维生素K_3通过下调mTOR信号途径而诱导HeLa细胞自噬 被引量：11

1

作者 于春艳 李洪岩 +3 位作者 钟加滕 康劲松 张勇 孙连坤 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第9期1173-1176,共4页

目的观察VitK3(维生素K3,vitaminK3)对HeLa细胞损伤过程中的自噬相关蛋白Beclin1、LC3-Ⅱ表达的影响。方法以HeLa细胞为研究对象,采用MTT检测细胞存活率,用Western blot方法检测自噬相关蛋白Beclin1、LC3-Ⅱ表达的变化和蛋白激酶B(PKB,A... 目的观察VitK3(维生素K3,vitaminK3)对HeLa细胞损伤过程中的自噬相关蛋白Beclin1、LC3-Ⅱ表达的影响。方法以HeLa细胞为研究对象,采用MTT检测细胞存活率,用Western blot方法检测自噬相关蛋白Beclin1、LC3-Ⅱ表达的变化和蛋白激酶B(PKB,Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、磷酸化-Akt/mTOR表达的变化。结果30μmol·L-1剂量以上的VitK3可明显抑制HeLa细胞的增殖(P<0.05)。VitK3作用12h后增加Beclin1和LC3-Ⅱ的蛋白表达水平(P<0.05),降低磷酸化的Akt/mTOR的蛋白表达水平(P<0.05)。结论VitK3能明显抑制HeLa细胞增殖并具有诱导HeLa细胞发生自噬的作用,其机制可能与下调mTOR信号有关。 展开更多

关键词 维生素K3 自噬 BECLIN1 LC3 Akt MTOR HeLa细胞

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缺糖缺氧对经内质网应激途径诱导Hela细胞凋亡的影响 被引量：6

2

作者 徐冶 钟加滕 +4 位作者 李晓宁 于慧美 康劲松 苏静 孙连坤 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期821-824,I0002,共5页

目的:体外构建肿瘤细胞缺糖缺氧(OGD)模型,观察缺糖缺氧应激条件对肿瘤细胞凋亡的影响及其机制。方法:利用平衡盐溶液EBSS取代细胞正常培养液构建缺糖模型,利用连二亚硫酸钠消耗培养基中氧构建缺氧模型;实验分为对照组、缺糖缺氧4、8和1... 目的:体外构建肿瘤细胞缺糖缺氧(OGD)模型,观察缺糖缺氧应激条件对肿瘤细胞凋亡的影响及其机制。方法:利用平衡盐溶液EBSS取代细胞正常培养液构建缺糖模型,利用连二亚硫酸钠消耗培养基中氧构建缺氧模型;实验分为对照组、缺糖缺氧4、8和12 h组。MTT法检测各组细胞增殖率;Western blotting检测各组Hela细胞内质网应激和凋亡相关蛋白的表达水平;Hoechst染色检测各组细胞细胞核形态学改变。结果:与对照组比较,缺糖缺氧各组细胞增殖率明显下降(P<0.05);内质网应激相关蛋白GRP78表达水平明显升高,内质网应激相关凋亡信号蛋白CHOP和caspase-4活化片段蛋白表达水平明显升高(P<0.05);细胞内凋亡相关蛋白caspase-3活化片段表达水平(P<0.05);缺糖缺氧组细胞核出现核皱缩和核碎裂等凋亡形态学表现。结论:缺糖缺氧可以诱导Hela细胞发生凋亡,其凋亡可能是通过内质网应激介导。 展开更多

关键词 缺糖缺氧 内质网应激 凋亡 HELA细胞

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抑制ClC-3表达对顺铂诱导人卵巢癌SKOV3/DDP细胞凋亡的促进作用 被引量：6

3

作者 于春艳 韩命龙 +2 位作者 钟加滕 孙连坤 刘玉和 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期1106-1109,共4页

