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人骨髓间充质干细胞的分离及鉴定
被引量:
1
1
作者
赵东海
王悦增
+1 位作者
郭新
李玉林
《吉林大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第2期205-208,共4页
目的 :建立分离并鉴定人骨髓间充质干细胞 (HMSC)的方法。方法 :联合应用 Percoll(1.0 73g· L- 1 )密度梯度离心和贴壁筛选的方法分离 HMSC进行体外培养 ,利用免疫细胞化学、细胞化学和电镜等技术手段对体外培养的 HMSC进行鉴定。...
目的 :建立分离并鉴定人骨髓间充质干细胞 (HMSC)的方法。方法 :联合应用 Percoll(1.0 73g· L- 1 )密度梯度离心和贴壁筛选的方法分离 HMSC进行体外培养 ,利用免疫细胞化学、细胞化学和电镜等技术手段对体外培养的 HMSC进行鉴定。结果 :HMSC具有独特的表型特征 ,即 CD2 9、CD4 4阳性和 CD34、CD4 5阴性。细胞糖原反应 (PAS)阳性、苏丹黑反应 (SB)阴性。电镜观察结果提示细胞较幼稚。结论 :利用密度梯度离心和贴壁筛选的方法可以分离 HMSC,联合应用免疫细胞化学、细胞化学和电镜等技术手段鉴定 HMSC的方法有效。
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关键词
骨髓
干细胞
细胞
培养的
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职称材料
单纯疱疹病毒胸苷激酶多克隆抗体的制备
2
作者
张煜
于湘辉
+2 位作者
查晓
王安荣
孔维
《吉林大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第6期1089-1091,共3页
目的:克隆单纯疱疹病毒胸苷激酶(HSV-TK)基因,并在大肠杆菌中表达,通过免疫家兔,获得HSV-TK多克隆抗体,为进一步研究HSV-TK的功能奠定基础。方法:从纯化的单纯疱疹病毒(HSV)中提取病毒基因组,用PCR特异性扩增HSV-TK全长基因,克隆入表达...
目的:克隆单纯疱疹病毒胸苷激酶(HSV-TK)基因,并在大肠杆菌中表达,通过免疫家兔,获得HSV-TK多克隆抗体,为进一步研究HSV-TK的功能奠定基础。方法:从纯化的单纯疱疹病毒(HSV)中提取病毒基因组,用PCR特异性扩增HSV-TK全长基因,克隆入表达载体pRSETB中进行表达,以纯化的表达产物免疫家兔制备多克隆抗血清,进行Western blotting鉴定。结果:用IPTG诱导后,表达出相对分子质量(Mr)约43000的融合蛋白,免疫家兔制备的兔血清,第2~5周每周采血1次,Western blotting检测均获得特异性蛋白带;最后一次样品3个稀释度(1∶1000、1∶3000、1∶5000)的Western blotting分析仍可以检出蛋白质带。结论:成功获得了特异性强和滴度高的HSV-TK多克隆抗体。
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关键词
单纯疱疹病毒属
胸苷激酶
基因表达
多克隆抗体
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职称材料
题名
人骨髓间充质干细胞的分离及鉴定
被引量:
1
1
作者
赵东海
王悦增
郭新
李玉林
机构
吉林大学疫苗中心
吉林大学
基础医学院病理生物学教育部重点实验室
出处
《吉林大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第2期205-208,共4页
基金
教育部博士学科点专项基金资助课题 (2 0 0 2 0 1830 6 4 )
文摘
目的 :建立分离并鉴定人骨髓间充质干细胞 (HMSC)的方法。方法 :联合应用 Percoll(1.0 73g· L- 1 )密度梯度离心和贴壁筛选的方法分离 HMSC进行体外培养 ,利用免疫细胞化学、细胞化学和电镜等技术手段对体外培养的 HMSC进行鉴定。结果 :HMSC具有独特的表型特征 ,即 CD2 9、CD4 4阳性和 CD34、CD4 5阴性。细胞糖原反应 (PAS)阳性、苏丹黑反应 (SB)阴性。电镜观察结果提示细胞较幼稚。结论 :利用密度梯度离心和贴壁筛选的方法可以分离 HMSC,联合应用免疫细胞化学、细胞化学和电镜等技术手段鉴定 HMSC的方法有效。
关键词
骨髓
干细胞
细胞
培养的
Keywords
marrow
stem cells
cells,cultured
分类号
R329.2 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
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职称材料
题名
单纯疱疹病毒胸苷激酶多克隆抗体的制备
2
作者
张煜
于湘辉
查晓
王安荣
孔维
机构
吉林大学疫苗中心
四川省肿瘤研究所
四川省肿瘤医院肿瘤流行病室
出处
《吉林大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第6期1089-1091,共3页
基金
四川省科技厅应用基础研究项目资助课题(2008JY0020)
文摘
目的:克隆单纯疱疹病毒胸苷激酶(HSV-TK)基因,并在大肠杆菌中表达,通过免疫家兔,获得HSV-TK多克隆抗体,为进一步研究HSV-TK的功能奠定基础。方法:从纯化的单纯疱疹病毒(HSV)中提取病毒基因组,用PCR特异性扩增HSV-TK全长基因,克隆入表达载体pRSETB中进行表达,以纯化的表达产物免疫家兔制备多克隆抗血清,进行Western blotting鉴定。结果:用IPTG诱导后,表达出相对分子质量(Mr)约43000的融合蛋白,免疫家兔制备的兔血清,第2~5周每周采血1次,Western blotting检测均获得特异性蛋白带;最后一次样品3个稀释度(1∶1000、1∶3000、1∶5000)的Western blotting分析仍可以检出蛋白质带。结论:成功获得了特异性强和滴度高的HSV-TK多克隆抗体。
关键词
单纯疱疹病毒属
胸苷激酶
基因表达
多克隆抗体
分类号
R392 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
人骨髓间充质干细胞的分离及鉴定
赵东海
王悦增
郭新
李玉林
《吉林大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2005
1
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职称材料
2
单纯疱疹病毒胸苷激酶多克隆抗体的制备
张煜
于湘辉
查晓
王安荣
孔维
《吉林大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2008
0
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