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A Single-chain Antibody for One-pot Fabrication of Luminescent Gold Nanoclusters and Rabies Virus Imaging in Cells
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作者 ZHANG Chunxia XI Hualong +4 位作者 SUN Bo WU Yongge JIANG Chunlai YU Xianghui WU Yuqing 《发光学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2024年第10期1732-1740,共9页
The fragile antibody leads to a great challenge as a scaffold to fabricate the luminescent metal nanoclusters using one-pot method.This study presents a stable single-chain anti-body(scFv57R-ATS)for the fabrication of... The fragile antibody leads to a great challenge as a scaffold to fabricate the luminescent metal nanoclusters using one-pot method.This study presents a stable single-chain anti-body(scFv57R-ATS)for the fabrication of luminescent gold nanoclusters(AuNCs@scFv57R-ATS)and a quick,sensitive rabies virus detection in living cells.In this paper,AuNCs@scFv57R-ATS was designed to specifically recognize antigen RV in modified HeLa cells,which promoted the demonstration of metal nanocluster fluorescent probes for antigen targeting and therapy. 展开更多
关键词 gold nanoclusters scFv57R-ATS rabies virus
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普鲁兰多糖的粘度性质研究 被引量:23
2
作者 滕利荣 洪水声 +4 位作者 孟庆繁 陈佳 王亚军 吴敏 刘兰英 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2003年第10期32-35,共4页
研究了温度、pH、变性剂(脲)及金属离子(Mg2+、Cu2+、Fe2+、Ca2+、Mn2+、Na+)对普鲁兰(Pull)溶液粘度的影响,发现在10~20℃时,Pull溶液的粘度略有增加,在20~70℃,其粘度基本保持不变;溶液的pH对Pull的粘度影响很小;变性剂会使Pull的... 研究了温度、pH、变性剂(脲)及金属离子(Mg2+、Cu2+、Fe2+、Ca2+、Mn2+、Na+)对普鲁兰(Pull)溶液粘度的影响,发现在10~20℃时,Pull溶液的粘度略有增加,在20~70℃,其粘度基本保持不变;溶液的pH对Pull的粘度影响很小;变性剂会使Pull的粘度略有增加;而金属离子对Pull溶液的粘度有显著影响,其中Mg2+使Pull溶液的粘度增加最大,Na+的影响最小。分子量的测定表明,其粘度的增加是由于其分子量的增大造成的。 展开更多
关键词 普鲁兰多糖 粘度 Pull溶液 温度 PH 变性剂
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六神曲发酵过程中5种消化酶的动态分析 被引量:29
3
作者 徐云 郑璐 +2 位作者 相宏宇 朱洪亮 谢秋宏 《中国酿造》 CAS 2012年第10期43-45,共3页
该文主要通过对六神曲发酵过程中产生的5种消化酶进行了系统而全面的分析,确定了六神曲的最佳成熟时间。研究发现,发酵过程中产生的5种消化酶存在规律性变化:糖化酶活力在发酵第3d时达到高峰,淀粉酶、纤维素酶和脂肪酶的活力在发酵4d时... 该文主要通过对六神曲发酵过程中产生的5种消化酶进行了系统而全面的分析,确定了六神曲的最佳成熟时间。研究发现,发酵过程中产生的5种消化酶存在规律性变化:糖化酶活力在发酵第3d时达到高峰,淀粉酶、纤维素酶和脂肪酶的活力在发酵4d时达到高峰,之后4种酶活力均有所下降并逐渐趋于平稳;蛋白酶活力在发酵前4d变化不大,之后随发酵时间的延长活力显著增加。最终确定六神曲发酵的成熟时间为4d~6d,为六神曲的工艺及质量控制提供依据。消化酶的活力变化可以作为控制六神曲发酵工艺及质量评价的指标。 展开更多