目的:探讨抑制氯离子通道-3(ClC-3)基因表达对顺铂(DDP)诱导的人卵巢癌SKOV3/DDP细胞凋亡的促进作用,为卵巢癌的治疗提供实验依据。方法:转染pSH1-siRNA-ClC-3重组质粒至人卵巢癌SKOV3/DDP细胞,Western blotting方法检测转染重组质粒对C... 目的:探讨抑制氯离子通道-3(ClC-3)基因表达对顺铂(DDP)诱导的人卵巢癌SKOV3/DDP细胞凋亡的促进作用,为卵巢癌的治疗提供实验依据。方法:转染pSH1-siRNA-ClC-3重组质粒至人卵巢癌SKOV3/DDP细胞,Western blotting方法检测转染重组质粒对ClC-3蛋白表达的影响;MTT法检测细胞增殖率;Western blotting方法检测凋亡相关蛋白细胞色素C(Cyt-c)及Caspase-3活化片段蛋白表达。结果:与SKOV3细胞比较,SKOV3/DDP细胞中ClC-3蛋白表达水平增加(P<0.05);转染pSH1-siRNA-ClC-3重组质粒后,SKOV3/DDP细胞ClC蛋白表达水平明显降低;ClC-3-siRNA联合DDP作用后,SKOV3/DDP细胞增殖率下降(P<0.05),Cyt-c和Caspase-3活化片段蛋白表达水平增加(P<0.05)。结论:pSH1-siRNA-ClC-3可有效抑制SKOV3/DDP细胞ClC-3蛋白的表达,并促进DDP诱导SKOV3/DDP细胞凋亡。 展开更多

关键词 卵巢肿瘤 氯通道-3 顺铂 细胞凋亡

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聚肌胞对小鼠前列腺癌内微血管的影响 被引量：4

4

作者 田原僮 曾昭毅 +2 位作者 陈伟伟 何蔚 赵丽娟 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第11期1449-1452,共4页

目的探讨聚肌胞(polvriboinsine-polyribocyaidylic acid,polyI:C)对小鼠前列腺癌组织内血管生成的影响,初探其可能机制。方法将16只C57BL6/J纯系荷瘤小鼠按瘤重随机分为对照组和polyI:C组,分别瘤内注射生理盐水和polyI:C(每3d1次),用药... 目的探讨聚肌胞(polvriboinsine-polyribocyaidylic acid,polyI:C)对小鼠前列腺癌组织内血管生成的影响,初探其可能机制。方法将16只C57BL6/J纯系荷瘤小鼠按瘤重随机分为对照组和polyI:C组,分别瘤内注射生理盐水和polyI:C(每3d1次),用药7次后切除瘤灶。HE染色,镜下观察肿瘤组织组织形态学变化及血管分布情况。利用试剂盒检测肿瘤组织内NO水平。免疫组织化学染色,观察肿瘤组织eNOS、VEGF和AQP1蛋白表达情况。结果对照组和polyI:C组小鼠前列腺癌组织内的NO含量分别为(8.73±5.34)μmol和(1.22±0.77)μmol,两组比较差异有显著性(P<0.05)。免疫组化结果显示,对照组和polyI:C组的VEGF阳性染色前列腺癌细胞计数占同类肿瘤细胞的比例分别为(37.91±7.62)%和(9.64±2.90)%;C组的eNOS阳性染色前列腺癌细胞计数占同类肿瘤细胞的比例分别为(54.43±10.39)%和(22.00±8.07)%;AQP1平均值分别为(14.8±3.5)和(3.2±1.3),两组比较差异有显著性(P<0.05)。结论polyI:C可能通过下调小鼠前列腺癌组织中eNOS和VEGF蛋白的表达,抑制小鼠前列腺癌组织内血管的生成;通过影响组织内AQP1蛋白水平、减少NO生成和释放,影响血管内皮细胞的功能和肿瘤组织的微循环。 展开更多

关键词 聚肌胞 小鼠 前列腺癌 VEGF ENOS NO AQP1

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自噬溶酶体抑制剂氯化铵促进维生素K3诱导人宫颈癌HeLa细胞凋亡的作用 被引量：5

5

作者 于春艳 刘希 +2 位作者 张钰 苏静 刘玉和 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期1197-1201,共5页

目的:探讨自噬溶酶体抑制剂氯化铵(NH4Cl)在维生素K3(VK3)诱导的HeLa细胞凋亡过程中的作用。方法:实验分为4组:正常对照组、30μmol/L VK3作用组、10 mmol/L NH4Cl作用组和30μmol/L VK3+10mmol/L NH4Cl联合作用组。MTT法检测细胞存活率... 目的:探讨自噬溶酶体抑制剂氯化铵(NH4Cl)在维生素K3(VK3)诱导的HeLa细胞凋亡过程中的作用。方法:实验分为4组:正常对照组、30μmol/L VK3作用组、10 mmol/L NH4Cl作用组和30μmol/L VK3+10mmol/L NH4Cl联合作用组。MTT法检测细胞存活率;吖啶橙(AO)染色观察溶酶体膜通透性变化,单丹磺酰尸胺(MDC)染色观察自噬泡的变化,BCECF-AM染色流式细胞术检测细胞浆pH变化,Hoechst 33342染色检测细胞核染色质凝聚状态及细胞凋亡率。结果:与对照组相比,单独应用NH4Cl对HeLa细胞无明显影响。VK3作用组He-La细胞存活率降低,AO染色荧光没有变化,细胞内出现自噬泡,细胞浆呈酸性,细胞核染色质凝聚,细胞发生凋亡。NH4Cl与VK3联合作用于HeLa细胞时,与单独应用VK3组相比,溶酶体通透性增加,细胞内自噬泡更加聚集,细胞浆酸性增强,细胞凋亡率明显增加。结论:自噬溶酶体抑制剂NH4Cl促进了VK3诱导的HeLa细胞凋亡,表明自噬可能在VK3诱导的HeLa细胞损伤过程中起到保护作用。 展开更多

