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DHEA抑制大鼠转移性Morris肝癌的实验研究 被引量:5
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作者 姜艳芳 谭岩 +4 位作者 赵平伟 刘力华 方艳秋 段秀梅 松崎静司 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期860-864,共5页
目的 :探讨去氢表雄酮 (DHEA)的体内抗癌作用及其机制。方法 :Buffalo大鼠 2 1只随机分为空白对照组 (n=5 ) ;肿瘤对照组 (把 Morris肝细胞瘤移植到大鼠的两肋皮下 ,建立 Morris肝细胞瘤移植的 Buffalo大鼠的体内模型 ) ,喂养基础饲料 (... 目的 :探讨去氢表雄酮 (DHEA)的体内抗癌作用及其机制。方法 :Buffalo大鼠 2 1只随机分为空白对照组 (n=5 ) ;肿瘤对照组 (把 Morris肝细胞瘤移植到大鼠的两肋皮下 ,建立 Morris肝细胞瘤移植的 Buffalo大鼠的体内模型 ) ,喂养基础饲料 (n=6 )、DHEA肿瘤组 (建立 Morris肝细胞瘤移植模型后 ,在喂养的基础饲料中添加 DHEA) (n=6 )和去氢表雄酮硫酸酯 (DHEA- s)肿瘤组 (建立 Morris肝细胞瘤移植模型后 ,在喂养的基础饲料中添加 DHEA - s) (n=4 )。分别喂养 4周后 ,应用流式细胞术检测大鼠的免疫功能 ,应用磁场型高分解能质量分析仪 (GC/ MS)方法测定大鼠体内类固醇的含量 ,采用免疫组化方法染色检测磷酸化的磷酸酶和张力蛋白同源物基因 (PTEN )蛋白表达 ,同时测定其对大鼠的毒副作用。结果 :DHEA肿瘤组的瘤重量 [(8.31± 0 .6 1) g]较肿瘤对照组 [(14 .5 7± 0 .5 6 ) g]显著减小 ,抑制率达到 4 3%。免疫组织化学染色显示 DHEA肿瘤组的磷酸化PTEN蛋白表达量增加 ,同时提高了 CD3、CD4阳性细胞百分率及 CD4 + / CD8+比值 ,与肿瘤对照组相比差异有显著性 (P<0 .0 5 )。 DHEA肿瘤组的胆固醇、甘油三脂及高密度脂蛋白的含量与空白对照组相比差异无显著性 ,未见其有毒副作用。结论 :DHEA对肿瘤具有明显的抑制作? 展开更多
关键词 去氢表雄酮 肝肿瘤 基因 肿瘤抑制 磷酸酶和张力蛋白同源物基因
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应用微囊化转基因细胞进行小鼠腹腔移植的实验研究 被引量:4
2
作者 熊伟 谭岩 +4 位作者 徐立 方艳秋 段秀梅 宋燕 杨广民 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第7期480-483,共4页
目的:探讨微囊化转基因细胞用于异体细胞移植治疗的可能性。方法:使用静电液滴技术制备海藻酸钠-壳聚糖微胶囊,包埋转入癌胚抗原部分基因的人成纤维样骨髓基质细胞,进行实验小鼠腹腔移植。结果:微囊化人源细胞移植到小鼠腹腔3个月内,细... 目的:探讨微囊化转基因细胞用于异体细胞移植治疗的可能性。方法:使用静电液滴技术制备海藻酸钠-壳聚糖微胶囊,包埋转入癌胚抗原部分基因的人成纤维样骨髓基质细胞,进行实验小鼠腹腔移植。结果:微囊化人源细胞移植到小鼠腹腔3个月内,细胞可以继续生长、增殖并提高小鼠的兔疫功能。结论:海藻酸钠-壳聚糖作为成囊材料具有良好的生物相容性、囊膜强度和免疫隔离作用;微囊化细胞移植有助于扩大异体移植的细胞来源,并为构建微囊化转基因细胞疫苗治疗恶性肿瘤的研究提供了可靠的依据。 展开更多
关键词 微囊化转基因细胞 异体细胞移植 免疫隔离 静电液滴技术 海藻酸钠-壳聚糖 肿瘤免疫治疗
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体外培养系统中IL-18诱导的快速肿瘤杀伤效应影响因素的研究 被引量:2
