单细胞凝胶电泳技术在胚胎毒性实验中的应用 被引量：2

1

作者 李树蕾 周莉 +4 位作者 陈辉 黄可欣 聂毓秀 鄢励 刘颖丽 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期124-126,共3页

目的 :探讨和分析单细胞凝胶电泳技术 ( SCGE)的影响因素和实验中应该注意的环节。方法 :通过对实验方法和操作技术的总结 ,对 Singh提出的碱性 SCGE进行适当的补充。结果 :完善了 SCGE的操作 ,获得了典型的彗星图像。结论 :在实验中避... 目的 :探讨和分析单细胞凝胶电泳技术 ( SCGE)的影响因素和实验中应该注意的环节。方法 :通过对实验方法和操作技术的总结 ,对 Singh提出的碱性 SCGE进行适当的补充。结果 :完善了 SCGE的操作 ,获得了典型的彗星图像。结论 :在实验中避免非特异性因素的影响 ,注意实验操作细节 ,能够增加 展开更多

关键词 单细胞凝胶电泳 胚胎毒性 应用 动物实验 彗星图像 SCGE

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混合稀土常乐对大鼠肝脏酶组织化学活性的影响 被引量：2

2

作者 夏青 陈东 董智勇 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期20-22,共3页

目的 :探讨在不同剂量农用混合稀土常乐的作用下 ,大鼠肝脏酶活性的变化及作用机理。方法 :以 Wis-tar大鼠为研究对象 ,连续用生理盐水和 2 0 .0、 5 .0、 2 .0 m g· kg- 1 常乐灌胃 3个月 ,每日 1次。应用酶组织化学技术 ,观察大... 目的 :探讨在不同剂量农用混合稀土常乐的作用下 ,大鼠肝脏酶活性的变化及作用机理。方法 :以 Wis-tar大鼠为研究对象 ,连续用生理盐水和 2 0 .0、 5 .0、 2 .0 m g· kg- 1 常乐灌胃 3个月 ,每日 1次。应用酶组织化学技术 ,观察大鼠肝脏的琥珀酸脱氢酶 (SDHase)、葡萄糖 6磷酸酶 (G- 6 - Pase)及三磷酸腺苷酶 (Ca2 + - ATPase)的变化。结果 :与对照组比较 ,5 .0和 2 .0 m g· kg- 1 组酶活性颗粒变化不明显 ,2 0 .0 m g· kg- 1 组 SDHase、 G- 6 -Pase和 Ca2 + - ATPase酶活性颗粒均明显减少。结论 :给予不同剂量的混合稀土常乐 ,对大鼠肝脏酶活性有影响 ,其中以 2 0 .0 mg· kg- 1 展开更多

关键词 肝/酶学 琥珀酸脱氢酶/分析 葡萄糖-6-磷酸酶/分析 腺苷三磷酸酶/分析 常乐

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非小细胞肺癌组织中angiostatin与VEGF mRNA的转录表达及临床病理意义

3

作者 高英 郝利铭 +2 位作者 张玲 王睿 田大力 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期365-366,共2页

目的探讨血管抑素(AS)与血管内皮生长因子(VEGF)在非小细胞肺癌(NSCLC)发展过程中的作用及意义。方法采用RT-PCR方法检测48例NSCLC癌组织及癌旁肺组织中AS和VEGF mRNA的转录表达,探讨其表达水平与NSCLC临床病理特征的关系。结果AS和VEGF... 目的探讨血管抑素(AS)与血管内皮生长因子(VEGF)在非小细胞肺癌(NSCLC)发展过程中的作用及意义。方法采用RT-PCR方法检测48例NSCLC癌组织及癌旁肺组织中AS和VEGF mRNA的转录表达,探讨其表达水平与NSCLC临床病理特征的关系。结果AS和VEGF mRNA在肺癌组织中的表达均高于癌旁肺组织(P<0.05)。AS mRNA的表达与NSCLC的淋巴结转移及临床分期呈负相关(P<0.05)。VEGF mRNA的表达与NSCLC淋巴结转移及临床分期呈正相关(P<0.01),与组织分化程度呈负相关(P<0.05)。AS与VEGF间的表达无相关性(P>0.05)。结论NSCLC中AS和VEGF mRNA转录水平的增高,可以反映肺癌的恶性程度及癌细胞的侵袭转移能力,与NSCLC的发生及进展过程相关。 展开更多