关键词 自噬 HELA细胞 氯化铵 维生素K3

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结肠安栓联合舒血宁对溃疡性结肠炎大鼠的治疗作用及其机制 被引量：3

6

作者 李辉 赵丽晶 +6 位作者 杜宇 杨铁铮 李国峰 陈亮 支晨阳 李娜 周建华 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期488-493,F0002,I0001,共8页

目的:探讨结肠安栓联合舒血宁对TNBS诱导的大鼠溃疡性结肠炎(UC)的治疗作用,阐明其活血、抗炎和调节免疫的作用机制。方法:将64只Wistar大鼠随即分为空白组(n=8),模型组(n=8),美沙拉嗪组(0.380g.kg-1,n=8),舒血宁组(1.8 mL.kg-1,n=8),... 目的:探讨结肠安栓联合舒血宁对TNBS诱导的大鼠溃疡性结肠炎(UC)的治疗作用,阐明其活血、抗炎和调节免疫的作用机制。方法:将64只Wistar大鼠随即分为空白组(n=8),模型组(n=8),美沙拉嗪组(0.380g.kg-1,n=8),舒血宁组(1.8 mL.kg-1,n=8),结肠安栓A、B组(1.215 g.kg-1,2.430g.kg-1,n=8),联合给药A组(结肠安栓1.215g.kg-1+舒血宁1.8mL.kg-1,n=8)和联合给药B组(结肠安栓2.430g.kg-1+舒血宁1.8mL.kg-1,n=8)。采用TNBS诱导大鼠UC模型,造模后连续给药14d,进行一般症状学观察,测定大鼠体质量、血液指标、淋巴细胞增殖能力,RT-PCR法检测IFN-γ和TNF-αmRAN水平,应用HE染色和免疫组织化学染色法观察大鼠结肠组织病理形态学变化和脾脏组织中CD4+表达。结果:与模型组比较,联合给药组UC大鼠的症状改善,体质量恢复;血小板(PLT)数量明显降低(P<0.05,P<0.01),血浆凝血酶原时间(PT)和延长部分凝血活酶时间(APTT)明显延长(P<0.05,P<0.01),3种炎细胞数量均有降低,IFN-γ和TNF-αmRNA表达水平明显降低,淋巴细胞刺激指数(SI)明显增高(P<0.01)。病理组织学染色,模型组大鼠结肠黏膜病理损伤最为严重,结肠黏膜可见糜烂、溃疡形成,有大量炎细胞浸润。联合给药组大鼠结肠黏膜溃疡黏膜上皮部分修复,腺体排列相对整齐,杯状细胞破损少,炎细胞浸润相对减轻。免疫组织化学染色,联合给药组大鼠脾脏组织中CD4+免疫反应阳性细胞数明显减少。结论:结肠安栓联合舒血宁对UC有治疗作用,其机制可能是活血、调节免疫从而减轻炎症反应。 展开更多

关键词 结肠安栓 舒血宁 溃疡性结肠炎 免疫 炎症

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抑制氯通道CLCN2基因表达对顺铂诱导胶质瘤U251细胞损伤的影响 被引量：2

7

作者 苏静 周磊 +2 位作者 孔晓霞 郑花 孙连坤 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期859-863,共5页