关键词 六神曲 消化酶 动态分析 工艺控制 质量评价
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蛹虫草菌丝体胞内多糖热水浸提工艺探究 被引量:11
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作者 项玥 唐芳荣 +3 位作者 昌艳 李婷婷 滕利荣 陈亚光 《食品研究与开发》 CAS 北大核心 2008年第8期12-16,共5页
对蛹虫草菌丝体胞内多糖提取条件进行了研究,首先通过单因素实验选取实验因素与水平,在单因素实验的基础上研究了温度、时间、水料比对多糖提取率的影响,其中温度影响较大,同时对3个因素进行合理优化,找出最优提取条件,并进行验证,以便... 对蛹虫草菌丝体胞内多糖提取条件进行了研究,首先通过单因素实验选取实验因素与水平,在单因素实验的基础上研究了温度、时间、水料比对多糖提取率的影响,其中温度影响较大,同时对3个因素进行合理优化,找出最优提取条件,并进行验证,以便提高多糖提取率。结果表明:在热水提取温度为74℃,提取时间为2.2 h,水料比是30:1(mL:g)的情况下,得到最大提取率5.49%。 展开更多
关键词 蛹虫草 胞内多糖 响应面法 热水浸提
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A study on photosynthetic characteristics of Betula platyphylla 被引量:8
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作者 周玉梅 杨传平 +3 位作者 王淑娟 吴月亮 王文章 韩士杰 《Journal of Forestry Research》 SCIE CAS CSCD 2002年第3期209-212,共4页
Influences of temperature, humidity, and CO2 concentration on the photosynthesis and respiration of three-year-oldBetula platyphylla was investigated. Light compensation point, saturation point and CO2 compensation po... Influences of temperature, humidity, and CO2 concentration on the photosynthesis and respiration of three-year-oldBetula platyphylla was investigated. Light compensation point, saturation point and CO2 compensation point were also determined. The results showed that the optimal temperature of photosynthesis and dark respiration was 24 °C and 30 °C, respectively, at ambient CO2. When relative humidity was 80%,Betula platyphylla could maintain strong photosynthesis. There was no significant correlation between respiration and relative humidity. The light compensation and saturation point was 25 μmol·m?2·s?1 and 1 375 μmol·m?2·s?1, respectively. The CO2 compensation point was 180 μL·L?1. The results showed thatBetula platyphylla still had potential to assimilate CO2 when CO2 concentration was above 2 400 μL·L?1. 展开更多
关键词 Betula platyphylla PHOTOSYNTHESIS RESPIRATION CO2 concentration