关键词 非小细胞肺癌 血管抑素 血管内皮生长因子 临床病理

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红景天素抗老化和抗痴呆效应的实验研究 被引量：55

4

作者 姜文华 孟晓婷 +3 位作者 郝利铭 崔丽 董智勇 王淑兰 《白求恩医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期127-129,共3页

目的 :探讨药用植物红景天提取物——红景天素 ( Rhodosin)抗老化和抗痴呆效应。方法 :采用大鼠跳台、水迷宫实验 ,测定海马内乙酰胆碱 ( Ach)含量及胆碱乙酰转移酶 ( Ch AT)活性和脑组织内LPO含量、SOD活性 ,同时对海马神经细胞进行结... 目的 :探讨药用植物红景天提取物——红景天素 ( Rhodosin)抗老化和抗痴呆效应。方法 :采用大鼠跳台、水迷宫实验 ,测定海马内乙酰胆碱 ( Ach)含量及胆碱乙酰转移酶 ( Ch AT)活性和脑组织内LPO含量、SOD活性 ,同时对海马神经细胞进行结构状态及超微结构观测。结果 :红景天素对大鼠的学习记忆障碍有明显的改善作用 ,能增强海马中 Ach含量及 Ch AT活性 ,降低脑组织 LPO含量 ,增强SOD活性 ,阻抑大脑、海马的锥体细胞细胞器的退行性变化。结论 :红景天素对老龄大鼠有明显抗老化作用 ,对阿尔茨海默病 ( Alzheimer′s disease,AD)模型鼠具有防治、保护和抗痴呆效应。 展开更多

关键词 红景天素 抗老化 抗痴呆 大鼠 实验 阿尔茨海默病 老年性痴呆

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混合稀土常乐在孕鼠和胎鼠肝中的蓄积及对肝脏钙含量的影响 被引量：8

5

作者 董智勇 陈东 +3 位作者 刘颖 陈爱军 刘佳梅 聂毓秀 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期13-15,共3页

目的 :观察混合稀土常乐在孕鼠和胎鼠肝中的蓄积情况以及对钙 ( Ca2 + )含量的影响。方法 :采用电感耦合等离子体质谱法和电感耦合等离子体原子发射光谱法分别检测孕鼠和胎鼠肝中镧 ( La3 + )、铈 ( Ce3 + )、镨 ( Pr3 + )、钕 ( Nd3 + ... 目的 :观察混合稀土常乐在孕鼠和胎鼠肝中的蓄积情况以及对钙 ( Ca2 + )含量的影响。方法 :采用电感耦合等离子体质谱法和电感耦合等离子体原子发射光谱法分别检测孕鼠和胎鼠肝中镧 ( La3 + )、铈 ( Ce3 + )、镨 ( Pr3 + )、钕 ( Nd3 + )和钙含量变化。结果 :孕鼠 2 0 mg· kg-1常乐组肝中La3 + 、Ce3 + 和 Nd3 + 含量高于对照组 ( P <0 .0 5 ) ;孕鼠肝脏 Ca2 + 含量各实验组高于对照组( P<0 .0 5 )。结论 :孕鼠 2 0 mg· kg-1常乐组稀土元素在孕鼠肝中有蓄积 ,各实验组孕鼠肝脏钙含量均有变化 ; 展开更多

关键词 金属 稀土 肝 孕鼠 胎鼠 钙/代谢

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硝酸镧对大鼠脾脏形态及脾细胞IL-2和IFN-γ分泌水平的影响 被引量：8

6

作者 刘佳梅 陈东 +1 位作者 王晓明 聂毓秀 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期121-123,共3页

