“失血加LPS”大鼠肺脏IκBα和TLR4基因表达及参麦的肺脏保护作用 被引量：14

1

作者 袁兆新 刘潇 +5 位作者 季东平 张旭 王志 李扬 赵雪俭 孙连坤 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期730-733,共4页

目的:探讨参麦注射液的抗休克效果及其作用机制。方法:大鼠随机分为单纯失血性休克(HS)组、失血加脂多糖(HS+LPS)组、地塞米松(HS+LPS+Dex)组和参麦注射液(HS+LPS+SM)组。HS+LPS组大鼠模型复制:首先,大鼠放血至MAP40mmHg,维持10min(失... 目的:探讨参麦注射液的抗休克效果及其作用机制。方法:大鼠随机分为单纯失血性休克(HS)组、失血加脂多糖(HS+LPS)组、地塞米松(HS+LPS+Dex)组和参麦注射液(HS+LPS+SM)组。HS+LPS组大鼠模型复制:首先,大鼠放血至MAP40mmHg,维持10min(失血性休克),然后舌下静脉注射LPS(1·5mg/kg)。4h后留取肺脏组织,RT-PCR法测定IκBα和TLR4mRNA表达、ELISA法测TNF-α含量,并进行肺脏组织电镜观察。结果:HS+LPS+SM组TLR4mRNA表达明显低于HS+LPS组(P<0·05);HS+LPS+SM组IκBαmRNA表达明显高于HS+LPS组(P<0·05);HS+LPS+SM组肺脏组织匀浆TNF-α含量明显低于HS+LPS组(P<0·05);HS+LPS+SM组肺组织病理损伤显著轻于HS+LPS组。结论:参麦注射液能够下调肺脏组织中TLR4mRNA表达,同时上调IκBα的表达,进而抑制促炎介质TNF-α释放,提示参麦注射液可能通过调节NF-κB信号转导途径抑制炎症反应而对机体细胞起保护作用。 展开更多

关键词 中草药 地塞米松 脂多糖类 受体 Toll样 核因子-κB抑制蛋白α 肿瘤坏死因子

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颈椎稳定性异常对老龄小鼠脑海马caspase-3表达的影响 被引量：8

2

作者 何静春 刑沈阳 +2 位作者 李峰 赵雪俭 赵丽娟 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第11期2155-2157,共3页

目的:观察老龄小鼠颈部肌肉、韧带损伤对学习记忆、脑海马天冬氨酸半胱氨酸蛋白酶-3(caspase-3)表达的影响。方法:手术复制改变小鼠颈椎稳定性模型,用水迷宫法检测小鼠学习记忆能力;用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组织化学法,观察... 目的:观察老龄小鼠颈部肌肉、韧带损伤对学习记忆、脑海马天冬氨酸半胱氨酸蛋白酶-3(caspase-3)表达的影响。方法:手术复制改变小鼠颈椎稳定性模型,用水迷宫法检测小鼠学习记忆能力;用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组织化学法,观察脑海马caspase-3的表达。结果:与正常组比较,各模型组小鼠水迷宫实验中游全程时间延长、犯错误次数增加(P<0.05),且随周龄增加而越加显著;模型组小鼠脑海马caspase-3表达明显增强(P<0.05)。结论:颈椎稳定性的改变可促进老年小鼠脑细胞凋亡,导致其记忆功能明显减退。 展开更多