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肺组织灌注前后双向电泳的比较 被引量:12
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作者 李圣青 赵峰 +7 位作者 戚好文 张晓君 赵馨 潘刚 吴哲 王宇 阙海萍 刘少君 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期203-206,共4页
目的寻找更加有效的双向电泳方法以展示肺组织蛋白。方法取6只Wistar大鼠随机分为对照组和灌注组,用丙酮/三氯醋酸法提取肺组织蛋白并进行双向电泳分离,将2-D胶银染后用ImageScanner扫描仪扫描,采用ImageMaster 2-D Elite 3.10软件进行... 目的寻找更加有效的双向电泳方法以展示肺组织蛋白。方法取6只Wistar大鼠随机分为对照组和灌注组,用丙酮/三氯醋酸法提取肺组织蛋白并进行双向电泳分离,将2-D胶银染后用ImageScanner扫描仪扫描,采用ImageMaster 2-D Elite 3.10软件进行图象分析。结果对照组2-D胶的蛋白点计数为1 095±5,灌注组蛋白点计数为1 569±10。在分子质量30-70 ku范围内,灌注组的蛋白点计数显著高于对照组(P<0.01),在其他分子质量范围内二者蛋白点计数无显著性差异。在pH值5-8、9-10范围内,灌注组的蛋白点计数显著高于对照组(P<0.01),在其他pH值范围内二者蛋白点计数无显著性差异。结论生理盐水灌注法可显著减少肺组织中的血液蛋白成分,使得肺组织蛋白可以更好的在2-D胶上展示。 展开更多
关键词 双向电泳 肺组织 灌注
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膜修饰脂质体对缺氧心肌细胞的保护作用 被引量:4
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作者 邓英杰 陈妍 +3 位作者 陈勇 郝艳丽 张勇 王汀 《沈阳药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期299-302,共4页
目的考察亲脂性化合物3{4[2羟基(1甲基乙胺基)丙氧基]苯基}丙酸十六醇酯(PAC)膜修饰脂质体对缺氧心肌细胞的保护作用。方法将普通脂质体(Plain L)、PAC膜修饰脂质体(PAC L)分别于常氧和缺氧条件下与乳鼠心肌细胞共同培养1、22、4 h,荧... 目的考察亲脂性化合物3{4[2羟基(1甲基乙胺基)丙氧基]苯基}丙酸十六醇酯(PAC)膜修饰脂质体对缺氧心肌细胞的保护作用。方法将普通脂质体(Plain L)、PAC膜修饰脂质体(PAC L)分别于常氧和缺氧条件下与乳鼠心肌细胞共同培养1、22、4 h,荧光法测定正常与缺氧心肌细胞对脂质体的摄取,以不加脂质体的细胞为对照,台盼兰染色法测定心肌细胞存活率。结果在常氧状态下1、2、24 h心肌细胞对PAC L的摄取较Plain L分别高约3.97、3.87、4.27倍,而在缺氧状态下心肌细胞对PAC-L的摄取较Plain L分别高约4.26、6.24、29.51倍。当细胞连续缺氧24 h时,对照组、Plain L组、PAC L组的心肌细胞存活率分别为7.8%、29.7%、95.4%。结论与Plain L相比,PAC L对缺氧状态的心肌细胞具有较强的亲和性,脂质体的加入能够明显降低缺氧对心肌细胞的损伤,PAC L对缺氧心肌细胞具有较强的保护作用,效果明显优于Plain L,且随着缺氧时间的延长这种优势越显著。 展开更多
关键词 PAC膜修饰脂质体 普通脂质体 心肌细胞 缺氧 保护作用
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哮喘大鼠淋巴细胞蛋白质组的分析 被引量:3
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作者 李善玉 范佳 +7 位作者 席景会 张海玉 杜宏伟 周欣 王旭 宁波 刘兰英 郝东云 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2007年第9期1696-1700,共5页
通过建立卵蛋白(Ovalbumin,OVA)致敏的Wistar大鼠哮喘动物模型,利用二维凝胶电泳及MALDI-TOF-MS分析技术,对哮喘大鼠与正常大鼠脾脏淋巴细胞差异表达蛋白质进行鉴定和分析.结果显示,在哮喘组中呈现高表达的蛋白质,包括胶原蛋白调控蛋白... 通过建立卵蛋白(Ovalbumin,OVA)致敏的Wistar大鼠哮喘动物模型,利用二维凝胶电泳及MALDI-TOF-MS分析技术,对哮喘大鼠与正常大鼠脾脏淋巴细胞差异表达蛋白质进行鉴定和分析.结果显示,在哮喘组中呈现高表达的蛋白质,包括胶原蛋白调控蛋白质(hnRNP)以及细胞结构蛋白(Fibrinogen).而与代谢相关的蛋白质(CoQ10)和线粒体内膜蛋白,在哮喘组中呈低表达.研究结果表明,这些蛋白质与哮喘气道慢性炎症、气道高反应性和气道的重构有关. 展开更多