目的 :研究不同剂量硝酸镧作用不同时间对大鼠脾脏形态及机能的影响。方法 :取大鼠脾脏进行脾体比、常规组织学染色观察 ,同时取脾细胞进行淋巴细胞转化率试验及 IL- 2与 IFN- γ的测定。结果 :不同剂量硝酸镧灌胃 1个月后脾体比、脾脏... 目的 :研究不同剂量硝酸镧作用不同时间对大鼠脾脏形态及机能的影响。方法 :取大鼠脾脏进行脾体比、常规组织学染色观察 ,同时取脾细胞进行淋巴细胞转化率试验及 IL- 2与 IFN- γ的测定。结果 :不同剂量硝酸镧灌胃 1个月后脾体比、脾脏形态结构及免疫功能与对照组相比差异无显著性 ;不同剂量硝酸镧灌胃 6个月后脾体比及脾脏形态结构与对照组相比差异无显著性 ,但2 0 mg·kg-1的硝酸镧使脾淋巴细胞转化率下降 ,IL- 2和 IFN- γ水平有所下降 ,而 1 0 .0、2 .0、0 .2和 0 .1 mg·kg-1硝酸镧剂量组均可使大鼠脾淋巴细胞转化率升高 ,分泌 IL- 2和 IFN- γ水平上升。结论 :不同剂量硝酸镧灌胃 1个月对大鼠脾脏形态及免疫功能无明显影响 ;2 0 mg·kg-1的硝酸镧灌胃 6个月使大鼠脾脏细胞免疫功能下降 ,而 1 0 .0、2 .0、0 .2和 0 .1 mg· 展开更多

关键词 硝酸镧 IL0-2 IFN-Γ 脾脏形态 脾细胞 动物实验

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乳腺病变中CerbB2和Bcl2表达与细胞增殖抗原的关系 被引量：6

7

作者 王丽萍 陈东 +5 位作者 陈爱军 王晓明 张俊格 张元德 梁运梅 李雪梅 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期179-181,共3页

目的 :探讨乳腺病变中 Cerb B2和 Bcl2表达与细胞增殖状态的关系。方法 :对 1 1 1例乳腺病变的石蜡切片标本进行免疫组织化学染色。结果 :良性病变中导管内乳头状瘤病的 Cerb B2和Bcl2的表达高于乳腺纤维腺病和纤维腺瘤 ,差异具有显著性... 目的 :探讨乳腺病变中 Cerb B2和 Bcl2表达与细胞增殖状态的关系。方法 :对 1 1 1例乳腺病变的石蜡切片标本进行免疫组织化学染色。结果 :良性病变中导管内乳头状瘤病的 Cerb B2和Bcl2的表达高于乳腺纤维腺病和纤维腺瘤 ,差异具有显著性 ( P<0 .0 5 )。乳腺癌中 Cerb B2表达随PCNA增强而增高 ( P<0 .0 1 ) ,这种表达与肿瘤大小和组织学分级呈正比 ,与激素受体水平和 5年生存期呈反比。Bcl2表达随 PCNA增强而减弱 ( P<0 .0 1 ) ,这种表达与肿瘤组织学分级和淋巴结转移呈反比 ,与激素受体水平和 5年生存期呈正比。结论 :Cerb B2和 PCNA低表达、Bcl2高表达的乳腺患者肿瘤分化好 ,激素受体水平高 ,预后好。 Cerb B2和 展开更多

关键词 乳腺病变 CERBB2 BCL2 PCNA 细胞增殖抗原 乳腺癌 基因表达

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长期服用低剂量硝酸镧对大鼠心脏超氧化物歧化酶和脂质过氧化物含量的影响 被引量：6

8

作者 黄可欣 李冬梅 +1 位作者 李树蕾 聂毓秀 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期558-559,共2页