目的:探讨使用特异性CLCN2反义寡核苷酸抑制CLCN2基因表达对顺铂诱导的神经胶质瘤U251细胞损伤的影响。方法:U251细胞按处理方法不同分4组,对照组(转染无义寡核苷酸)、转染CLCN2反义寡核苷酸组、顺铂组(无义寡核苷酸与顺铂联用)、CLCN2... 目的:探讨使用特异性CLCN2反义寡核苷酸抑制CLCN2基因表达对顺铂诱导的神经胶质瘤U251细胞损伤的影响。方法:U251细胞按处理方法不同分4组,对照组(转染无义寡核苷酸)、转染CLCN2反义寡核苷酸组、顺铂组(无义寡核苷酸与顺铂联用)、CLCN2反义寡核苷酸与顺铂联用组。应用MTT法检测U251细胞生存率;RT-PCR检测CLCN2、cyclinD1 mRNA表达;TUNEL法检测细胞凋亡率。结果:与对照组相比,转染CLCN2反义寡核苷酸组、顺铂组和CLCN2反义寡核苷酸与顺铂联用组U251细胞生存率、CLCN2 mRNA表达降低,凋亡细胞数增加;与顺铂组相比,CLCN2反义寡核苷酸与顺铂联用组细胞生存率(P<0.05)、CLCN2、cyclinD1 mRNA表达降低,凋亡细胞数增加(P<0.01);与CLCN2反义寡核苷酸组相比,CLCN2反义寡核苷酸与顺铂联用组CLCN2 mRNA表达明显降低(P<0.01)。结论:①转染CLCN2反义寡核苷酸能有效抑制CLCN2 mRNA表达;②抑制CLCN2 mRNA表达能促进顺铂对U251细胞的损伤作用;③CLCN2基因表达降低参与顺铂对U251细胞损伤作用。 展开更多

关键词 氯通道 基因 CLCN2 寡核苷酸类 反义 顺铂 神经胶质瘤 U251细胞

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20(s)-原人参二醇对体外培养Siha细胞caspase-3表达激活的影响 被引量：2

8

作者 赵丽晶 许多 +6 位作者 程宏 梁作文 鲁育铭 韩向北 郭亚雄 赵丽娟 董妍 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期26-29,I0001,共5页

目的:观察20(s)-原人参二醇(PPD)对体外培养人宫颈癌Siha细胞中caspase-9和caspase-3转录表达的影响,以及caspase-3的活化形式cleaved caspase-3含量的变化,阐明其诱导Siha细胞凋亡的机制。方法:体外培养人宫颈癌Siha细胞,将其分为阴性... 目的:观察20(s)-原人参二醇(PPD)对体外培养人宫颈癌Siha细胞中caspase-9和caspase-3转录表达的影响,以及caspase-3的活化形式cleaved caspase-3含量的变化,阐明其诱导Siha细胞凋亡的机制。方法:体外培养人宫颈癌Siha细胞,将其分为阴性对照组(乙醇)和实验组(20μg.L-1 PPD),分别用乙醇和PPD处理体外培养的宫颈癌Siha细胞,48h后流式细胞仪检测细胞的凋亡峰,半定量RT-PCR、Western blotting和免疫细胞化学染色方法检测PPD处理后Siha细胞中caspase-9和caspase-3基因的转录与表达水平。结果:与阴性对照组比较,20μg.L-1 PPD处理48h后,Siha细胞凋亡率增加(P<0.05),Siha细胞中caspase-9与caspase-3转录水平升高(P<0.01),表达上调(P<0.01),caspase-3的活化形式cleaved caspase-3含量增加(P<0.01)。细胞免疫化学检测可见实验组细胞出现棕色颗粒。结论:PPD可促进人宫颈癌Siha细胞凋亡,其机制与激活caspase家族级联反应有关。 展开更多

关键词 20(S)-原人参二醇 SIHA细胞 细胞凋亡 CASPASE-3 CASPASE-9 基因表达

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20(s)-原人参二醇对体外培养Siha细胞caspase-3表达的影响 被引量：1

9

作者 赵丽晶 许多 +2 位作者 程宏 梁作文 赵丽娟 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第A10期2020-2020,共1页

关键词 caspase 原人参二醇 SIHA 体外培养 凋亡峰 级联反应 人宫颈癌 流式细胞仪检测 活化形式 阴性对照

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人宫颈癌HeLa细胞氧化损伤中溶酶体与线粒体损伤的时间顺序及其意义 被引量：1

10

作者 于春艳 刘希 +3 位作者 于春荣 张钰 苏静 刘玉和 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期872-875,I0002,共5页

