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人骨髓间充质干细胞的分离及鉴定 被引量:1
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作者 赵东海 王悦增 +1 位作者 郭新 李玉林 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期205-208,共4页
目的 :建立分离并鉴定人骨髓间充质干细胞 (HMSC)的方法。方法 :联合应用 Percoll(1.0 73g· L- 1 )密度梯度离心和贴壁筛选的方法分离 HMSC进行体外培养 ,利用免疫细胞化学、细胞化学和电镜等技术手段对体外培养的 HMSC进行鉴定。... 目的 :建立分离并鉴定人骨髓间充质干细胞 (HMSC)的方法。方法 :联合应用 Percoll(1.0 73g· L- 1 )密度梯度离心和贴壁筛选的方法分离 HMSC进行体外培养 ,利用免疫细胞化学、细胞化学和电镜等技术手段对体外培养的 HMSC进行鉴定。结果 :HMSC具有独特的表型特征 ,即 CD2 9、CD4 4阳性和 CD34、CD4 5阴性。细胞糖原反应 (PAS)阳性、苏丹黑反应 (SB)阴性。电镜观察结果提示细胞较幼稚。结论 :利用密度梯度离心和贴壁筛选的方法可以分离 HMSC,联合应用免疫细胞化学、细胞化学和电镜等技术手段鉴定 HMSC的方法有效。 展开更多
关键词 骨髓 干细胞 细胞 培养的
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单纯疱疹病毒胸苷激酶多克隆抗体的制备
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作者 张煜 于湘辉 +2 位作者 查晓 王安荣 孔维 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期1089-1091,共3页
目的:克隆单纯疱疹病毒胸苷激酶(HSV-TK)基因,并在大肠杆菌中表达,通过免疫家兔,获得HSV-TK多克隆抗体,为进一步研究HSV-TK的功能奠定基础。方法:从纯化的单纯疱疹病毒(HSV)中提取病毒基因组,用PCR特异性扩增HSV-TK全长基因,克隆入表达... 目的:克隆单纯疱疹病毒胸苷激酶(HSV-TK)基因,并在大肠杆菌中表达,通过免疫家兔,获得HSV-TK多克隆抗体,为进一步研究HSV-TK的功能奠定基础。方法:从纯化的单纯疱疹病毒(HSV)中提取病毒基因组,用PCR特异性扩增HSV-TK全长基因,克隆入表达载体pRSETB中进行表达,以纯化的表达产物免疫家兔制备多克隆抗血清,进行Western blotting鉴定。结果:用IPTG诱导后,表达出相对分子质量(Mr)约43000的融合蛋白,免疫家兔制备的兔血清,第2~5周每周采血1次,Western blotting检测均获得特异性蛋白带;最后一次样品3个稀释度(1∶1000、1∶3000、1∶5000)的Western blotting分析仍可以检出蛋白质带。结论:成功获得了特异性强和滴度高的HSV-TK多克隆抗体。 展开更多
关键词 单纯疱疹病毒属 胸苷激酶 基因表达 多克隆抗体
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