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嗜热古细菌Sulfolobus tokodaii脱卤酶在D-乳酸生产中的应用
被引量：
4
1
作者
解桂秋
潘东
+2 位作者
何文龙
高贵
高仁钧
《高等学校化学学报》
SCIE
EI
CAS
CSCD
北大核心
2015年第4期698-703,共6页
将来源于嗜热古菌Sulfolobus tokodaii的脱卤酶(L-HADST)基因克隆到载体p ET28b,转化大肠杆菌BL21(DE3)进行表达,在蛋白的N末端带有6个组氨酸融合标签,纯化后经聚丙烯酰胺凝胶电泳显示融合蛋白的分子量约为25000.融合蛋白催化2-氯丙酸(2...
将来源于嗜热古菌Sulfolobus tokodaii的脱卤酶(L-HADST)基因克隆到载体p ET28b,转化大肠杆菌BL21(DE3)进行表达,在蛋白的N末端带有6个组氨酸融合标签,纯化后经聚丙烯酰胺凝胶电泳显示融合蛋白的分子量约为25000.融合蛋白催化2-氯丙酸(2-CPA)的最适反应温度为70℃,最适p H值为9.5.以外消旋2-CPA为底物生产D-乳酸,利用HPLC检测反应液中2-CPA及乳酸的变化,发现L-HADST只催化L-2-CPA脱氯反应.对酶催化反应条件进行了优化,结果表明,在p H值为9.5,温度为60℃的条件下,当反应体系中缓冲液浓度为3 mol/L,底物浓度为0.5 mol/L,酶浓度为3×104U/L时有较高的底物转化率及乳酸生成量.依据条件优化结果可知,影响反应速度的因素有底物浓度、缓冲液浓度以及酶浓度,其中底物浓度变化对转换率的影响最明显.
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关键词
L-2-卤代酸脱卤酶
2-氯丙酸
乳酸
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职称材料
题名
嗜热古细菌Sulfolobus tokodaii脱卤酶在D-乳酸生产中的应用
被引量：
4
1
作者
解桂秋
潘东
何文龙
高贵
高仁钧
机构
吉林大学
药
学院
吉林大学生命科学学院、分子酶学工程教育部重点实验室
出处
《高等学校化学学报》
SCIE
EI
CAS
CSCD
北大核心
2015年第4期698-703,共6页
基金
国家自然科学基金(批准号:20772046)
吉林省科技研究和发展计划项目(批准号:201105011)资助~~
文摘
将来源于嗜热古菌Sulfolobus tokodaii的脱卤酶(L-HADST)基因克隆到载体p ET28b,转化大肠杆菌BL21(DE3)进行表达,在蛋白的N末端带有6个组氨酸融合标签,纯化后经聚丙烯酰胺凝胶电泳显示融合蛋白的分子量约为25000.融合蛋白催化2-氯丙酸(2-CPA)的最适反应温度为70℃,最适p H值为9.5.以外消旋2-CPA为底物生产D-乳酸,利用HPLC检测反应液中2-CPA及乳酸的变化,发现L-HADST只催化L-2-CPA脱氯反应.对酶催化反应条件进行了优化,结果表明,在p H值为9.5,温度为60℃的条件下,当反应体系中缓冲液浓度为3 mol/L,底物浓度为0.5 mol/L,酶浓度为3×104U/L时有较高的底物转化率及乳酸生成量.依据条件优化结果可知,影响反应速度的因素有底物浓度、缓冲液浓度以及酶浓度,其中底物浓度变化对转换率的影响最明显.
关键词
L-2-卤代酸脱卤酶
2-氯丙酸
乳酸
Keywords
L-2-Haloacid dehalogenase
2-Chloropropionic acid
Lactic acid
分类号
O621.25 [理学—有机化学]
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作者
出处
发文年
被引量
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1
嗜热古细菌Sulfolobus tokodaii脱卤酶在D-乳酸生产中的应用
解桂秋
潘东
何文龙
高贵
高仁钧
《高等学校化学学报》
SCIE
EI
CAS
CSCD
北大核心
2015
4
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