目的:探讨溶酶体及线粒体死亡途径在氧化应激诱导HeLa细胞凋亡过程中的时间顺序及其意义,阐明溶酶体膜通透性在氧化应激诱导线粒体凋亡过程中的重要作用。方法:以对数生长期人宫颈癌HeLa细胞作为研究对象,利用维生素K3(VK3)复制氧化应... 目的:探讨溶酶体及线粒体死亡途径在氧化应激诱导HeLa细胞凋亡过程中的时间顺序及其意义,阐明溶酶体膜通透性在氧化应激诱导线粒体凋亡过程中的重要作用。方法:以对数生长期人宫颈癌HeLa细胞作为研究对象,利用维生素K3(VK3)复制氧化应激模型,实验分为对照组、VK3 1h、VK3 3h、VK3 6h和VK312h作用组。MTT法检测各组细胞生存率;2′,7′-二氯荧光黄双乙酸盐(DCFH-DA)染色检测细胞内活性氧(ROS)水平,吖啶橙(AO)染色观察溶酶体膜通透性,罗丹明123染色检测线粒体膜电势(ΔΨm),Western blotting法检测凋亡相关蛋白caspase-3活化片段的表达。结果:与对照组比较,VK3 6和12h组HeLa细胞生存率降低(P<0.05)。Western blotting法检测,与对照组比较,VK3 6和12h组HeLa细胞内caspase-3活化片段表达水平增加(P<0.05)。DCFH-DA染色,VK3作用1、3及6h,HeLa细胞内绿色荧光增强。AO染色,VK3 3h和6h组可见HeLa细胞的溶酶体内红色颗粒状荧光减弱,细胞浆绿色荧光增强。罗丹明123染色,VK36h组可见HeLa细胞浆内红色荧光强度明显降低(提示ΔΨm下降)。结论:氧化损伤能够诱导溶酶体及线粒体死亡途径,并且溶酶体的变化先于线粒体,提示溶酶体通透性在氧化应激诱导线粒体凋亡过程中具有重要作用。 展开更多

关键词 氧化应激 溶酶体 线粒体 细胞凋亡

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人质膜型唾液酸酶在前列腺癌细胞凋亡中的作用 被引量：1

11

作者 禹彬 孙连坤 +3 位作者 许莉 李晓洁 李扬 赵雪俭 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期502-504,共3页

目的:探讨人质膜型唾液酸酶(NEU3)在维生素K3(VK3)诱导的人雄激素非依赖型前列腺癌PC3细胞凋亡中的作用及可能机制。方法:以稳定转染人质膜型唾液酸酶基因(neu3)的前列腺癌细胞(PC3-neu3细胞)为靶细胞,通过MTT、吖啶橙/溴化乙啶(AO/EB)... 目的:探讨人质膜型唾液酸酶(NEU3)在维生素K3(VK3)诱导的人雄激素非依赖型前列腺癌PC3细胞凋亡中的作用及可能机制。方法:以稳定转染人质膜型唾液酸酶基因(neu3)的前列腺癌细胞(PC3-neu3细胞)为靶细胞,通过MTT、吖啶橙/溴化乙啶(AO/EB)染色观察VK3作用下NEU3与凋亡的关系;应用细胞内活性氧(ROS)测定,Western blotting检测p65、Bcl-XL蛋白表达,探讨NEU3影响细胞凋亡的机制。结果:(1)VK3浓度相同时,PC3-neu3细胞的生存率高于PC3细胞,凋亡率低于PC3细胞;PC3-neu3细胞内ROS产生的荧光强度弱于PC3细胞。(2)在VK3的作用下,p65的蛋白表达在两组细胞中具有相同的趋势,均随VK3浓度的增加,蛋白表达增强;Bcl-XL的蛋白表达趋势则相反,PC3细胞组,Bcl-XL的表达随VK3浓度的增加逐渐减弱,而PC3-neu3细胞组则增强,两组比较差异显著(P<0.01)。结论:NEU3对VK3诱导的细胞凋亡具有抵抗作用,这一作用是通过降低细胞内活性氧水平,上调Bcl-XL和p65的蛋白表达实现的。 展开更多

关键词 人质膜型唾液酸酶 前列腺肿瘤 维生素K3 细胞凋亡

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20(s)-原人参二醇对体外培养宫颈癌Siha细胞的增殖抑制作用及其机制

12

作者 鲁育铭 赵丽晶 +3 位作者 王贺彬 许多 赵丽娟 董妍 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期909-912,I0003,共5页

