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骨骼肌特异性表达猪FSⅠ-Ⅰ转基因猪胚胎成纤维细胞克隆的构建与鉴定: 1; 作者袁婷刘帅 +4 位作者李小平唐成程韩晓蕾逄大欣欧阳红生《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期192-196,共5页; 目的:构建骨骼肌特异性表达猪FSⅠ-Ⅰ真核表达载体,转染猪胚胎成纤维细胞并筛选整合有FSⅠ-Ⅰ基因的细胞克隆,为研究FSⅠ-Ⅰ对猪骨骼肌的影响奠定基础。方法:通过RT-PCR方法从猪骨骼肌中扩增FS A(包含FS N端和结构域FSⅠ)和结构域FSⅠ;... 展开更多; 关键词卵泡抑素猪胚胎成纤维细胞真核表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

转录因子Ets1和Ets2在小鼠睾丸组织中的表达及其意义被引量：2: 2; 作者刘洋金波 +4 位作者郭斌赵丽红韩玉帅岳占碰张学明《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期6-10,共5页; 目的:检测Ets家族转录因子Ets1和Ets2在小鼠睾丸组织中的表达,探讨其对小鼠睾丸发育的调控及其对精原干细胞(SSCs)增殖、分化的可能影响。方法:取生后第1、5、10、15、20、25、30、35、40、50和70天的小鼠睾丸组织,对成年小鼠进行白消安... 展开更多; 关键词 Ets转录因子家族 ETS1 Ets2 睾丸白消安小鼠; 在线阅读下载PDF 职称材料

慢病毒介导的猪CD4启动子在白血病Jurkat细胞中的启动作用: 3; 作者林晓晨杨鑫 +4 位作者曹宇航焦丽戴甄任林柱逄大欣《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期187-191,F0002,共6页; 目的:研究异种基因启动子在Jurkat细胞中调节外源基因表达的作用,为人类白血病动物模型的建立提供理论依据。方法:利用生物信息学手段预测并克隆出猪CD4基因启动子,然后利用克隆的猪CD4基因启动子构建和包装慢病毒载体。包装的病毒经过... 展开更多; 关键词 CD4基因慢病毒 JURKAT细胞 293T细胞启动子; 在线阅读下载PDF 职称材料

ER81在白消安模型小鼠睾丸和附睾中的表达及其意义: 4; 作者金波刘洋 +2 位作者车冠宇孙艺学张学明《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期180-182,共3页; 目的:检测Ets家族转录因子ER81在白消安模型小鼠睾丸及附睾中的表达水平,探讨其对精原细胞增殖和分化的影响。方法:成年小鼠腹腔注射白消安10 mg.kg-1,分别在注射后第0、3、5、8、10和18天取睾丸和附睾,半定量RT-PCR分析ER81 mRNA的相... 展开更多; 关键词 Ets家族转录因子ER81 睾丸附睾白消安小鼠; 在线阅读下载PDF 职称材料

PIWIL1基因启动子调控的特异表达Cre重组酶的转基因猪的构建: 5; 作者段新平高飞 +4 位作者武蓉宋奇韩杨姚潮刚纪元《安徽农业科学》 CAS 2012年第9期5231-5233,共3页; [目的]建立PIWIL1基因启动子调控的特异性表达Cre重组酶的转基因猪,为研究piRNA及其相关基因的功能和机制奠定基础。[方法]通过PCR扩增,从猪的全基因组上扩增出PIWIL1基因的启动子。切除猪源Cre重组酶的表达载体pET28a-MHC-Cre-BGHpo1yA... 展开更多; 关键词 PIRNA PIWIL1 Cre酶转基因猪; 在线阅读下载PDF 职称材料

