蛋白(VASN-His)免疫小鼠后进行细胞电融合,间接ELISA筛选能够结合天然VASN的阳性克隆。通过ELISA检测抗体的效价及亲和力...目的通过电融合法制备肝癌候选标志物人vasorin(VASN)蛋白单克隆抗体并进行鉴定。方法以人带组氨酸标签的VASN重组蛋白(VASN-His)免疫小鼠后进行细胞电融合,间接ELISA筛选能够结合天然VASN的阳性克隆。通过ELISA检测抗体的效价及亲和力、Western blot法检测抗体能否识别HepG2细胞中VASN蛋白。结果在脾细胞与Sp2/0细胞的比例为2∶1,交变电场场强50 V 2 MHz 20 s,直流脉冲强度500 V 0.5 s时,融合率达0.31%。获得2株小鼠抗人VASN单克隆抗体(4H1和8B9),抗体最高效价为1∶256000,亲和力最高可达到4.9×10^(6)L/mol;2株抗体均可识别HepG2细胞的VASN蛋白。结论运用细胞电融合法成功制备2株小鼠抗人VASN的单克隆抗体。展开更多
对金娃娃萱草(Hemerocallis hybridus Stella de Oro)种子苗(群体)的花茎高度、单茎花朵数、叶片长度和开花日数的变异进行了研究。结果表明,单茎花朵数变异系数最大,花茎高度和叶片长度变异系数较大,开花日数变异系数最小,种子苗单茎...对金娃娃萱草(Hemerocallis hybridus Stella de Oro)种子苗(群体)的花茎高度、单茎花朵数、叶片长度和开花日数的变异进行了研究。结果表明,单茎花朵数变异系数最大,花茎高度和叶片长度变异系数较大,开花日数变异系数最小,种子苗单茎花朵数与花茎高度明显超过母本金娃娃,通过广义遗传力计算看出,花茎高度、叶片长度和单茎花朵数的变异主要由遗传因素控制,开花日数的变异受环境因素影响较大;花茎高度与叶片长度和单茎花朵数之间存在高度相关;对种子苗进行聚类分析,共分为4个类群,从第1类到第4类花茎高度由高变矮,直至无花茎,单茎花朵数由多变少,最终无花朵;在每个类群中进行了相关性分析,第1类和第2类中,花茎高度与叶片长度呈显著相关,其余为负相关,从第1类至第4类花茎高度与单茎花朵数相关系数逐渐增大,由低度相关到高度相关。展开更多
文摘目的通过电融合法制备肝癌候选标志物人vasorin(VASN)蛋白单克隆抗体并进行鉴定。方法以人带组氨酸标签的VASN重组蛋白(VASN-His)免疫小鼠后进行细胞电融合,间接ELISA筛选能够结合天然VASN的阳性克隆。通过ELISA检测抗体的效价及亲和力、Western blot法检测抗体能否识别HepG2细胞中VASN蛋白。结果在脾细胞与Sp2/0细胞的比例为2∶1,交变电场场强50 V 2 MHz 20 s,直流脉冲强度500 V 0.5 s时,融合率达0.31%。获得2株小鼠抗人VASN单克隆抗体(4H1和8B9),抗体最高效价为1∶256000,亲和力最高可达到4.9×10^(6)L/mol;2株抗体均可识别HepG2细胞的VASN蛋白。结论运用细胞电融合法成功制备2株小鼠抗人VASN的单克隆抗体。
文摘对金娃娃萱草(Hemerocallis hybridus Stella de Oro)种子苗(群体)的花茎高度、单茎花朵数、叶片长度和开花日数的变异进行了研究。结果表明,单茎花朵数变异系数最大,花茎高度和叶片长度变异系数较大,开花日数变异系数最小,种子苗单茎花朵数与花茎高度明显超过母本金娃娃,通过广义遗传力计算看出,花茎高度、叶片长度和单茎花朵数的变异主要由遗传因素控制,开花日数的变异受环境因素影响较大;花茎高度与叶片长度和单茎花朵数之间存在高度相关;对种子苗进行聚类分析,共分为4个类群,从第1类到第4类花茎高度由高变矮,直至无花茎,单茎花朵数由多变少,最终无花朵;在每个类群中进行了相关性分析,第1类和第2类中,花茎高度与叶片长度呈显著相关,其余为负相关,从第1类至第4类花茎高度与单茎花朵数相关系数逐渐增大,由低度相关到高度相关。
