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利用单细胞转录组揭示牛窦卵泡发育微环境异质性及动态调控网络
1
作者
田甜
徐鸿
+6 位作者
贾海涛
王琛
刘莹
梁婧虹
张雨晴
袁宝
姜昊
《浙江大学学报(农业与生命科学版)》
北大核心
2025年第5期722-733,共12页
窦卵泡发育调控涉及多层机制,其研究受制于对卵泡真实的微环境及关键分子事件的低效捕捉。本研究利用单细胞RNA测序(single-cell RNA sequencing,scRNA-seq)技术,绘制了常用牛体外胚胎生产的3~8 mm卵泡单细胞图谱,并探讨了卵泡细胞异质...
窦卵泡发育调控涉及多层机制,其研究受制于对卵泡真实的微环境及关键分子事件的低效捕捉。本研究利用单细胞RNA测序(single-cell RNA sequencing,scRNA-seq)技术,绘制了常用牛体外胚胎生产的3~8 mm卵泡单细胞图谱,并探讨了卵泡细胞异质性、差异表达基因、细胞发育分化轨迹及细胞通信等分子特征。结果表明:颗粒细胞、基质细胞、卵泡膜细胞、平滑肌细胞、内皮细胞和免疫细胞6种细胞[细胞标志物分别为抗米勒管激素(anti-Müllerian hormone,AMH)、核心蛋白聚糖(decorin,DCN)、类固醇生成急性调节蛋白(steroidogenic acute regulatory protein,STAR)、ACTA2(actin alpha 2,smooth muscle)、血管性血友病因子(von Willebrand factor,VWF)、CD14]参与构成牛窦卵泡微环境,其中颗粒细胞是驱动窦卵泡发育的关键细胞类群。颗粒细胞的4个亚群[细胞标志物分别为细胞色素P450家族19亚家族A成员1(cytochrome P450 family 19 subfamily A member 1,CYP19A1)、POU类5同源框1(POU class 5 homeobox 1,POU5F1)、着丝粒蛋白F(centromere protein F,CENPF)、成纤维细胞生长因子10(fibroblast growth factor 10,FGF10)]高度异质,并呈现出“信号转导→转录调控→增殖分裂→功能成熟”的分化轨迹,协同抑制素/抑制素βA(inhibin/inhibin beta A,INH/INHBA)及其他免疫调节通路的激活,重塑牛卵泡发育微环境并驱动卵泡选择程序的开启。此外,在单细胞水平上提供了卵泡膜细胞内外层结构分化路径和淋巴内皮细胞存在的分子证据。本研究结果为深入解析牛窦卵泡发育调控机制及优化牛体内外胚胎生产技术体系提供了新视角。
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关键词
卵泡发育
单细胞转录组学
细胞异质性
颗粒细胞
卵泡微环境
牛
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职称材料
睾酮在体外对人卵巢颗粒细胞SVOG凋亡的影响及其内质网应激机制
2
作者
仝晓丽
范明慧
+2 位作者
孟娇
朱继红
盛敏佳
《吉林大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第5期1154-1160,共7页
目的:探讨睾酮在体外对颗粒细胞凋亡的诱导作用,并阐明其作用机制。方法:噻唑蓝(MTT)比色法检测人卵巢颗粒细胞SVOG的细胞增殖抑制率,筛选最佳药物作用浓度后,将SVOG细胞分为对照组、睾酮组(1.0×10^(-5)mol·L^(-1)睾酮)、睾酮...