关键词 支气管哮喘 淋巴细胞 蛋白质组 二维电泳/质谱
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虎源高致病性禽流感病毒H5N1在实验小鼠体内分布与含量测定 被引量:4
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作者 常爽 郑晓一 +3 位作者 杨松涛 邹啸环 丁壮 夏咸柱 《动物医学进展》 CSCD 2006年第5期56-59,共4页
将本实验室分离、鉴定的虎源高致病性禽流感病毒A/Tiger/Harbin/01/2003(H5N1)株第3代鸡胚尿囊液进行10-3倍稀释,接种小鼠,待小鼠死亡后无菌采取心、肝、脾、肺、肾、脑六种脏器分别研磨制成乳剂,接种MDCK细胞,以细胞病变为判定指标,计... 将本实验室分离、鉴定的虎源高致病性禽流感病毒A/Tiger/Harbin/01/2003(H5N1)株第3代鸡胚尿囊液进行10-3倍稀释,接种小鼠,待小鼠死亡后无菌采取心、肝、脾、肺、肾、脑六种脏器分别研磨制成乳剂,接种MDCK细胞,以细胞病变为判定指标,计算病死小鼠不同脏器内病毒含量。同时用RT-PCR、血凝-血凝抑制试验以及电镜负染的方法进行鉴定和观察。结果显示,可在小鼠的肺脏、肝脏、肾脏、脑组织中检出所接种的病毒,肺脏中的病毒含量最高,脑中的病毒含量次之,肝脏和肾脏中的病毒含量最少。可在肺、肝、肾、脑组织与感染细胞培养物中扩增出与理论值一致的核酸条带,肺乳剂上清液感染细胞培养物中可检出1∶23的血凝效价,电镜观察在肺乳剂上清液及其感染细胞培养物中可见到典型的流感病毒颗粒。 展开更多
关键词 虎源高致病性禽流感病毒 小鼠 体内分布 含量测定
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犬冠状病毒基因疫苗表达载体的构建及其免疫原性研究 被引量:2
10
作者 乔军 夏咸柱 +4 位作者 杨松涛 郝峰 高玉伟 郑晓一 黄耕 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期412-416,共5页
以pVAX1为载体首次构建了犬冠状病毒病基因的3种真核表达质粒。首先将犬冠状病毒大熊猫株(CCV DXMV)纤突蛋白(S)、膜蛋白(M)和核蛋白(N)基因进行了克隆和序列测定。将测序后的质粒pTS、pTM和pTN分别双酶切,回收目的基因片段并将其定向... 以pVAX1为载体首次构建了犬冠状病毒病基因的3种真核表达质粒。首先将犬冠状病毒大熊猫株(CCV DXMV)纤突蛋白(S)、膜蛋白(M)和核蛋白(N)基因进行了克隆和序列测定。将测序后的质粒pTS、pTM和pTN分别双酶切,回收目的基因片段并将其定向克隆到真核表达质粒pVAX1中得到重组质粒pVAXS、pVAXM和pVAXN。将这3种真核表达质粒通过脂质体介导法转染MDCK细胞,通过RT-PCR法进行转录水平的检测,并用间接ELISA法检测目的蛋白的表达情况。结果在pVAXS、pVAXM、pVAXN转染MDCK细胞36 h后就可检测到目的基因的转录;在转染72 h后可检测到3种目的蛋白的表达。动物免疫试验表明,3种真核表达载体能有效地诱导机体产生细胞免疫与体液免疫应答,这为CCV基因疫苗的研究奠定了良好的基础。 展开更多
关键词 犬冠状病毒 基因疫苗表达载体 构建 免疫原性
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玉米浆、豆饼粉浓度对蛹虫草菌丝体胞外多聚物产量的影响 被引量:1
11
作者 唐芳荣 昌艳 +3 位作者 项玥 李婷婷 滕利荣 王德利 《食品研究与开发》 CAS 北大核心 2008年第8期26-29,共4页
对价格昂贵的真菌蛹虫草来说,传统工业废料玉米浆、豆饼粉是一种很好的高效且廉价的培养基,试验从单因素入手分别研究两种废料对胞外多聚物产出率的影响进而应用响应面方法优化培养条件,从而达到扩大培养并降低成本的目的。结果表明:在... 对价格昂贵的真菌蛹虫草来说,传统工业废料玉米浆、豆饼粉是一种很好的高效且廉价的培养基,试验从单因素入手分别研究两种废料对胞外多聚物产出率的影响进而应用响应面方法优化培养条件,从而达到扩大培养并降低成本的目的。结果表明:在玉米浆浓度为16.41%,豆饼粉浓度为14.32%时,胞外多聚物产量有最大值62.74 g/L。 展开更多
关键词 响应面法 玉米浆 豆饼粉 蛹虫草 胞外多聚物
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The effect of exogenous sugar solution and high concentration of CO_2 on the contents of sugar and protein of Betula platyphylla leaves 被引量:1