目的 :研究长期服用低剂量硝酸镧对大鼠心脏铜 -锌超氧化物歧化酶 ( Cu- Zn SOD)和脂质过氧化物 ( LPO)含量的影响。方法 :以 Wistar大鼠为对象 ,分别以每日 1次硝酸镧 0 .1、0 .2、2 .0、1 0 .0及 2 0 .0 mg· kg-1连续灌胃 6个月 ... 目的 :研究长期服用低剂量硝酸镧对大鼠心脏铜 -锌超氧化物歧化酶 ( Cu- Zn SOD)和脂质过氧化物 ( LPO)含量的影响。方法 :以 Wistar大鼠为对象 ,分别以每日 1次硝酸镧 0 .1、0 .2、2 .0、1 0 .0及 2 0 .0 mg· kg-1连续灌胃 6个月 ,应用生物化学方法研究大鼠心脏 Cu- Zn SOD和 LPO含量的变化。结果 :给予硝酸镧 6个月后 ,2 0 .0 mg· kg-1组 SOD含量较对照组显著降低 ,而 LPO的含量则显著升高 ;SOD的含量随给药剂量的增加而减少 ,LPO的含量随给药剂量的增加而增加。结论 :较高剂量 ( 2 0 .0、1 0 .0 mg·kg-1)硝酸镧的直接损伤可使大鼠心脏脂质过氧化加强 ,清除自由基的能力下降 ;较低剂量 ( 2 .0、0 .2及 0 .1 mg·kg-1)时 。 展开更多

关键词 硝酸盐类 投药 剂量 硝酸盐类 药理学 镧 超氧化物歧化酶 脂质体 过氧化物 心脏 药物作用 大鼠

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三氯化镧对大鼠肝癌细胞株CBRH-7919细胞生长的影响 被引量：8

9

作者 姜文华 陈东 +1 位作者 董智勇 孟晓婷 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期372-375,共4页

目的 :研究三氯化镧 (L a Cl3)对大鼠肝癌细胞生长的影响。方法 :以体外培养大鼠肝癌细胞株 CBRH-791 9为研究对象 ,给予 L a Cl3(0 .0 1、 0 .1 0及 1 .0 0 mmol· L- 1 )培养不同时间 (1、 3和 5 d)后 ,观察 CBRH- 791 9细胞生长... 目的 :研究三氯化镧 (L a Cl3)对大鼠肝癌细胞生长的影响。方法 :以体外培养大鼠肝癌细胞株 CBRH-791 9为研究对象 ,给予 L a Cl3(0 .0 1、 0 .1 0及 1 .0 0 mmol· L- 1 )培养不同时间 (1、 3和 5 d)后 ,观察 CBRH- 791 9细胞生长、集落形成及细胞学变化。同时 ,运用流式细胞术检测 CBRH- 791 9细胞周期变化。结果 :0 .1 0 mmol· L- 1L a Cl3组培养 3d,对 CBRH- 791 9生长具有明显的抑制作用 (P<0 .0 1 ) ,随着 L a Cl3剂量增加和培养时间延长 ,对该细胞生长的抑制作用明显增强 (P<0 .0 1 ) ;0 .1、 1 .0 0 m mol· L- 1 L a Cl3组的集落形成抑制率同对照组相比 ,差异均有显著性 (P<0 .0 1 )。 CBRH- 791 9细胞经 L a Cl3作用后 ,G0 / G1 期细胞百分数增加 ,0 .0 1、 0 .1 0和1 .0 0 mmol· L- 1 L a Cl3组与对照组相比 ,差异均有显著性 (P<0 .0 1 ) ;S期细胞百分数减少 ,0 .1 0、1 .0 0 mmol· L- 1L a Cl3组与对照组相比 ,差异均有显著性 (P<0 .0 5 )。结论 :L a Cl3对 CBRH- 791 展开更多

关键词 稀土元素 癌 肝细胞 细胞周期

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羊膜上皮细胞促进共培养神经干细胞存活及分化 被引量：6

10

作者 孟晓婷 陈东 +1 位作者 刘佳梅 路来金 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期184-187,F002,共5页

