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血管内皮生长因子165b对人肝癌HepG_2细胞生物学特性的影响
被引量：
8
1
作者
赵燕颖
王秀岩
+3 位作者
秦国涛
孙远杰
刘志忠
李然伟
《吉林大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第1期101-105,共5页
目的:探讨血管内皮生长因子165b(VEGF165b)对人肝癌HepG_2细胞生物学特性的影响,并初步研究其作用机制。方法:HepG_2细胞分为空白组(仅加转染试剂)、对照组(转染阴性对照PcDNA3.0表达载体)和PcDNA-VEGF165b组(转染VEGF165b表达载体PcDNA...
目的:探讨血管内皮生长因子165b(VEGF165b)对人肝癌HepG_2细胞生物学特性的影响,并初步研究其作用机制。方法:HepG_2细胞分为空白组(仅加转染试剂)、对照组(转染阴性对照PcDNA3.0表达载体)和PcDNA-VEGF165b组(转染VEGF165b表达载体PcDNA-VEGF165b)。MTT法检测各组HepG_2细胞生存率,RT-PCR法和Western blotting法检测HepG_2细胞中VEGF165b和VEGF165 mRNA和蛋白表达水平,Transwell小室法检测HepG_2细胞迁移能力。结果:与空白组比较,对照组HepG_2细胞中VEGF165b和VEGF165mRNA和蛋白表达水平无明显变化(P>0.05)。与空白组比较,PcDNA-VEGF165b组细胞中VEGF165bmRNA和蛋白表达水平明显升高(P<0.05),VEGF165 mRNA和蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。空白组和对照组细胞生存率比较差异无统计学意义(P>0.05);与空白组和对照组比较,PcDNAVEGF165b组细胞生存率有所降低,但差异无统计学意义(P>0.05)。细胞迁移实验,空白组和对照组细胞迁移率比较差异无统计学意义(P<0.05);与空白组和对照组比较,PcDNA-VEGF165b组HepG_2细胞迁移率明显降低(P<0.05)。结论:VEGF 165b能抑制VEGF165基因和蛋白的表达,VEGF165b对肝癌细胞增殖无明显影响,但可降低肝癌细胞的迁移能力。
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关键词
肝肿瘤
HEPG2细胞
血管内皮细胞生长因子165b
血管内皮细胞生长因子165
细胞增殖
细胞迁移
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职称材料
rhKPI/AβPP大规模发酵及纯化工艺
被引量：
10
2
作者
贺巾超
杨莉莉
+4 位作者
马杰
颜波群
韩树海
侯立中
颜炜群
《吉林大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第2期278-281,共4页
目的：在毕赤酵母（Pichia pastoris）中高效表达AβPP中的Kunitz型蛋白酶抑制剂的结构域（KPI／AβPP），利用80L的发酵罐优化发酵条件，制备rhKPI／AβSPP。方法：克隆kpi基因插入到pPICZα，构建真核表达载体pPICZμ-kpi，经核酸测...
目的：在毕赤酵母（Pichia pastoris）中高效表达AβPP中的Kunitz型蛋白酶抑制剂的结构域（KPI／AβPP），利用80L的发酵罐优化发酵条件，制备rhKPI／AβSPP。方法：克隆kpi基因插入到pPICZα，构建真核表达载体pPICZμ-kpi，经核酸测序确证后，电转化毕赤酵母菌株X-33，筛选高表达rhKPI／AβPP工程菌。结果：筛选出的高表达工程菌采用80L发酵罐甲醇诱导补料批式发酵，在pH3．3、纯氧浓度22％～30％、罐内压力为12psi、甲醇诱导60h时产量1．0g·L^-1。纯化的rhKPI／AβPP经SDS-PAGE分析显示单一区带，相对分子质量6750。质谱测定其相对分子质量为6750，抑制胰蛋白酶的比活性为8．4EPU·mg^-1。结论：克隆、构建、筛选出高效表达rhKPI／AβPP的毕赤酵母工程菌，并建立了稳定的发酵和纯化工艺。
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关键词
rhKPI/AβPP
毕赤酵母
发酵
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职称材料
题名
血管内皮生长因子165b对人肝癌HepG_2细胞生物学特性的影响
被引量：
8
1
作者
赵燕颖
王秀岩
秦国涛
孙远杰
刘志忠
李然伟
机构
吉林大学第四医院消化内科
吉林大学
第二
医院
泌尿外科
出处