12
作者 周玉梅 杨传平 +3 位作者 王淑娟 吴月亮 王文章 韩士杰 《Journal of Forestry Research》 SCIE CAS CSCD 2003年第1期61-63,共3页
The content of total sugar, sucrose, fructose and protein in the leaves of3-yr.-old Betula platyphylla was measured after the treatment by three exogenous sugar solutions(sucrose, fructose, glucose) and three high con... The content of total sugar, sucrose, fructose and protein in the leaves of3-yr.-old Betula platyphylla was measured after the treatment by three exogenous sugar solutions(sucrose, fructose, glucose) and three high concentrations of CO_2 (700, 1 400, 2 100 μL/L·L^(-1))for about a month in 1998. The results showed that spraying three exogenous sugar solutionsincreased markedly the content of sugar and protein of leaves under 700 μL·L^(-1) and 1 400μL·L^(-1) CO_2 The effect of spraying exogenous sucrose solution was the best among the threeexogenous sugars. The treatment of spraying exogenous sugar solution and 2 100 μL·L^(-1) CO_2constrained the accumulation of total sugar and protein of leaves. There was no difference inprotein content of leaves when spraying glucose and fructose solutions under 700 μL·L^(-1) and 1400 μL·L^(-1) CO_2. The treatment of 2 100 μL·L^(-1) CO_2 concentration significantly increasedthe contents of total sugar, sucrose, fructose, and protein of leaves compared with that of the 700μL·L^(-1) and 1 400 μL·L^(-1) CO_2 except the plants spraying fructose solution. There waspositive correlation between the content of sugar of leaves and CO_2 concentration when sprayingsame exogenous sugar solution. 展开更多
关键词 EXOGENOUS SUGAR PROTEIN high CO_2 betula platyphylla
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HIV-1核酸疫苗与重组病毒免疫程序的研究
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作者 郭焱 郭巍 张应玖 《长春中医学院学报》 2002年第1期46-46,共1页
关键词 核酸疫苗 重组病毒 免疫程序
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返魂草颗粒抗氧化部位分析及活性研究
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作者 贾东旭 唐燕 +4 位作者 周婷婷 王春驰 高娜 朱迪夫 高其品 《长春中医药大学学报》 2019年第6期1129-1134,共6页