关键词 颈椎 记忆 细胞凋亡 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶 海马

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郁金对低张性缺氧小鼠脑功能的影响 被引量：13

3

作者 李宗花 李峰 +2 位作者 何静春 郭鑫 赵丽娟 《中国康复理论与实践》 CSCD 2007年第8期710-711,共2页

目的观察郁金对低张性缺氧小鼠脑功能的影响。方法利用常压密闭耐缺氧实验和断头实验复制小鼠急性缺氧模型，用郁金低、中、高剂量（10g／kg、20g／kg、40g／kg）连续灌胃6d。采用低张性缺氧模型观察各组小鼠存活时间；通过断头实验观... 目的观察郁金对低张性缺氧小鼠脑功能的影响。方法利用常压密闭耐缺氧实验和断头实验复制小鼠急性缺氧模型，用郁金低、中、高剂量（10g／kg、20g／kg、40g／kg）连续灌胃6d。采用低张性缺氧模型观察各组小鼠存活时间；通过断头实验观察各组小鼠张口次数和喘吸时间；检测脑组织超氧化物岐化酶（SOD）活性和丙二醛（MDA）含量；镜下观察脑组织形态变化。结果郁金高、中剂量组小鼠急性缺氧条件下的存活时间显著延长（P〈0．001），各郁金剂量组小鼠断头喘息时间、断头后张口次数均增加（P〈0．05～0．001），脑组织SOD活性显著提高（P〈0．001），MDA含量明显下降（P〈0．01～0．001）；镜下可见模型组小鼠脑组织有明显的嗜神经现象、血管周围炎性水肿和脑膜下出血，而郁金治疗组小鼠脑组织除偶见脑膜血管扩张外未见其他异常。结论郁金对低张性缺氧小鼠脑组织有一定的保护作用。 展开更多

关键词 郁金 低张性缺氧 脑

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人参二醇组皂苷对抗二次打击诱导大鼠急性肺损伤 被引量：9

4

作者 于振香 刘喜春 赵雪俭 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期2402-2406,共5页

目的:通过失血性休克复合脂多糖(LPS)二次打击建立稳定的急性肺损伤模型并研究人参二醇组皂苷(PDS)的抗损伤作用。方法:40只成龄Wistar大鼠随机分为假手术组(S)、二次打击模型组(HL)、地塞米松(Dex)预治疗组(HLD)和人参二醇组皂苷预治疗... 目的:通过失血性休克复合脂多糖(LPS)二次打击建立稳定的急性肺损伤模型并研究人参二醇组皂苷(PDS)的抗损伤作用。方法:40只成龄Wistar大鼠随机分为假手术组(S)、二次打击模型组(HL)、地塞米松(Dex)预治疗组(HLD)和人参二醇组皂苷预治疗组(HLP)。观察各组大鼠的平均动脉压(MABP)的变化及肺脏病理学改变,通过血清酶学检测分析各主要脏器功能变化,采用放射免疫分析法(RIA)测定了血清炎症介质TNF-α和IL-6水平。结果:失血性休克-LPS二次打击造成了大鼠MABP明显下降,血清酶学指标AST、ALT、ALP、LDH、CK水平升高,血清TNF-α和IL-6的含量增高;肺组织结构出现破坏,出现明显炎症反应。与HL比较,HLD及HLP二次打击1 h后MABP逐渐回升,血清酶学指标及TNF-α和IL-6含量明显降低,肺间质炎症明显减轻。结论:大鼠失血复合内毒素注射可成功建立稳定的急性肺损伤模型。与地塞米松作用相似,PDS可升高二次打击大鼠MABP,逆转血清酶水平变化并降低血清中TNF-α和IL-6含量,从而对抗失血及LPS导致的肺损伤。 展开更多

关键词 急性肺损伤 二次打击 脂多糖类 人参属 地塞米松

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前列腺癌PC-3M细胞hmSD活性与细胞凋亡相关性的实验研究 被引量：4

5

作者 李扬 狄茜 +4 位作者 许莉 刘喜春 赵丹 赵雪俭 宫城妙子 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期748-751,共4页

目的:研究前列腺癌PC - 3M细胞株hmSD的活性与细胞凋亡的相关性。方法:应用丁酸钠诱导前列腺癌PC - 3M细胞发生凋亡,吖啶橙/溴化乙锭染色检测细胞凋亡率;收集丁酸钠作用后的PC - 3M细胞,匀浆后离心取上清,与底物共同孵育,以硫代巴比妥酸... 目的:研究前列腺癌PC - 3M细胞株hmSD的活性与细胞凋亡的相关性。方法:应用丁酸钠诱导前列腺癌PC - 3M细胞发生凋亡,吖啶橙/溴化乙锭染色检测细胞凋亡率;收集丁酸钠作用后的PC - 3M细胞,匀浆后离心取上清,与底物共同孵育,以硫代巴比妥酸(TBA)显色反应检测所生成的唾液酸,计算唾液酸酶活性;将细胞凋亡率与hmSD活性进行相关性分析。结果:丁酸钠诱导PC - 3M细胞凋亡的同时显著下调hmSD的活性,凋亡率与hmSD活性呈负相关。结论:hmSD活性变化与前列腺癌细胞凋亡呈相关性。 展开更多