表达Cre重组酶Cre-pCEP4载体的构建及其在Cre/loxP重组系统中的应用: 6; 作者周杨朱建国 +6 位作者唐小春闫森宋娜张明军李莉欧阳红生逄大欣《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期196-201,F0002,共7页; 目的:构建表达Cre重组酶的载体Cre-pCEP4,并验证其能够有效识别loxP位点,为人类疾病动物模型的建立提供依据。方法:构建重组载体Cre-pCEP4和pStop-eGFP,利用Fugene HD转染猪胚胎成纤维细胞(PEF)和MCF-7细胞系,利用荧光显微镜观察绿色荧... 展开更多; 关键词 Cre-pCEP4 CRE/LOXP重组系统猪胚胎成纤维细胞 MCF-7细胞系; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名骨骼肌特异性表达猪FSⅠ-Ⅰ转基因猪胚胎成纤维细胞克隆的构建与鉴定: 1; 作者袁婷刘帅李小平唐成程韩晓蕾逄大欣欧阳红生; 机构吉林大学畜牧兽医学院动物胚胎工程吉林省重点实验室; 出处《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期192-196,共5页; 基金国家自然科学基金资助课题(30871841); 文摘目的:构建骨骼肌特异性表达猪FSⅠ-Ⅰ真核表达载体,转染猪胚胎成纤维细胞并筛选整合有FSⅠ-Ⅰ基因的细胞克隆,为研究FSⅠ-Ⅰ对猪骨骼肌的影响奠定基础。方法:通过RT-PCR方法从猪骨骼肌中扩增FS A(包含FS N端和结构域FSⅠ)和结构域FSⅠ;利用PCR方法分别从鼠基因组、人血液基因组和pcDNA3.1(+)载体上扩增出MCK增强子、ACTA 1启动子和BGHpolyA。将上述4个片段分别连接到真核表达载体pGKneotpAlox2上,构建骨骼肌特异性表达FSⅠ-Ⅰ(包含FS N端和2个连续FSⅠ结构域)的载体pGK-MCK-ACTA 1-FSⅠ-Ⅰ-BGHpolyA;用FuGENE○RHD转染猪胚胎成纤维细胞,经药物G418筛选和PCR鉴定阳性克隆。结果:成功构建骨骼肌特异性表达猪FSⅠ-Ⅰ的表达载体pGK-MCK-ACTA1 promoter-FSⅠ-Ⅰ-BGHpolyA,并成功整合到猪胚胎成纤维细胞的基因组中,获得了整合有目的基因FSⅠ-Ⅰ的猪胚胎成纤维细胞克隆。结论:获得了骨骼肌特异性表达猪FSⅠ-Ⅰ的猪胚胎成纤维细胞克隆,为通过核移植方法获得表达FSⅠ-Ⅰ转基因猪提供了供体细胞。; 关键词卵泡抑素猪胚胎成纤维细胞真核表达; Keywords follistatin porcine embryonic fibroblasts eukaryotic expression; 分类号 S852 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名转录因子Ets1和Ets2在小鼠睾丸组织中的表达及其意义被引量：2: 2; 作者刘洋金波郭斌赵丽红韩玉帅岳占碰张学明; 机构吉林大学畜牧兽医学院动物胚胎工程吉林省重点实验室; 出处《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期6-10,共5页; 基金国家自然科学基金资助课题(30771555); 文摘目的:检测Ets家族转录因子Ets1和Ets2在小鼠睾丸组织中的表达,探讨其对小鼠睾丸发育的调控及其对精原干细胞(SSCs)增殖、分化的可能影响。方法:取生后第1、5、10、15、20、25、30、35、40、50和70天的小鼠睾丸组织,对成年小鼠进行白消安10mg.kg-1腹腔注射,分别在注射后第0、3、5、8、10和18天取睾丸组织,用半定量RT-PCR方法对比内参β-actin在对应组织内的表达水平,分析Ets1、Ets2mRNA在睾丸组织中的相对表达量。结果:Ets1的表达量在生后第1～30天显著高于出生后第35天(P<0.05或P<0.01),之后明显降低并保持稳定;Ets2在生后第1～25天表达量显著高于第35天(P<0.05或P<0.01),之后明显下降并保持稳定。白消安处理后,Ets1的表达量于第5天降至最低,随后逐渐恢复,第9天后基本达到处理前水平并保持相对稳定,其中第5、8天表达量均显著低于处理后第0天(P<0.05或P<0.01);Ets2的表达量在白消安处理后前期变化不明显,第10天时明显降低,与第0和18天比较差异有统计学意义(P<0.05),之后缓慢回升,第18天左右恢复至处理前水平。结论:转录因子Ets1和Ets2可能对睾丸早期发育、成年精子发生的维持及精原细胞的增殖、分化具有调节作用。