目的 :探讨羊膜上皮细胞是否能在体外促进胚胎脑神经干细胞的存活及分化。方法 :Neurosphere法分离、克隆 E1 2～ 1 4 d Wistar大鼠脑组织的神经干细胞 ,同时从羊膜中分离羊膜上皮细胞。将神经干细胞与羊膜上皮细胞在不同条件下共培养 ... 目的 :探讨羊膜上皮细胞是否能在体外促进胚胎脑神经干细胞的存活及分化。方法 :Neurosphere法分离、克隆 E1 2～ 1 4 d Wistar大鼠脑组织的神经干细胞 ,同时从羊膜中分离羊膜上皮细胞。将神经干细胞与羊膜上皮细胞在不同条件下共培养 ,通过免疫组织化学法对羊膜上皮细胞及神经干细胞的分化进行检测。结果 :羊膜上皮细胞表达神经干细胞及神经元、神经胶质细胞表面抗原 ;与羊膜上皮细胞共培养的神经干细胞克隆的分化细胞总数、分化为神经元的百分率及神经元初级突起长度明显高于对照组。结论 :羊膜上皮细胞与神经干细胞具有一定的同源性 ;羊膜上皮细胞能促进体外培养的神经干细胞的分化 ,且主要向神经元分化 ,并促进神经元初级突起的生长。 展开更多

关键词 神经干细胞 羊膜 上皮细胞 细胞分化

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硝酸镧对大鼠胃粘膜长期作用的实验研究 被引量：2

11

作者 李树蕾 聂毓秀 +1 位作者 陈曦 黄可欣 《白求恩医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期121-123,共3页

目的 :探讨硝酸镧〔L a( NO3) 3〕长期口服对大鼠胃粘膜的影响。方法 :应用常规组织学和形态计量学方法研究长期经口给予 Wistar大鼠不同剂量的硝酸镧后胃粘膜的变化。结果 :给予硝酸镧 6个月后 ,2 0和 10 mg·kg-1组大鼠胃底腺上... 目的 :探讨硝酸镧〔L a( NO3) 3〕长期口服对大鼠胃粘膜的影响。方法 :应用常规组织学和形态计量学方法研究长期经口给予 Wistar大鼠不同剂量的硝酸镧后胃粘膜的变化。结果 :给予硝酸镧 6个月后 ,2 0和 10 mg·kg-1组大鼠胃底腺上有较多胞质疏松的壁细胞 ;胃底腺壁细胞、主细胞、颈粘液细胞比值的变化与剂量呈一定相关性 ;2 0和 10 mg· kg-1组雄性大鼠胃底腺颈粘液细胞内酸性粘液物质的含量减少 ,2、0 .2和 0 .1mg· kg-1组雄性和雌性大鼠胃底腺颈粘液细胞内酸性粘液物质的含量增加。结论 :较高剂量 ( 2 0和 10 mg· kg-1)的硝酸镧长期口服引起胃粘膜的损伤 ;较低剂量 ( 2、0 .2和0 .1mg· kg-1)的硝酸镧对胃粘膜有一定的保护作用。 展开更多

关键词 硝酸镧 胃粘膜 组织学 大鼠 长期口服

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人肝细胞癌相关抗原661基因在大肠杆菌中的克隆、表达及产物纯化 被引量：1

12

作者 李树蕾 谭岩 +3 位作者 刘力华 段秀梅 方艳秋 许淑芬 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第10期899-902,共4页