关键词 神经氨酸酶 前列腺肿瘤 PC-3M细胞 细胞凋亡 丁酸盐类

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尾叶香茶菜二萜类化合物B对小鼠前列腺癌细胞细胞周期的影响及其机制 被引量：4

6

作者 刘亚男 邵月婷 +4 位作者 李晓洁 汲坤 邵晨 李扬 赵雪俭 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期1916-1921,共6页

目的:观察尾叶香茶菜二萜类化合物B(DB)对小鼠前列腺癌细胞株RM-1细胞周期的影响并分析其机制。方法:MTT法观察不同时间、不同剂量的DB对RM-1细胞增殖率的影响;相差显微镜观察对RM-1细胞形态影响;流式细胞术分析细胞周期变化;RT-PCR和We... 目的:观察尾叶香茶菜二萜类化合物B(DB)对小鼠前列腺癌细胞株RM-1细胞周期的影响并分析其机制。方法:MTT法观察不同时间、不同剂量的DB对RM-1细胞增殖率的影响;相差显微镜观察对RM-1细胞形态影响;流式细胞术分析细胞周期变化;RT-PCR和Western blotting分别观察DB作用后RM-1细胞p53、GRIM-19、STAT3和细胞周期相关因子CHK1、CDK2mRNA和蛋白水平的表达。结果:(1)MTT结果:DB可抑制RM-1细胞的增殖,呈时间、剂量依赖性;(2)形态学观察和流式细胞术检测:经DB处理后的RM-1细胞出现生长抑制,细胞主要阻滞在G1期;(3)RT-PCR结果:DB(2mg/L,4mg/L,8mg/L)分别作用RM-1细胞12h、24h、48h后,p53、CHK1、GRIM-19mRNA的含量明显高于对照组,CDK2、STAT3mRNA的含量明显低于对照组(P<0.05);(4)Western blotting结果:DB(2mg/L,4mg/L,8mg/L)分别作用RM-1细胞12h、24h、48h后,P53、GRIM-19蛋白表达水平高于对照组,而CDK2蛋白表达水平则低于对照组。结论:DB可抑制RM-1细胞增殖,其机制可能是与细胞周期相关基因p53的上调,CDK2表达下降有关,影响了G1期进入S期,同时GRIM-19-STAT3-CDK2途径可能也参与G1期阻滞的过程。 展开更多

关键词 二萜类 尾叶香茶菜 前列腺癌 细胞周期 P53

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microRNA-199a/b-3p对乳腺癌细胞运动能力的影响 被引量：6

7

作者 王子航 李春实 +2 位作者 康劲松 米旭光 刘磊 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期1242-1244,共3页

目的:探讨microRNA-199a/b-3p抑制乳腺癌细胞运动能力的机制。方法:在乳腺癌MDA-MB-231细胞中,转入miR-199a/b-3p mimcs,免疫印迹法检测PAK4的表达量变化;迁移和侵袭实验检测,超表达miR-199a/b-3p和干扰PAK4表达对乳腺癌迁移侵袭的影响... 目的:探讨microRNA-199a/b-3p抑制乳腺癌细胞运动能力的机制。方法:在乳腺癌MDA-MB-231细胞中,转入miR-199a/b-3p mimcs,免疫印迹法检测PAK4的表达量变化;迁移和侵袭实验检测,超表达miR-199a/b-3p和干扰PAK4表达对乳腺癌迁移侵袭的影响;细胞膜皱起检测,超表达miR-199a/b-3p和干扰PAK4表达对乳腺癌细胞细胞膜皱起的影响。结果:在MDA-MB-231细胞中,超表达miR-199a/b-3p或干涉内源PAK4蛋白表达,均能下调细胞的迁移率、侵袭率和平均细胞膜皱起面积。结论:miR-199a/b-3p抑制乳腺癌细胞运动能力部分是通过抑制PAK4表达实现的,且miR-199a/b-3p具有抗乳腺癌迁移药物开发的潜质。 展开更多