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作者 方艳秋 谭岩 +4 位作者 刘立华 宋燕 张雪松 段秀梅 姜艳芳 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第12期830-833,共4页
目的 :应用rhIL 18在体外培养系统 (Coculturesysteminvitro ,CCs)中诱导快速肿瘤杀伤效应 ,并对这种快速杀伤效应的影响因素进行了探讨。方法 :采用StemSepTM 免疫磁性细胞分离法分离人外周血NK细胞、T细胞及树突状细胞 (DCs) ,流式细... 目的 :应用rhIL 18在体外培养系统 (Coculturesysteminvitro ,CCs)中诱导快速肿瘤杀伤效应 ,并对这种快速杀伤效应的影响因素进行了探讨。方法 :采用StemSepTM 免疫磁性细胞分离法分离人外周血NK细胞、T细胞及树突状细胞 (DCs) ,流式细胞仪分析细胞表型 ,1 2 5I UdR标记的细胞毒实验检测杀伤活性。结果 :rhIL 18在CCs中能够诱导快速肿瘤杀伤效应 ,这种杀伤效应与rhIL 18含量呈剂量依赖关系 ,DCs和T细胞的存在与否对这种杀伤效应无明显影响 ,同时这种快速杀伤效应无抗原特异性、不受MHC的限制。结论 :在体外培养系统中只要有rhIL 18和NK细胞的存在 ,即能产生对肿瘤细胞的快速杀伤效应 ,即这种快速杀伤效应细胞为NK细胞。 展开更多
关键词 体外培养系统 IL-18 NK细胞 MHC 肿瘤杀伤效应
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β_2-GPI与细胞凋亡的关系研究
4
作者 姜艳芳 谭岩 +5 位作者 刘桂英 方艳秋 徐立 刘力华 段秀梅 许淑芬 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期128-132,共5页
目的:探讨β2-糖蛋白-Ⅰ(β2-GPI)与凋亡细胞的结合是否通过磷脂酰丝氨酸(PS)。方法:采用UV照射的方法,诱导K562细胞凋亡,应用碘化丙啶、梯状电泳和β2-GPI检测细胞凋亡。采用β2-GPI与Annexin V的竞争实验来检测β2-GPI是否通过PS与凋... 目的:探讨β2-糖蛋白-Ⅰ(β2-GPI)与凋亡细胞的结合是否通过磷脂酰丝氨酸(PS)。方法:采用UV照射的方法,诱导K562细胞凋亡,应用碘化丙啶、梯状电泳和β2-GPI检测细胞凋亡。采用β2-GPI与Annexin V的竞争实验来检测β2-GPI是否通过PS与凋亡细胞结合。结果:随着UV照射时间延长,K562细胞的凋亡率增加,在照射300秒时,凋亡细胞达到51.01%(47.23%±4.41%),DNA出现明显的片段化。rGFP连接的β2-GPI,与凋亡细胞结合,β2-GPI可以有效地检测细胞凋亡,而且与Annexin V竞争同一结合位点,即PS。4℃时β2-GPI与晚期凋亡细胞的结合高于37℃,而且随着时间延长,与凋亡细胞的结合均降低。结论:通过β2-GPI与Annexin V的竞争抑制实验第一次为“β2-GPI通过PS与凋亡细胞结合”这一推断提供直接的实验证据,第一次证实β2-GPI既可以与早期凋亡细胞结合,也可以与晚期凋亡细胞结合,rGFP-hβ2-GPI可以作为新的检测细胞凋亡的试剂应用。 展开更多
关键词 β2-糖蛋白-Ⅰ ANNEXIN V 细胞凋亡 磷脂酰丝氨酸
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MAGE-1基因疫苗的构建及其免疫学活性的研究 被引量:1
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作者 太京华 谭宪秋 +5 位作者 谭岩 时阳 刘力华 方艳秋 段秀梅 姜艳芳 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第12期894-898,共5页