; 关键词 Ets转录因子家族 ETS1 Ets2 睾丸白消安小鼠; Keywords Ets family transcription factors Ets1 Ets2 testis busulfan mice; 分类号 Q51 [生物学—生物化学] R-332 [医药卫生]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名慢病毒介导的猪CD4启动子在白血病Jurkat细胞中的启动作用: 3; 作者林晓晨杨鑫曹宇航焦丽戴甄任林柱逄大欣; 机构吉林大学畜牧兽医学院动物胚胎工程吉林省重点实验室; 出处《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期187-191,F0002,共6页; 基金国家自然科学基金资助课题(30871841); 文摘目的:研究异种基因启动子在Jurkat细胞中调节外源基因表达的作用,为人类白血病动物模型的建立提供理论依据。方法:利用生物信息学手段预测并克隆出猪CD4基因启动子,然后利用克隆的猪CD4基因启动子构建和包装慢病毒载体。包装的病毒经过滴度检测和侵染293T细胞及Jurkat细胞后进行绿色荧光蛋白检测,比较猪CD4基因启动子与EF-1α启动子启动的外源基因表达情况。结果:成功预测出猪CD4基因启动子,成功构建慢病毒载体并包装出病毒。经过病毒滴度测定及侵染293T细胞和Jurkat细胞表明,2种启动子在细胞中的启动绿色荧光蛋白的效果相近。结论:猪CD4基因启动子在白血病Jurkat细胞中没有特异性启动外源基因,猪CD4基因启动子可以作为一种在Jurkat细胞中启动外源基因的不同选择。; 关键词 CD4基因慢病毒 JURKAT细胞 293T细胞启动子; Keywords CD4 gene lentiviral Jurkat cells 293T cells promoter; 分类号 R733.7 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名ER81在白消安模型小鼠睾丸和附睾中的表达及其意义: 4; 作者金波刘洋车冠宇孙艺学张学明; 机构吉林大学畜牧兽医学院动物胚胎工程吉林省重点实验室; 出处《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期180-182,共3页; 基金国家自然科学基金资助课题(30771555) 吉林大学基本科研业务费资助课题(20090333); 文摘目的:检测Ets家族转录因子ER81在白消安模型小鼠睾丸及附睾中的表达水平,探讨其对精原细胞增殖和分化的影响。方法:成年小鼠腹腔注射白消安10 mg.kg-1,分别在注射后第0、3、5、8、10和18天取睾丸和附睾,半定量RT-PCR分析ER81 mRNA的相对表达量。结果:在睾丸组织内,与第0天比较,ER81的表达量在第5天显著降低(P<0.01),随后基本恢复;在附睾组织内,与第0天比较,ER81表达量于第8天显著降低(P<0.05),并随后恢复。结论:转录因子ER81可能对精原细胞的分化有调节作用。; 关键词 Ets家族转录因子ER81 睾丸附睾白消安小鼠; Keywords Ets family transcription factor ER81 testis epididymis busulfan mouse; 分类号 S814.1 [农业科学—畜牧学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名PIWIL1基因启动子调控的特异表达Cre重组酶的转基因猪的构建: 5; 作者段新平高飞武蓉宋奇韩杨姚潮刚纪元; 机构吉林大学畜牧兽医学院动物胚胎工程吉林省重点实验室; 出处《安徽农业科学》 CAS 2012年第9期5231-5233,共3页; 基金国家重点基础研究发展计划(973计划)资助(2011CB944203); 文摘 [目的]建立PIWIL1基因启动子调控的特异性表达Cre重组酶的转基因猪,为研究piRNA及其相关基因的功能和机制奠定基础。[方法]通过PCR扩增,从猪的全基因组上扩增出PIWIL1基因的启动子。切除猪源Cre重组酶的表达载体pET28a-MHC-Cre-BGHpo1yA-FRT2neor的启动子MHC,将其与PIWIL1基因启动子连接,构建成特异性表达Cre重组酶的pPIWIL1-Cre载体。