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弓形虫GRA1基因的克隆与原核表达被引量：3: 1; 作者孙玲刘慧颖 +3 位作者李淑红宫鹏涛张西臣宁静《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期631-635,共5页; 目的:克隆并构建PET-28a-GRA1重组表达载体,转化入大肠杆菌E.coli BL21,诱导表达并鉴定,为进一步研究GRA1的生物学特性和免疫保护作用奠定实验基础。方法:根据GenBank中编码GRA1的已知基因序列设计并合成一对引物,应用PCR技术扩增GRA1基... 展开更多; 关键词 GRA1基因原核表达载体弓形虫克隆 GRAl SDS-PAGE BLOTTING 重组表达载体; 在线阅读下载PDF 职称材料

RNA干扰PTEN基因对HCT-8细胞增殖能力的影响被引量：3: 2; 作者吕强唐亮 +8 位作者李建华宫鹏涛徐晓芳田甜李泽中雒伟伟邢沈阳张西臣高久春《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期231-235,394,共5页; 目的:观察小干扰RNA(siRNA)对结肠癌相关基因PTEN表达的抑制作用及其对结肠癌细胞增殖能力的影响。方法:构建携带有针对PTEN基因序列的siRNA真核绿色荧光表达载体重组质粒pGPU6/GFP/Neo-PTEN-1、pGPU6/GFP/Neo-PTEN-2、pGPU6/GFP/Neo-PT... 展开更多; 关键词 PTEN 人结肠癌HCT-8细胞小于扰RNA; 在线阅读下载PDF 职称材料

牛、羊布鲁菌多重PCR方法的建立与应用被引量：1: 3; 作者杜涛峰韩文瑜 +4 位作者雷连成孙长江李扬顾敬敏许会会《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2010年第11期80-84,共5页; 根据布鲁菌属特异性基因BCSP31和布鲁菌种间特异性标志IS711插入序列,设计合成了3对引物,以牛种布鲁菌544A、104M和羊种布鲁菌16M基因组DNA为模板,通过优化反应条件,建立了可同时检测布鲁菌属、牛种布鲁菌和羊种布鲁菌的多重PCR方法。... 展开更多; 关键词牛种布鲁菌羊种布鲁菌 BCSP31基因 IS711基因多重PCR; 在线阅读下载PDF 职称材料