目的:观察20(s)-原人参二醇(PPD)对体外培养宫颈癌Siha细胞生长周期的作用及其对p53、p21及细胞周期素E(cyclin-E)基因转录和表达的影响,探讨PPD抑制Siha细胞增殖的机制。方法:体外培养人宫颈癌Siha细胞,将其分为阴性对照组(乙醇)和实验... 目的:观察20(s)-原人参二醇(PPD)对体外培养宫颈癌Siha细胞生长周期的作用及其对p53、p21及细胞周期素E(cyclin-E)基因转录和表达的影响,探讨PPD抑制Siha细胞增殖的机制。方法:体外培养人宫颈癌Siha细胞,将其分为阴性对照组(乙醇)和实验组(20μg·L-1 PPD),分别用乙醇和PPD处理体外培养的宫颈癌Siha细胞,48h后流式细胞术检测细胞周期,Real time PCR和Western blotting法检测宫颈癌Siha细胞内p53、p21及cyclin-E mRNA及蛋白的表达情况。结果:与阴性对照组比较,20μg·L-1 PPD处理48h后,G0/G1期Siha细胞比例增加(P<0.01),G1期阻滞作用明显增强;Siha细胞中p53与p21mRNA及蛋白表达水平上调(P<0.01),cyclin-E mRNA及蛋白表达水平下调(P<0.01)。结论:PPD可抑制人宫颈癌Siha细胞增殖,其机制可能与上调p53、p21基因表达,下调cyclin-E基因表达有关。 展开更多

关键词 20(S)-原人参二醇 SIHA细胞 p53 P21 CYCLIN-E

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乳胞素对胶质瘤C6细胞体内增殖的抑制作用

13

作者 王海峰 陈勃 +4 位作者 钟加滕 项喜艳 李文臣 罗毅男 葛鹏飞 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期801-804,971,共4页

目的:在体外实验蛋白酶体抑制剂乳胞素(LAC)可以抑制神经胶质瘤C6细胞增殖的基础上,进一步在裸鼠体内观察乳胞素对C6细胞增殖率的影响,探讨乳胞素抑制胶质瘤细胞增殖率的可能机制。方法:体外培养C6细胞,选择处于对数生长期的细胞接种于... 目的:在体外实验蛋白酶体抑制剂乳胞素(LAC)可以抑制神经胶质瘤C6细胞增殖的基础上,进一步在裸鼠体内观察乳胞素对C6细胞增殖率的影响,探讨乳胞素抑制胶质瘤细胞增殖率的可能机制。方法:体外培养C6细胞,选择处于对数生长期的细胞接种于裸鼠背部皮下,连续7 d腹腔注射给予乳胞素,实验分为模型组(Model)、乳胞素0.5μg/20 g组、乳胞素1μg/20 g组及乳胞素5μg/20 g组,每组3只裸鼠,每天观察小鼠一般状态(饮食、大小便、毛色、活动情况等);测量与计算不同时间点肿瘤体积,RT-PCR方法检测各组细胞中Bax、bcl-2和caspase-3 mRNA表达水平。结果:与模型组比较,乳胞素0.5μg/20 g组、乳胞素1μg/20 g组和乳胞素5μg/20 g组肿瘤体积明显减小(P<0.05),Bax/bcl-2和caspase-3 mRNA表达水平明显升高(P<0.05)。不同浓度乳胞素组肿瘤体积无明显差异,不同浓度乳胞素组Bax/bcl-2 mRNA水平及caspase-3 mRNA水平无明显差异。结论:乳胞素在动物体内能明显抑制C6细胞的增殖率,其作用机制可能是增加C6细胞线粒体途径的凋亡发挥抑制其增殖的作用。 展开更多

关键词 乳胞素 凋亡 BALBC 胶质瘤

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枕大池二次注血法建立大鼠蛛网膜下腔出血模型及尼莫地平的脑保护作用

14

作者 吴冰 康劲松 +4 位作者 王贺元 晞欣 邱海洋 王伟伟 罗祺 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期1153-1156,共4页

目的:建立一种适于研究蛛网膜下腔出血(SAH)诱发脑血管痉挛(CVS)的大鼠模型,并探讨尼莫地平的脑保护作用。方法:将Wistar大鼠分为假手术组(枕大池内注入0.3mL生理盐水)、SAH模型组(无抗凝自体血0.3mL注入枕大池)及SAH尼莫地平治疗组(简... 目的:建立一种适于研究蛛网膜下腔出血(SAH)诱发脑血管痉挛(CVS)的大鼠模型,并探讨尼莫地平的脑保护作用。方法:将Wistar大鼠分为假手术组(枕大池内注入0.3mL生理盐水)、SAH模型组(无抗凝自体血0.3mL注入枕大池)及SAH尼莫地平治疗组(简称治疗组,建模后30min及术后每日均腹腔注射尼莫地平0.2mg·kg-1)。于实验第1、7、14和21天观察大鼠神经功能障碍及进食量下降的发生率,经颅多普勒超声(TCD)检测大鼠基底动脉的最大血流速度(VmBA)。结果:与假手术组比较,SAH模型组大鼠VmBA与神经功能障碍及进食量下降(包括2～4级)的发生时程相一致,主要是第1天增加(P<0.05),第7天达到高峰(P<0.05),第14天下降(P<0.05),第21天无明显异常,且死亡率为0。与SAH模型组比较,治疗组大鼠的VmBA减慢(P<0.05),大鼠神经功能障碍及进食量下降的发生率低(P<0.05)。结论:通过枕大池二次注血法,建立了一种接近于临床、适于研究SAH诱发CVS的大鼠模型,尼莫地平可以明显地减轻SAH发生后CVS的程度。 展开更多