目的:探讨睾酮在体外对颗粒细胞凋亡的诱导作用,并阐明其作用机制。方法:噻唑蓝(MTT)比色法检测人卵巢颗粒细胞SVOG的细胞增殖抑制率,筛选最佳药物作用浓度后,将SVOG细胞分为对照组、睾酮组(1.0×10^(-5)mol·L^(-1)睾酮)、睾酮+氟他胺组(1.0×10^(-5)mol·L^(-1)睾酮+1.0×10^(-5)mol·L^(-1)氟他胺)、睾酮+牛磺熊去氧胆酸(TUDCA)组(1.0×10^(-5)mol·L^(-1)睾酮+1.5 g·L^(-1)TUDCA)。采用实时荧光定量PCR (RT-qPCR)法检测各组SVOG细胞中剪切型X盒结合蛋白1(XBP1s)、激活转录因子4 (ATF4)、转录因子C/EBP同源蛋白(CHOP)和死亡受体5(DR5)mRNA表达水平,流式细胞术检测各组SVOG细胞凋亡率。结果:与对照组比较,睾酮组SVOG细胞形态改变,异型细胞增多,胞质中出现较多颗粒,培养基中细胞碎片增多,SVOG细胞增殖抑制率升高(P<0.05);与睾酮组比较,睾酮+氟他胺组和睾酮+TUDCA组SVOG细胞形态变化减少,细胞增殖抑制率降低(P<0.05);流式细胞术,与对照组比较,睾酮组SVOG细胞凋亡率升高(P<0.05);与睾酮组比较,睾酮+氟他胺组和睾酮+TUDCA组SVOG细胞凋亡率降低(P<0.05)。RT-qPCR法,作用48 h后,与对照组比较,睾酮组SVOG细胞中XBP1s、ATF4、CHOP和DR5 mRNA表达水平均明显升高(P<0.05);与睾酮组比较,睾酮+氟他胺组和睾酮+TUDCA组SVOG细胞中XBP1s、ATF4、CHOP和DR5 mRNA表达水平降低(P<0.05)。结论:睾酮可诱导人卵巢颗粒细胞凋亡并引起卵泡闭锁,其作用机制可能是雄激素与雄激素受体(AR)结合激活CHOP-DR5通路,诱导内质网应激(ERS)发生,促进颗粒细胞凋亡。
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关键词
睾酮
颗粒细胞
内质网应激
雄激素受体
转录因子C/EBP同源蛋白
死亡受体5
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职称材料
题名
利用单细胞转录组揭示牛窦卵泡发育微环境异质性及动态调控网络
1
作者
田甜
徐鸿
贾海涛
王琛
刘莹
梁婧虹
张雨晴
袁宝
姜昊
机构
吉林大学
动物科学学院
吉林大学
第一
医院
生殖
医学
中心
•产前
诊断
中心
出处
《浙江大学学报(农业与生命科学版)》
北大核心
2025年第5期722-733,共12页
基金
国家重点研发计划项目(2023YFD1300501)
国家肉牛产业技术体系专项资金项目(CARS-37)。
文摘
窦卵泡发育调控涉及多层机制,其研究受制于对卵泡真实的微环境及关键分子事件的低效捕捉。本研究利用单细胞RNA测序(single-cell RNA sequencing,scRNA-seq)技术,绘制了常用牛体外胚胎生产的3~8 mm卵泡单细胞图谱,并探讨了卵泡细胞异质性、差异表达基因、细胞发育分化轨迹及细胞通信等分子特征。结果表明:颗粒细胞、基质细胞、卵泡膜细胞、平滑肌细胞、内皮细胞和免疫细胞6种细胞[细胞标志物分别为抗米勒管激素(anti-Müllerian hormone,AMH)、核心蛋白聚糖(decorin,DCN)、类固醇生成急性调节蛋白(steroidogenic acute regulatory protein,STAR)、ACTA2(actin alpha 2,smooth muscle)、血管性血友病因子(von Willebrand factor,VWF)、CD14]参与构成牛窦卵泡微环境,其中颗粒细胞是驱动窦卵泡发育的关键细胞类群。颗粒细胞的4个亚群[细胞标志物分别为细胞色素P450家族19亚家族A成员1(cytochrome P450 family 19 subfamily A member 1,CYP19A1)、POU类5同源框1(POU class 5 homeobox 1,POU5F1)、着丝粒蛋白F(centromere protein F,CENPF)、成纤维细胞生长因子10(fibroblast growth factor 10,FGF10)]高度异质,并呈现出“信号转导→转录调控→增殖分裂→功能成熟”的分化轨迹,协同抑制素/抑制素βA(inhibin/inhibin beta A,INH/INHBA)及其他免疫调节通路的激活,重塑牛卵泡发育微环境并驱动卵泡选择程序的开启。此外,在单细胞水平上提供了卵泡膜细胞内外层结构分化路径和淋巴内皮细胞存在的分子证据。本研究结果为深入解析牛窦卵泡发育调控机制及优化牛体内外胚胎生产技术体系提供了新视角。