将该载体转染小型猪胎儿成纤维细胞,通过G418筛选,获得阳性克隆进行核移植。[结果]获得2头PIWIL1基因启动子调控的特异表达Cre酶的转基因猪。[结论]成功构建了PIWIL1基因启动子调控的特异表达Cre重组酶的转基因猪,为研究piRNA及其相关基因的功能和机制提供了工具猪。; 关键词 PIRNA PIWIL1 Cre酶转基因猪; Keywords piRNA PIWIL1 Cre enzyme Transgenic swine; 分类号 S828 [农业科学—畜牧学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名表达Cre重组酶Cre-pCEP4载体的构建及其在Cre/loxP重组系统中的应用: 6; 作者周杨朱建国唐小春闫森宋娜张明军李莉欧阳红生逄大欣; 机构吉林大学畜牧兽医学院动物胚胎工程吉林省重点实验室; 出处《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期196-201,F0002,共7页; 基金国家自然科学基金资助课题(30771582 130871841); 文摘目的:构建表达Cre重组酶的载体Cre-pCEP4,并验证其能够有效识别loxP位点,为人类疾病动物模型的建立提供依据。方法:构建重组载体Cre-pCEP4和pStop-eGFP,利用Fugene HD转染猪胚胎成纤维细胞(PEF)和MCF-7细胞系,利用荧光显微镜观察绿色荧光蛋白表达情况。结果:成功构建重组载体Cre-pCEP4和pStop-eGFP,将2个载体瞬时共转染PEF;经潮酶素B筛选出Cre重组酶稳定表达的MCF-7细胞系瞬时转染pStop-eGFP,在荧光显微镜下观察2种细胞均有绿色荧光蛋白的表达。而单独转染pStop-eGFP的MCF-7细胞系和PEF均未见绿色荧光蛋白的表达。结论:重组载体Cre-pCEP4在细胞内能够表达Cre重组酶,并且表达的Cre重组酶能够识别loxP位点,删除两同向loxP间的DNA片段。; 关键词 Cre-pCEP4 CRE/LOXP重组系统猪胚胎成纤维细胞 MCF-7细胞系; Keywords Cre-pCEP4； Cre／loxP syste m； porcine e mbryonic fibroblasts； MCF-7 cell line; 分类号 Q291 [生物学—细胞生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	骨骼肌特异性表达猪FSⅠ-Ⅰ转基因猪胚胎成纤维细胞克隆的构建与鉴定	袁婷刘帅李小平唐成程韩晓蕾逄大欣欧阳红生	《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心	2012	0	在线阅读下载PDF 职称材料
2	转录因子Ets1和Ets2在小鼠睾丸组织中的表达及其意义	刘洋金波郭斌赵丽红韩玉帅岳占碰张学明	《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心	2011	2	在线阅读下载PDF 职称材料
3	慢病毒介导的猪CD4启动子在白血病Jurkat细胞中的启动作用	林晓晨杨鑫曹宇航焦丽戴甄任林柱逄大欣	《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心	2012	0	在线阅读下载PDF 职称材料
4	ER81在白消安模型小鼠睾丸和附睾中的表达及其意义	金波刘洋车冠宇孙艺学张学明	《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心	2012	0	在线阅读下载PDF 职称材料
5	PIWIL1基因启动子调控的特异表达Cre重组酶的转基因猪的构建	段新平高飞武蓉宋奇韩杨姚潮刚纪元	《安徽农业科学》 CAS	2012	0	在线阅读下载PDF 职称材料
6	表达Cre重组酶Cre-pCEP4载体的构建及其在Cre/loxP重组系统中的应用	周杨朱建国唐小春闫森宋娜张明军李莉欧阳红生逄大欣	《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心	2011	0	在线阅读下载PDF 职称材料