目的:构建人肝细胞癌相关抗原661(Hepatocellular carcinoma-associated antigens661,HCA661)原核表达载体并诱导其表达,纯化及鉴定目的蛋白。方法:人肝细胞癌SMMC7721细胞基因组DNA经PCR扩增HCA661基因,克隆到pGEM-Teasy中进行酶切、PC... 目的:构建人肝细胞癌相关抗原661(Hepatocellular carcinoma-associated antigens661,HCA661)原核表达载体并诱导其表达,纯化及鉴定目的蛋白。方法:人肝细胞癌SMMC7721细胞基因组DNA经PCR扩增HCA661基因,克隆到pGEM-Teasy中进行酶切、PCR和测序鉴定;构建重组质粒pQE-HCA661,并转化大肠杆菌M15[pREP4],经IPTG诱导表达目的蛋白;镍离子亲和层析柱(Ni2+-NTA)纯化靶蛋白后进行Western blot鉴定。结果:目的基因经酶切和PCR鉴定结果与预期相符,测序结果显示目的基因与GeneBank登录的序列完全一致;工程化大肠杆菌M15[pREP4]经IPTG诱导表达约39kD的目的蛋白。Western blot鉴定结果显示,纯化重组蛋白能够分别与抗His单克隆抗体和抗HCA661多克隆抗体特异性结合。结论:本实验成功地构建了重组原核表达质粒pQE-HCA661,工程菌表达的重组HCA661带有6×His标签,并具有免疫原性,可以用于制备单克隆抗体,或用于检测患者血清中肝细胞癌抗体以预测肿瘤恶性程度。 展开更多

关键词 人肝细胞癌相关抗原661 基因克隆 原核表达 蛋白纯化 免疫原性

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电离辐射对小鼠胸腺bcl-2蛋白表达及细胞凋亡的作用机制 被引量：1

13

作者 刘佳梅 陈爱军 +1 位作者 陈东 刘树铮 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期229-231,共3页

目的 :研究不同剂量 X射线照射对小鼠胸腺 bcl-2蛋白表达及细胞凋亡的作用机制。方法 :用免疫组织化学、图像分析技术及透射电镜技术分别检测小鼠胸腺 bcl-2蛋白表达及细胞凋亡。结果 :假照组胸腺实质内 bcl-2蛋白表达主要分布于髓质 ,... 目的 :研究不同剂量 X射线照射对小鼠胸腺 bcl-2蛋白表达及细胞凋亡的作用机制。方法 :用免疫组织化学、图像分析技术及透射电镜技术分别检测小鼠胸腺 bcl-2蛋白表达及细胞凋亡。结果 :假照组胸腺实质内 bcl-2蛋白表达主要分布于髓质 ,胸腺皮质内可有少量凋亡的胸腺细胞。 2 Gy照射后 4、8和 1 2 h胸腺髓质内 bcl-2表达减少 ,皮质内出现许多典型的凋亡细胞 ;0 .0 75 Gy照射后 bcl-2蛋白表达增多 ,皮质内凋亡细胞减少 ,且可见较多的细胞分裂像。结论 :不同剂量电离辐射对胸腺细胞凋亡的影响与胸腺髓质内 展开更多

关键词 电离辐射 胸腺 BCL-2蛋白 细胞凋亡

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人肝细胞癌抗原HCA661 DNA疫苗的构建 被引量：1

14

作者 李树蕾 谭岩 +5 位作者 刘力华 段秀梅 方艳秋 姜艳芳 许淑芬 王忠山 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期957-959,共3页

目的:构建人肝细胞癌特异性抗原HCA661的DNA疫苗。方法:通过PCR从SMMC7721中获得编码肝细胞癌特异抗原HCA661的基因组DNA序列,插入pGEM-T easy载体后测序,并将目的基因定向亚克隆进入真核表达载体pCI-neo,以PCR和酶切方法鉴定构建的重... 目的:构建人肝细胞癌特异性抗原HCA661的DNA疫苗。方法:通过PCR从SMMC7721中获得编码肝细胞癌特异抗原HCA661的基因组DNA序列,插入pGEM-T easy载体后测序,并将目的基因定向亚克隆进入真核表达载体pCI-neo,以PCR和酶切方法鉴定构建的重组真核表达质粒pCI-neo-HCA661。结果:PCR产物为1 040 bp,测序结果与Gene Bank登记完全相同;PCR和酶切结果表明,构建的重组真核表达质粒中含有正确编码的目的基因片段。结论:成功地构建了含有HCA661基因的DNA疫苗。 展开更多

关键词 HCA661基因 癌/睾丸抗原 疫苗 DNA

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rhTL1A基因原核表达载体的构建、表达与纯化 被引量：1

