目的 :克隆小鼠分泌型 Hemopexin(s PEX)编码区的 c DNA序列 ,构建含 Egr- 1启动子的 p Egr- s PEX真核表达载体 ,检测辐射诱导重组质粒在 B16 F10细胞中的表达。方法 :用 RT- PCR从 NIH3T3细胞中扩增出s PEX,经测序证实后 ,构建 p Egr-...目的 :克隆小鼠分泌型 Hemopexin(s PEX)编码区的 c DNA序列 ,构建含 Egr- 1启动子的 p Egr- s PEX真核表达载体 ,检测辐射诱导重组质粒在 B16 F10细胞中的表达。方法 :用 RT- PCR从 NIH3T3细胞中扩增出s PEX,经测序证实后 ,构建 p Egr- s PEX重组质粒 ,以脂质体转染 B16 F10细胞 ,用 Western blotting方法检测B16 F10细胞上清中辐射诱导 PEX的表达。结果 :测序表明扩增的 s PEX c DNA序列与 Gen Bank中登录的序列完全一致 ,s PEX c DNA正确插入表达载体 pc DNA3.1- Egr- 1,转染入 B16 F10细胞内 PEX基因在体外辐射诱导下成功获得表达。结论 :成功地克隆了小鼠 s PEX基因 ,并在体外证实了 p Egr- s PEX具有辐射诱导表达特性。展开更多
文摘目的 :克隆小鼠分泌型 Hemopexin(s PEX)编码区的 c DNA序列 ,构建含 Egr- 1启动子的 p Egr- s PEX真核表达载体 ,检测辐射诱导重组质粒在 B16 F10细胞中的表达。方法 :用 RT- PCR从 NIH3T3细胞中扩增出s PEX,经测序证实后 ,构建 p Egr- s PEX重组质粒 ,以脂质体转染 B16 F10细胞 ,用 Western blotting方法检测B16 F10细胞上清中辐射诱导 PEX的表达。结果 :测序表明扩增的 s PEX c DNA序列与 Gen Bank中登录的序列完全一致 ,s PEX c DNA正确插入表达载体 pc DNA3.1- Egr- 1,转染入 B16 F10细胞内 PEX基因在体外辐射诱导下成功获得表达。结论 :成功地克隆了小鼠 s PEX基因 ,并在体外证实了 p Egr- s PEX具有辐射诱导表达特性。