《吉林大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第1期101-105,共5页
基金
吉林省卫计委青年基金资助课题(2013Q024)
吉林省科技厅自然科学基金资助课题(200905139)
文摘
目的:探讨血管内皮生长因子165b(VEGF165b)对人肝癌HepG_2细胞生物学特性的影响,并初步研究其作用机制。方法:HepG_2细胞分为空白组(仅加转染试剂)、对照组(转染阴性对照PcDNA3.0表达载体)和PcDNA-VEGF165b组(转染VEGF165b表达载体PcDNA-VEGF165b)。MTT法检测各组HepG_2细胞生存率,RT-PCR法和Western blotting法检测HepG_2细胞中VEGF165b和VEGF165 mRNA和蛋白表达水平,Transwell小室法检测HepG_2细胞迁移能力。结果:与空白组比较,对照组HepG_2细胞中VEGF165b和VEGF165mRNA和蛋白表达水平无明显变化(P>0.05)。与空白组比较,PcDNA-VEGF165b组细胞中VEGF165bmRNA和蛋白表达水平明显升高(P<0.05),VEGF165 mRNA和蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。空白组和对照组细胞生存率比较差异无统计学意义(P>0.05);与空白组和对照组比较,PcDNAVEGF165b组细胞生存率有所降低,但差异无统计学意义(P>0.05)。细胞迁移实验,空白组和对照组细胞迁移率比较差异无统计学意义(P<0.05);与空白组和对照组比较,PcDNA-VEGF165b组HepG_2细胞迁移率明显降低(P<0.05)。结论:VEGF 165b能抑制VEGF165基因和蛋白的表达,VEGF165b对肝癌细胞增殖无明显影响,但可降低肝癌细胞的迁移能力。
关键词
肝肿瘤
HEPG2细胞
血管内皮细胞生长因子165b
血管内皮细胞生长因子165
细胞增殖
细胞迁移
Keywords
liver neoplasms
HepG2 cells
vascular endothelial growth factor 165b
vascular endothelial growth factor 165
cell proliferation
cell migration
分类号
R735.7 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
rhKPI/AβPP大规模发酵及纯化工艺
被引量：
10
2
作者
贺巾超
杨莉莉
马杰
颜波群
韩树海
侯立中
颜炜群
机构
吉林大学
再生医学科学研究所生物化学研究室
吉林大学第四医院消化内科
出处
《吉林大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第2期278-281,共4页
基金
国家高技术研究发展计划(863计划)资助课题(2004AA205020)
文摘
目的：在毕赤酵母（Pichia pastoris）中高效表达AβPP中的Kunitz型蛋白酶抑制剂的结构域（KPI／AβPP），利用80L的发酵罐优化发酵条件，制备rhKPI／AβSPP。方法：克隆kpi基因插入到pPICZα，构建真核表达载体pPICZμ-kpi，经核酸测序确证后，电转化毕赤酵母菌株X-33，筛选高表达rhKPI／AβPP工程菌。结果：筛选出的高表达工程菌采用80L发酵罐甲醇诱导补料批式发酵，在pH3．3、纯氧浓度22％～30％、罐内压力为12psi、甲醇诱导60h时产量1．0g·L^-1。纯化的rhKPI／AβPP经SDS-PAGE分析显示单一区带，相对分子质量6750。质谱测定其相对分子质量为6750，抑制胰蛋白酶的比活性为8．4EPU·mg^-1。结论：克隆、构建、筛选出高效表达rhKPI／AβPP的毕赤酵母工程菌，并建立了稳定的发酵和纯化工艺。
关键词
rhKPI/AβPP
毕赤酵母
发酵
Keywords
rhKPI/AβPP
Pichia
fermentation
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
血管内皮生长因子165b对人肝癌HepG_2细胞生物学特性的影响
赵燕颖
王秀岩
秦国涛
孙远杰
刘志忠
李然伟
《吉林大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2018
8
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
rhKPI/AβPP大规模发酵及纯化工艺
贺巾超
杨莉莉
马杰
颜波群
韩树海
侯立中
颜炜群
《吉林大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2006
10
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