转录因子FOXD1在乳腺癌组织中的表达及意义被引量：1: 4; 作者雒伟伟邢沈阳 +1 位作者赵志辉张西臣《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期703-707,共5页; 目的:检测转录因子FOXD1在人浸润性乳腺癌和乳腺癌癌旁组织中的表达量变化,为进一步阐明FOXD1在人乳腺癌发生、发展中的意义提供依据。方法:应用冰冻切片和HE染色方法将113例乳腺癌标本分为浸润性乳腺癌和乳腺癌癌旁组织;选取4例浸润性... 展开更多; 关键词 FOXD1 乳腺肿瘤 WESTERN BLOTTING 实时荧光定量PCR; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名弓形虫GRA1基因的克隆与原核表达被引量：3: 1; 作者孙玲刘慧颖李淑红宫鹏涛张西臣宁静; 机构吉林大学白求恩医学院病原生物学教研室吉林省长春市绿园区疾病预防控制中心吉林大学畜牧兽医学院预防兽医学系; 出处《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期631-635,共5页; 基金国家科技支撑计划资助课题(2008BAD96B11-3) 吉林省发改委基金资助课题(200603); 文摘目的:克隆并构建PET-28a-GRA1重组表达载体,转化入大肠杆菌E.coli BL21,诱导表达并鉴定,为进一步研究GRA1的生物学特性和免疫保护作用奠定实验基础。方法:根据GenBank中编码GRA1的已知基因序列设计并合成一对引物,应用PCR技术扩增GRA1基因,插入原核表达载体PET-28a中,构建重组表达质粒PET-28a-GRA1,转化E.coli BL21,IPTG诱导后,进行SDS-PAGE和Western blotting鉴定。结果:克隆的GRA1基因与GenBank收录的基因序列同源性为100%。对重组质粒进行酶切和PCR鉴定,获得573bp大小的目的基因片段,与预期结果相符,成功地构建了重组质粒PET-28a-GRA1。SDS-PAGE电泳分析表明重组蛋白条带的相对分子质量约为24 000,Western blotting显示重组蛋白能被鼠抗弓形虫血清识别。结论:成功获取GRA1基因,构建了PET-28a-GRA1重组质粒并获得了高效表达。; 关键词 GRA1基因原核表达载体弓形虫克隆 GRAl SDS-PAGE BLOTTING 重组表达载体; Keywords Toxoplasrna gondii GRA1 eloning gene expression; 分类号 R349.64 [医药卫生—基础医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名RNA干扰PTEN基因对HCT-8细胞增殖能力的影响被引量：3: 2; 作者吕强唐亮李建华宫鹏涛徐晓芳田甜李泽中雒伟伟邢沈阳张西臣高久春; 机构吉林大学畜牧兽医学院预防兽医学系吉林农业大学动物科技学院预防兽医学系吉林大学畜牧兽医学院动物遗传育种与繁殖系吉林大学白求恩医学院生物学教研室; 出处《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期231-235,394,共5页; 基金国家重大基础研究计划项目资助课题(2006CB910505); 文摘目的:观察小干扰RNA(siRNA)对结肠癌相关基因PTEN表达的抑制作用及其对结肠癌细胞增殖能力的影响。方法:构建携带有针对PTEN基因序列的siRNA真核绿色荧光表达载体重组质粒pGPU6/GFP/Neo-PTEN-1、pGPU6/GFP/Neo-PTEN-2、pGPU6/GFP/Neo-PTEN-3和pGPU6/GFP/Neo-PTEN-4,脂质体法转染入结肠癌HCT-8细胞(分别为p1、p2、p3和p4组),同时设转染阴性对照质粒组(p5组)和亲本细胞组(p6组),实时PCR方法检测PTEN mRNA表达,MTT法分析细胞增殖活性变化。结果:通过荧光显微镜观察计数,细胞转染率为58%。实时PCR方法检测结果显示,siRNA重组质粒pGPU6/GFP/Neo-PTEN-1、pGPU6/GFP/Neo-PTEN-2、pGPU6/GFP/Neo-PTEN-3和pGPU6/GFP/Neo-PTEN-4的抑制率分别为48.3%、76.5%、29.4%和61.2%,与p6组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。MTT结果表明,细胞增殖抑制能力明显增强。结论:PTEN基因在肿瘤的发生发展中可能起到一定的作用。; 关键词 PTEN 人结肠癌HCT-8细胞小于扰RNA; Keywords PTEN gene； colon cancer cells HCT-8； small interfering RNA; 分类号 Q752 [生物学—分子生物学] R735.35 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名牛、羊布鲁菌多重PCR方法的建立与应用被引量：1: 3; 作者杜涛峰韩文瑜雷连成孙长江李扬顾敬敏许会会; 机构吉林大学畜牧兽医学院预防兽医学系; 出处《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2010年第11期80-84,共5页; 基金吉林省省长基金(20070613) 国家支撑计划课题(2008BAD96B11); 文摘根据布鲁菌属特异性基因BCSP31和布鲁菌种间特异性标志IS711插入序列,设计合成了3对引物,以牛种布鲁菌544A、104M和羊种布鲁菌16M基因组DNA为模板,通过优化反应条件,建立了可同时检测布鲁菌属、牛种布鲁菌和羊种布鲁菌的多重PCR方法。牛种布鲁菌可扩增出301和114bp 2条带,羊种布鲁菌可扩增出301和253bp 2条带,该方法对牛种布鲁菌544A和羊种布鲁菌16M混合DNA模板的最小检出量为100pg,对大肠杆菌O157∶H7、小肠结肠炎耶尔森菌等15种参照菌的核酸扩增结果均为阴性。应用该方法对吉林省某牛场的106份粪便进行检测,虎红平板凝集试验作对照,结果PCR检测9份为阳性,且全为牛种布鲁菌阳性,对应的虎红平板凝集试验也为阳性。结果表明,建立的多重PCR方法具有良好的敏感性和特异性,为布鲁菌病的鉴别诊断提供了一种分子检测工具。; 关键词牛种布鲁菌羊种布鲁菌 BCSP31基因 IS711基因多重PCR; Keywords B.abortus B.melitensis BCSP31gene IS711gene multiplex PCR; 分类号 S854 [农业科学—临床兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名转录因子FOXD1在乳腺癌组织中的表达及意义被引量：1: 4; 作者雒伟伟邢沈阳赵志辉张西臣; 机构吉林大学畜牧兽医学院动物遗传育种与繁殖学系吉林大学畜牧兽医学院预防兽医学系; 出处《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期703-707,共5页; 基金国家重大基础研究计划资助课题(2006CB910505); 文摘目的:检测转录因子FOXD1在人浸润性乳腺癌和乳腺癌癌旁组织中的表达量变化,为进一步阐明FOXD1在人乳腺癌发生、发展中的意义提供依据。方法:应用冰冻切片和HE染色方法将113例乳腺癌标本分为浸润性乳腺癌和乳腺癌癌旁组织;选取4例浸润性乳腺癌标本和4例乳腺癌癌旁组织标本,应用qRT-PCR技术和Western blotting方法测定FOXD1在转录水平和翻译水平的相对表达量。结果:按组织分类学标准,113例乳腺癌病例标本分为乳腺癌癌旁组织36例、浸润性乳腺癌组织77例。qRT-PCR检测表明:与乳腺癌癌旁组织比较,浸润性乳腺癌组织中FOXD1的相对表达量显著升高(P<0.01)。Western blotting分析表明:浸润性乳腺癌组织中FOXD1的相对表达量明显高于乳腺癌癌旁组织中的相对表达量(P<0.05)。结论:FOXD1在浸润性乳腺癌组织中的表达量明显高于乳腺癌癌旁组织,提示FOXD1表达水平与乳腺癌发生和发展有关。; 关键词 FOXD1 乳腺肿瘤 WESTERN BLOTTING 实时荧光定量PCR; Keywords FOXD1 breast neoplasms Western blotting qRT-PCR; 分类号 R737.9 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	弓形虫GRA1基因的克隆与原核表达	孙玲刘慧颖李淑红宫鹏涛张西臣宁静	《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心	2011	3	在线阅读下载PDF 职称材料
2	RNA干扰PTEN基因对HCT-8细胞增殖能力的影响	吕强唐亮李建华宫鹏涛徐晓芳田甜李泽中雒伟伟邢沈阳张西臣高久春	《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心	2011	3	在线阅读下载PDF 职称材料
3	牛、羊布鲁菌多重PCR方法的建立与应用	杜涛峰韩文瑜雷连成孙长江李扬顾敬敏许会会	《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心	2010	1	在线阅读下载PDF 职称材料
4	转录因子FOXD1在乳腺癌组织中的表达及意义	雒伟伟邢沈阳赵志辉张西臣	《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心	2010	1	在线阅读下载PDF 职称材料