目的制备MAGE-1基因疫苗,观察该疫苗诱导小鼠脾脏的抗原特异性细胞毒性T淋巴细胞CTL活性及产生特异性抗体的影响。方法应用基因重组技术,构建基因疫苗pcMAGE-1;转染HEK293细胞;RT-PCR及Western blot检测MAGE-1mRNA及蛋白的表达;pcMAGE-... 目的制备MAGE-1基因疫苗,观察该疫苗诱导小鼠脾脏的抗原特异性细胞毒性T淋巴细胞CTL活性及产生特异性抗体的影响。方法应用基因重组技术,构建基因疫苗pcMAGE-1;转染HEK293细胞;RT-PCR及Western blot检测MAGE-1mRNA及蛋白的表达;pcMAGE-1免疫3次BALB/c小鼠,末次免疫后7日收集血清及脾细胞。流式细胞术检测血清中抗MA-GE-1多抗的产生,MTT法检测小鼠CTL杀伤活性。结果构建的pcMAGE-1转染HEK293细胞,RT-PCR表明在mRNA水平有MAGE-1的表达;Western blot显示表达产物46kD,与预期一致。基因疫苗免疫组小鼠血清MAGE-1抗体的产生增加,与SMMC-7721结合率显著高于对照组(P<0.05)。杀伤实验结果显示,免疫组小鼠脾细胞对SMMC-7721的杀伤率明显高于两个对照组(P<0.05)。结论成功地构建了MAGE-1基因疫苗,该疫苗能够有效地诱导特异性免疫应答。 展开更多
关键词 基因疫苗 MAGE-1 细胞亚群 特异性抗体 CTL
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重组分泌型人PSP94对前列腺癌细胞株PC-3抑制作用的研究
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作者 郭丛慧 田长生 +5 位作者 赵丹 高瑞娟 谭岩 姜艳芳 狄茜 赵雪俭 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2002年第2期94-97,共4页
目的:探讨重组分泌型人PSP94(rsHPSP94)对雄激素非依赖性前列腺癌细胞株PC-3生长的作用和作用机制。方法:采用噻唑蓝(MTT)法检测rsHPSP94对PC-3的抑制率。流式细胞仪检测细胞周期分布的变化。结果:rsHPSP94以剂量和时间依赖性抑制PC-3... 目的:探讨重组分泌型人PSP94(rsHPSP94)对雄激素非依赖性前列腺癌细胞株PC-3生长的作用和作用机制。方法:采用噻唑蓝(MTT)法检测rsHPSP94对PC-3的抑制率。流式细胞仪检测细胞周期分布的变化。结果:rsHPSP94以剂量和时间依赖性抑制PC-3的增殖,流式细胞仪分析表明细胞增殖阻滞在G_1期,并出现凋亡。结论:本实验结果表明rsHPSP94通过使细胞阻滞在G_1期抑制PC-3细胞的增殖。 展开更多
关键词 重组分泌型人PSP94 前列腺癌 PC-3 抑制作用 抗肿瘤 前列腺分泌蛋白
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流式细胞术检测细胞毒方法的建立 被引量:14
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作者 王晓祺 谭岩 +5 位作者 段秀梅 刘玲丽 方艳秋 姜艳芳 许淑芬 刘力华 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第10期704-707,共4页