目的分析返魂草颗粒中抗氧化部位,考察返魂草提取物抗氧化活力,探讨返魂草提取物在抗氧化方面的作用。方法通过高温处理建立人支气管细胞16HBE的氧化应激模型,测定返魂草提取物在该模型中对自由基清除能力和对氧化应激细胞模型中的胞内... 目的分析返魂草颗粒中抗氧化部位,考察返魂草提取物抗氧化活力,探讨返魂草提取物在抗氧化方面的作用。方法通过高温处理建立人支气管细胞16HBE的氧化应激模型,测定返魂草提取物在该模型中对自由基清除能力和对氧化应激细胞模型中的胞内活性氧(reactive oxygen species, ROS)水平、总抗氧化能力和抗氧化酶活力的影响。结果返魂草提取物醇洗部分浓度为50 μg/mL时对DPPH自由基清除率达到68.91%,并且从该部分鉴别出的9种酚酸类成分表现出较强的DPPH清除效果;返魂草提取物醇洗部分显著降低高温诱导的人支气管细胞16HBE胞内ROS水平,并以剂量依赖性方式增加T-AOC、GSH水平和SOD、CAT等抗氧化酶活力。结论返魂草提取物醇洗部分主要成分为酚酸类物质,通过清除自由基、提升抗氧化酶活力和抗氧化物质水平有效降低细胞内氧化应激水平。 展开更多
关键词 返魂草颗粒 酚酸 16HBE 抗氧化 自由基清除
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小肽免疫抑制剂的活性研究 被引量:1
15
作者 苏丹 孙兆黎 +2 位作者 李一 周慧 李惟 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2001年第10期1744-1747,共4页
用标准的 Fmoc保护氨基酸 Nα 氨基的固相法合成了 6肽 Ac-XCSSXX-NH2 (— CSS—为保守序列 ,该设计合成的 6肽是从若干单克隆中挑选出与 IL-2结合力最高的 ) ,经 HPLC纯化 ,并通过 MS检测 .分别以Con A诱导的淋巴细胞转化实验和 IL-2... 用标准的 Fmoc保护氨基酸 Nα 氨基的固相法合成了 6肽 Ac-XCSSXX-NH2 (— CSS—为保守序列 ,该设计合成的 6肽是从若干单克隆中挑选出与 IL-2结合力最高的 ) ,经 HPLC纯化 ,并通过 MS检测 .分别以Con A诱导的淋巴细胞转化实验和 IL-2诱导的淋巴母细胞转化实验为体外模型 ,以大鼠肝脏移植为体内模型 ,观察小肽对移植排斥的影响 .在 Con A诱导的淋转实验中 ,加入小肽 ( 2 5 0~ 31 .2 5 μg/m L)对淋转反应有明显的抑制作用 ( P 0 .0 1 ) ,在终浓度为 31 .2 5μg/m L时 ,抑制率达到最高 .IL-2诱导的淋转实验得到与上述相符的结果 ,从而进一步表明 :小肽是通过抑制 IL-2和 IL-2 R的结合从而实现其免疫抑制作用的 .在大鼠肝脏移植模型中 :给术后大鼠注射小肽共 5 d( 1 0 mg/kg) 展开更多
关键词 小肽 免疫抑制剂 噬菌体肽库 器官移植 白细胞介素-2受体 α链 生物活性 白细胞介素2 移植排斥反应 治疗
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用弱化dhfr双顺反子载体在CHO细胞中高效表达低分子量尿激酶突变体 被引量:1
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作者 潘淑媛 高丽华 +6 位作者 胡显文 杨波 殷亮 胥照平 张正光 郗永义 陈惠鹏 《高技术通讯》 CAS CSCD 北大核心 2006年第8期834-840,共7页
将二氢叶酸还原酶基因(dhfr)克隆至pIRES载体中弱化的脑心肌炎病毒(ECMV)内部核糖体进入位点(IRES)的下游,构建了含有弱化dhfr筛选标记和可用氨甲蝶呤(MTX)加压提高表达水平的双顺反子真核表达载体pIRES—dhfr。利用该表达载... 将二氢叶酸还原酶基因(dhfr)克隆至pIRES载体中弱化的脑心肌炎病毒(ECMV)内部核糖体进入位点(IRES)的下游,构建了含有弱化dhfr筛选标记和可用氨甲蝶呤(MTX)加压提高表达水平的双顺反子真核表达载体pIRES—dhfr。利用该表达载体表达了一种无糖基化和具有凝血酶抗性的低分子量尿激酶型纤溶酶原激活剂(LMW—uPA)突变体(缺失尿激酶原的1—143位氨基酸,Arg156→Lys,Asn302→Ala),用脂质体转染方法将表达载体pIRES—dhfr/LMW—UK转染CHO—dhfr-细胞后经过一轮MTX筛选,几乎所有获得的单克隆细胞株都表达LMW—UK,其中约50%为表达水平较接近(500—5000IU/10^6cells/d)的高表达阳性克隆。用转瓶无血清培养表达水平约为17.5pg/cell/d的rCHO细胞系LB2-UK,收集的上清经过阳离子交换柱和凝胶过滤层析两步纯化后,获得的重组蛋白的纯度可以达到99%。用S-2444发色底物法检测,所获得的突变体双链UK比例大于98%。 展开更多
关键词 低分子量尿激酶 突变体 内部核糖体进入位点 二氢叶酸还原酶基因 重组CHO细胞
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