关键词
卵泡发育
单细胞转录组学
细胞异质性
颗粒细胞
卵泡微环境
牛
Keywords
follicular development
single-cell transcriptomics
cellular heterogeneity
granulosa cells
follicular microenvironment
bovine
分类号
S823.9 [农业科学—畜牧学]
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职称材料
题名
睾酮在体外对人卵巢颗粒细胞SVOG凋亡的影响及其内质网应激机制
2
作者
仝晓丽
范明慧
孟娇
朱继红
盛敏佳
机构
吉林大学
中日联谊
医院
生殖
医学
中心
山西省临汾市
中心
医院
生殖
健康与不孕不育科
吉林大学第一医院生殖医学•产前诊断中心
出处
《吉林大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第5期1154-1160,共7页
基金
吴阶平医学基金会专项项目(320.6750.2021-19-1)
吉林省教育厅科学技术研究项目一般项目(JJKH20211200KJ)
吉林省财政厅科研项目(JLSWSRCZX2020-062)。
文摘
目的:探讨睾酮在体外对颗粒细胞凋亡的诱导作用,并阐明其作用机制。方法:噻唑蓝(MTT)比色法检测人卵巢颗粒细胞SVOG的细胞增殖抑制率,筛选最佳药物作用浓度后,将SVOG细胞分为对照组、睾酮组(1.0×10^(-5)mol·L^(-1)睾酮)、睾酮+氟他胺组(1.0×10^(-5)mol·L^(-1)睾酮+1.0×10^(-5)mol·L^(-1)氟他胺)、睾酮+牛磺熊去氧胆酸(TUDCA)组(1.0×10^(-5)mol·L^(-1)睾酮+1.5 g·L^(-1)TUDCA)。采用实时荧光定量PCR (RT-qPCR)法检测各组SVOG细胞中剪切型X盒结合蛋白1(XBP1s)、激活转录因子4 (ATF4)、转录因子C/EBP同源蛋白(CHOP)和死亡受体5(DR5)mRNA表达水平,流式细胞术检测各组SVOG细胞凋亡率。结果:与对照组比较,睾酮组SVOG细胞形态改变,异型细胞增多,胞质中出现较多颗粒,培养基中细胞碎片增多,SVOG细胞增殖抑制率升高(P<0.05);与睾酮组比较,睾酮+氟他胺组和睾酮+TUDCA组SVOG细胞形态变化减少,细胞增殖抑制率降低(P<0.05);流式细胞术,与对照组比较,睾酮组SVOG细胞凋亡率升高(P<0.05);与睾酮组比较,睾酮+氟他胺组和睾酮+TUDCA组SVOG细胞凋亡率降低(P<0.05)。RT-qPCR法,作用48 h后,与对照组比较,睾酮组SVOG细胞中XBP1s、ATF4、CHOP和DR5 mRNA表达水平均明显升高(P<0.05);与睾酮组比较,睾酮+氟他胺组和睾酮+TUDCA组SVOG细胞中XBP1s、ATF4、CHOP和DR5 mRNA表达水平降低(P<0.05)。结论:睾酮可诱导人卵巢颗粒细胞凋亡并引起卵泡闭锁,其作用机制可能是雄激素与雄激素受体(AR)结合激活CHOP-DR5通路,诱导内质网应激(ERS)发生,促进颗粒细胞凋亡。
关键词
睾酮
颗粒细胞
内质网应激
雄激素受体
转录因子C/EBP同源蛋白
死亡受体5
Keywords
Testosterone
Granulosa cells
Endoplasmic reticulum stress
Androgen receptor
Transcription factor C/EBP homologous protein
Death receptor 5
分类号
R711.75 [医药卫生—妇产科学]
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1
利用单细胞转录组揭示牛窦卵泡发育微环境异质性及动态调控网络
田甜
徐鸿
贾海涛
王琛
刘莹
梁婧虹
张雨晴
袁宝
姜昊
《浙江大学学报(农业与生命科学版)》
北大核心
2025
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2
睾酮在体外对人卵巢颗粒细胞SVOG凋亡的影响及其内质网应激机制
仝晓丽
范明慧
孟娇
朱继红
盛敏佳
《吉林大学学报（医学版）》
CAS
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