关键词 二次注血法 蛛网膜下腔出血 脑血管痉挛 疾病模型 大鼠

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肾细胞癌组织中Notch信号途径蛋白表达水平的检测及其意义

15

作者 娄冬梅 牟荣 +4 位作者 武慧 刘玉和 钟加滕 于春艳 杨冬艳 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期93-96,共4页

目的:检测人肾细胞癌(RCC)组织中Notch信号途径相关蛋白的表达水平,探讨Notch信号途径分子与人RCC发生发展的关系。方法:手术方法获得6例经病理检查诊断为RCC组织标本,采用Westernblotting法检测RCC组织和癌旁组织中Notch信号通路受体... 目的:检测人肾细胞癌(RCC)组织中Notch信号途径相关蛋白的表达水平,探讨Notch信号途径分子与人RCC发生发展的关系。方法:手术方法获得6例经病理检查诊断为RCC组织标本,采用Westernblotting法检测RCC组织和癌旁组织中Notch信号通路受体、配体蛋白表达水平。结果:与癌旁组织比较,RCC组织中Notch信号的受体Notch-1以及配体Jagged-1的表达水平均明显降低(P<0.05),受体Notch-2及配体Jagged-2表达水平均明显升高(P<0.05)。结论:RCC中Notch信号途径蛋白表达水平发生了明显的变化,Notch信号途径可能参与了RCC的发生发展过程。 展开更多

关键词 肾细胞癌 NOTCH信号途径 蛋白表达 免疫印迹

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Bcl-2在H_2O_2诱导神经胶质瘤自噬中的作用

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作者 孔晓霞 张宏宇 康劲松 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第A10期2012-2012,共1页

关键词 神经胶质瘤 H₂O₂ 自噬 信号途径 mTOR 透射电镜检测 空泡化 细胞形态学 基因重组技术 空泡形成

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吲哚美辛联合X线照射对人急性髓系白血病HL-60细胞的增殖抑制作用

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作者 王波 顾俊莲 +3 位作者 戴玉鑫 佟力军 孟令娜 李扬 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期218-221,共4页

目的:观察吲哚美辛联合X线照射对人急性髓系白血病HL-60细胞的增殖抑制作用,为抗肿瘤研究提供依据。方法:将HL-60细胞培养于含吲哚美辛的培养基中,终浓度分别为0、20、40、60、80和100μmol.L-1。同时给予3Gy X线照射,继续培养24h;MTT... 目的:观察吲哚美辛联合X线照射对人急性髓系白血病HL-60细胞的增殖抑制作用,为抗肿瘤研究提供依据。方法:将HL-60细胞培养于含吲哚美辛的培养基中,终浓度分别为0、20、40、60、80和100μmol.L-1。同时给予3Gy X线照射,继续培养24h;MTT法检测细胞增殖抑制率;台盼蓝染色法检测细胞活力;实时荧光定量PCR检测细胞增殖和凋亡相关基因PCNA和Caspase-3mRNA表达变化。结果:与对照组比较,不同浓度吲哚美辛联合照射组HL-60细胞增殖抑制率明显增加,80μmol.L-1吲哚美辛联合照射组HL-60细胞增殖抑制率最高(P<0.01)。与对照组、吲哚美辛(80μmol.L-1)组和照射组比较,80μmol.L-1吲哚美辛联合照射组HL-60细胞活力抑制程度最高(P<0.05或P<0.01)。与对照组、吲哚美辛(80μmol.L-1)组和照射组比较,80μmol.L-1吲哚美辛联合照射组PCNA mRNA表达水平明显降低(P<0.01),Caspase-3mRNA表达水平明显升高(P<0.01)。结论:吲哚美辛可显著增强照射对HL-60细胞的增殖抑制作用。 展开更多

关键词 吲哚美辛 照射 HL-60细胞 细胞增殖 细胞凋亡

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抑制衔接蛋白2表达对AT1受体介导的Ang Ⅱ内吞的影响

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作者 张勇 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第A10期1975-1975,共1页