15

作者 杨立彬 李树蕾 +2 位作者 谭岩 许淑芬 汪军 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期415-419,共5页

目的:构建人肿瘤坏死因子样分子1A(TL1A)原核表达质粒并诱导其表达,纯化及鉴定目的蛋白。方法:人HUVECs总RNA经逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增TL1A基因,克隆到pTA2载体,酶切和测序鉴定正确后构建重组原核表达质粒pQE-TL1A,并转化大... 目的:构建人肿瘤坏死因子样分子1A(TL1A)原核表达质粒并诱导其表达,纯化及鉴定目的蛋白。方法:人HUVECs总RNA经逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增TL1A基因,克隆到pTA2载体,酶切和测序鉴定正确后构建重组原核表达质粒pQE-TL1A,并转化大肠杆菌M15[pREP4]。IPTG诱导目的蛋白表达并进行Western blotting鉴定;镍离子亲和层析柱(Ni2+-NTA)纯化靶蛋白。结果:目的基因经酶切其结果与预期相符,测序结果显示目的基因与GenBank登录的序列(登录号AF520785)完全一致;工程化大肠杆菌M15[pREP4]经IPTG诱导表达相对分子质量约22 000的目的蛋白;Western blotting鉴定结果显示,重组蛋白能够与抗His单克隆抗体特异性结合。结论:成功地构建了重组原核表达质粒pQE-Tl1A,并纯化获得高纯度重组TL1A蛋白。 展开更多

关键词 TUA 克隆 分子 原核表达 蛋白质纯化

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中药肠炎康对溃疡性结肠炎大鼠免疫功能的影响

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作者 张二力 董宇翔 +4 位作者 李晓春 李有田 常雅萍 陈东 王聃红 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期471-474,共4页

目的 :探讨溃疡性结肠炎 ( UC)发病过程中的免疫异常机制及中药肠炎康 ( CYK)口服液对本病的治疗机理。方法 :通过免疫方法成功复制 UC大鼠模型 ,应用 CYK口服液及对照药物柳氮磺胺吡啶 ( SASP)分别灌胃治疗 5 0 d,观察并分析治疗前后... 目的 :探讨溃疡性结肠炎 ( UC)发病过程中的免疫异常机制及中药肠炎康 ( CYK)口服液对本病的治疗机理。方法 :通过免疫方法成功复制 UC大鼠模型 ,应用 CYK口服液及对照药物柳氮磺胺吡啶 ( SASP)分别灌胃治疗 5 0 d,观察并分析治疗前后脾细胞 Con A刺激指数、LPS刺激指数、IL- 2、IFN- r水平及 NKc杀伤活性变化。结果 :模型组大鼠脾细胞 Con A刺激指数、NKc杀伤活性明显下降 ( P<0 .0 1 ) ,IL- 2、IFN- r水平也有下降 ( P<0 .0 5 ) ;而脾细胞 LPS刺激指数明显升高( P<0 .0 5 )。治疗后 ,CYK组大鼠脾细胞 Con A刺激指数、IL- 2、IFN- r水平及 NKc杀伤活性同模型组比较均有明显提高 ;但脾细胞 LPS刺激指数同模型组比较差异无显著性 ( P>0 .0 5 )。SASP组大鼠脾细胞 LPS刺激指数同模型组比较明显下降 ( P<0 .0 5 ) ;其 IL- 2、IFN- r水平及 NKc杀伤活性同模型组比较差异无显著性 ( P>0 .0 5 )。结论 :溃疡性结肠炎大鼠细胞免疫功能减退 ,体液免疫增强。CYK能促进 UC大鼠肠粘膜溃疡修复及炎症消退 ,在恢复其细胞免疫功能方面 ,优于 SASP,但对 UC大鼠体液免疫的抑制作用不及 SASP。 展开更多

关键词 结肠炎 溃疡性/中药疗法 脾细胞LPS刺激指数 脾细胞ConA刺激指数

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