目的 :建立一种用流式细胞仪测定细胞介导细胞毒活性的方法。方法 :用羧基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺酯(CFSE)标记靶细胞 ,再用碘化丙碇 (PI)标记DNA筛选细胞膜已破坏的靶细胞。效靶比为 10 0∶1~ 6 2 5∶1,共孵育时间为 1~ 6小时 ,... 目的 :建立一种用流式细胞仪测定细胞介导细胞毒活性的方法。方法 :用羧基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺酯(CFSE)标记靶细胞 ,再用碘化丙碇 (PI)标记DNA筛选细胞膜已破坏的靶细胞。效靶比为 10 0∶1~ 6 2 5∶1,共孵育时间为 1~ 6小时 ,流式细胞仪收集 10 0 0个靶细胞并测定被杀细胞的百分率。结果 :CFSE是合适的标记靶细胞的荧光染料 ,18小时后也能很好地区分效靶细胞 ;靶细胞的自然死亡率低于 5 % ;杀伤百分率随着效靶比和共孵育时间的增加而增加。最佳效靶比为5 0∶1~ 2 5∶1,共孵育时间为 2~ 4小时。结论 :CFSE PI双荧光染料标记的流式细胞分析检测细胞毒具有多个优点 :避免放射性试剂的应用 ,敏感性增强 ,单细胞水平的分析。 展开更多
关键词 靶细胞 细胞毒 CFSE 流式细胞仪 流式细胞术 标记 孵育 百分率 自然死亡 筛选
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氨基胍对内毒素休克大鼠肝脏功能的保护作用 被引量:2
8
作者 宋燕 宋文哲 谭岩 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期602-605,共4页
目的 :探讨诱导型一氧化氮合酶 ( i NOS)抑制剂氨基胍 ( AG)对内毒素休克时肝损伤的治疗作用。方法 :雄性 Wistar大鼠 32只 ,随机分为正常对照组、内毒素对照组、去甲肾上腺素治疗组和氨基胍治疗组 ,每组各 8只。用大肠杆菌内毒素 ( LPS... 目的 :探讨诱导型一氧化氮合酶 ( i NOS)抑制剂氨基胍 ( AG)对内毒素休克时肝损伤的治疗作用。方法 :雄性 Wistar大鼠 32只 ,随机分为正常对照组、内毒素对照组、去甲肾上腺素治疗组和氨基胍治疗组 ,每组各 8只。用大肠杆菌内毒素 ( LPS)复制大鼠内毒素性休克模型 ,分别给予去甲肾上腺素 ( NA)和 AG治疗 ,观察各组平均动脉压 ( MAP)、心率 ( HR)及肝脏功能的变化。结果 :AG( 2 0 mg.kg-1)能使血压在 5 0 min后恢复至基础水平 ,并且能够减轻内毒素血症导致的血浆 GOT和 GPT水平增高。结论 展开更多
关键词 内毒素性休克 一氧化氮 氨基胍 肝损伤 大鼠
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β_2-糖蛋白1与川崎病患儿血小板结合水平测定及意义 被引量:1
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作者 刘桂英 谭岩 +1 位作者 段秀梅 姜艳芳 《临床儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期383-384,共2页
目的了解β2_糖蛋白1与川崎病患儿血小板结合水平,分析其在川崎病发病机制中的作用。方法应用流式细胞技术检测和分析29例川崎病患儿血小板与β2_糖蛋白1结合水平。结果29例川崎病患儿血小板与β2_糖蛋白1结合水平明显升高,与正常儿童... 目的了解β2_糖蛋白1与川崎病患儿血小板结合水平,分析其在川崎病发病机制中的作用。方法应用流式细胞技术检测和分析29例川崎病患儿血小板与β2_糖蛋白1结合水平。结果29例川崎病患儿血小板与β2_糖蛋白1结合水平明显升高,与正常儿童比较差异有显著性(P<0.001);17例合并冠状动脉扩张,其血小板与β2_糖蛋白1结合水平与未合并冠状动脉扩张者比较差异有统计学意义(P<0.001)。结论β2_糖蛋白1与血小板的大量结合可能是导致川崎病高凝状态、血管炎发生的重要机制之一,可作为冠状动脉病变的指标,为预防和及早治疗冠状动脉病变提供依据;血小板活化是川崎病发病机制中重要环节。 展开更多
关键词 川崎病 血小板 β2-糖蛋白1 流式细胞技术
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