关键词 内吞 受体介导 衔接蛋白 AT1受体 ANG 质粒转染 表达载体 血管紧张素Ⅱ 亚单位 蛋白包被

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吸烟相关剂量镉对大鼠心肌的损伤作用及其分子机制 被引量：1

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作者 顾俊莲 王波 +7 位作者 刘亚男 邵晨 郭花 李晓洁 贾慧婕 李馨 殷迪 李扬 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期591-595,F0002,共6页

目的:建立吸烟相关剂量镉的大鼠模型,研究吸烟相关剂量的镉对大鼠心肌的损伤作用,并进一步探讨其可能的分子机制。方法:建立吸烟相关剂量镉的Wistar大鼠模型作为模型组,同时设立生理盐水对照组,分别于20、36和52周处死大鼠,应用ICP-MS... 目的:建立吸烟相关剂量镉的大鼠模型,研究吸烟相关剂量的镉对大鼠心肌的损伤作用,并进一步探讨其可能的分子机制。方法:建立吸烟相关剂量镉的Wistar大鼠模型作为模型组,同时设立生理盐水对照组,分别于20、36和52周处死大鼠,应用ICP-MS检测心肌组织中镉的蓄积量;绘制脏器系数曲线;生化试剂盒检测心肌组织肌酸激酶(CK)和乳酸脱氢酶(LDH)含量;生化试剂盒检测心肌组织超氧化物歧化酶(SOD)的活性和谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)的含量;病理组织切片观察心肌形态改变;RT-PCR检测凋亡相关基因caspase-3、bcl-2及bax的变化;Western blotting检测凋亡相关蛋白caspase-3、bax、caspase-9及Fas的变化。结果:与对照组比较,模型组心肌组织镉含量在36和52周蓄积增加,差异有统计学意义(P<0.05);模型组心肌组织脏器系数在20和36周有略微下降趋势,52周下降明显,差异有统计学意义(P<0.05);模型组心肌组织中CK含量在20、36和52周含量均明显增加,差异有统计学意义(P<0.05);LDH含量在36和52周明显增加,差异有统计学意义(P<0.05);模型组心肌组织SOD活性分别在36和52周明显下降,差异有统计学意义(P<0.05);GSH的含量在20、36和52周明显下降,差异有统计学意义(P<0.05);MDA的含量以20、36和52周明显上升,差异有统计学意义(P<0.05)。电镜观察显示,模型组有心肌细胞紊乱、结缔组织局灶性增生等改变。RT-PCR和Western blotting结果显示,与对照组比较,模型组心肌组织caspase-3、bax和Fas的表达明显增加(P<0.05),bcl-2表达明显减少(P<0.05)。结论:吸烟相关剂量镉通过心肌酶CK和LDH的泄漏,造成心肌组织氧化损伤,对心肌产生毒性作用,并最终导致心肌细胞凋亡的发生。 展开更多

关键词 吸烟相关剂量镉 大鼠 WISTAR 心脏 细胞凋亡

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电压门控性氯离子通道2在血管紧张素Ⅱ促H9C2细胞肥大中的作用 被引量：1

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作者 牟荣 张勇 +4 位作者 于春艳 钟加滕 孙连坤 刘菲 刘玉和 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期284-287,共4页

目的:利用血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)体外复制心肌细胞H9C2肥大模型,观察电压门控性氯离子通道2(CLC-2)对心肌细胞肥大过程的影响,阐明其作用机制。方法:将H9C2分为对照(control)组、AngⅡ组、坎地沙坦(candesartan)组、坎地沙坦与AngⅡ联合应... 目的:利用血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)体外复制心肌细胞H9C2肥大模型,观察电压门控性氯离子通道2(CLC-2)对心肌细胞肥大过程的影响,阐明其作用机制。方法:将H9C2分为对照(control)组、AngⅡ组、坎地沙坦(candesartan)组、坎地沙坦与AngⅡ联合应用(candesartan+AngⅡ)组。流式细胞术检测各组H9C2细胞体积的变化,RT-PCR和Western blotting检测各组细胞中CLC-2mRNA和蛋白表达的变化。结果:与对照组比较,AngⅡ组大体积细胞百分比明显增加(P<0.01),细胞中CLC-2mRNA和蛋白表达水平均增加(P<0.01);与AngⅡ组比较,candesartan+AngⅡ组大体积细胞百分比降低(P<0.01),CLC-2mRNA和蛋白表达也降低(P<0.01)。结论:AngⅡ可诱导心肌细胞H9C2肥大,其机制可能与CLC-2影响细胞内氯离子浓度有关。 展开更多

关键词 电压门控性氯离子通道2 心肌细胞肥大 血管紧张素Ⅱ

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