关键词 乳腺癌 microRNA-199a/b-3p 迁移侵袭 细胞膜皱起 PAK4

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ClC-3在人胶质瘤中的表达及分布 被引量：7

8

作者 徐冰 罗祺 +3 位作者 王心蕊 刘潇 王医术 孙连坤 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第11期2188-2191,共4页

目的探讨ClC-3在人脑胶质瘤中的表达及其生物学意义。方法应用免疫组织化学染色技术检测24例人胶质瘤以及4例脑转移癌手术标本中ClC-3蛋白的表达;RT-PCR检测ClC-3蛋白表达阳性的手术标本中其mRNA表达。结果4例正常脑组织ClC-3蛋白的表... 目的探讨ClC-3在人脑胶质瘤中的表达及其生物学意义。方法应用免疫组织化学染色技术检测24例人胶质瘤以及4例脑转移癌手术标本中ClC-3蛋白的表达;RT-PCR检测ClC-3蛋白表达阳性的手术标本中其mRNA表达。结果4例正常脑组织ClC-3蛋白的表达为阴性;而蛋白表达阳性的19例胶质瘤及4例脑转移癌中,ClC-3主要位于瘤细胞和微血管内皮细胞的胞浆或胞膜上。蛋白表达阳性的手术标本中16例胶质瘤和4例脑转移癌检测到ClC-3mRNA的表达。少突胶质细胞瘤Ⅲ级中ClC-3的mRNA和蛋白表达明显高于其Ⅱ级。结论ClC-3在人胶质瘤及脑转移癌组织中普遍表达,并且可能与少突胶质细胞瘤病理分级相关。 展开更多

关键词 神经胶质瘤 蛋白质C1C-3 免疫化学 氯化物通道

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干扰PAK4表达对肝细胞癌迁移侵袭的影响 被引量：5

9

作者 王子航 李春实 +2 位作者 康劲松 米旭光 刘磊 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期1183-1185,共3页

目的:探讨利用microRNA-199a/b-3p干扰PAK4表达抑制肝细胞癌迁移侵袭的机制。方法:在HEK293T细胞中转入miR-199a/b-3p mimcs和pmir GLO-PAK4 3'UTR,荧光素酶报告法检测miR-199a/b-3p对PAK4的抑制作用。在肝细胞癌SMMC-7721细胞中,转... 目的:探讨利用microRNA-199a/b-3p干扰PAK4表达抑制肝细胞癌迁移侵袭的机制。方法:在HEK293T细胞中转入miR-199a/b-3p mimcs和pmir GLO-PAK4 3'UTR,荧光素酶报告法检测miR-199a/b-3p对PAK4的抑制作用。在肝细胞癌SMMC-7721细胞中,转入miR-199a/b-3p mimcs,免疫印迹法检测PAK4的表达量变化;迁移和侵袭实验检测,miR-199a/b-3p对肝细胞癌迁移侵袭的影响,干扰PAK4表达后肝细胞癌迁移侵袭的影响。结果:在SMMC-7721细胞中,miR-199a/b-3p通过与PAK4 3'UTR结合抑制PAK4 mRNA翻译,导致PAK4表达降低,并通过抑制PAK4表达抑制肝细胞癌迁移侵袭。结论:miR-199a/b-3p能抑制肝细胞癌细胞迁移侵袭,具有抗肝细胞癌药物开发的潜质。 展开更多

关键词 肝细胞癌 microRNA-199a/b-3p 迁移 侵袭 PAK4

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人参二醇皂苷对小鼠颈椎稳定性异常致脑功能损伤的影响 被引量：6

10

作者 范文静 何静春 +3 位作者 崔魏 王燕嬉 赵洪艳 赵丽娟 《中国康复理论与实践》 CSCD 2007年第4期346-347,共2页

目的观察人参二醇皂苷(PDS)对小鼠颈椎稳定性异常引起智力下降和脑组织损伤的影响。方法44只小鼠随机分为正常对照组、模型组、PDS高剂量组和低剂量组各11只,手术制备小鼠颈椎失稳模型,PDS腹腔注射(高剂量组:14mg/kg;低剂量组:7mg/kg)5... 目的观察人参二醇皂苷(PDS)对小鼠颈椎稳定性异常引起智力下降和脑组织损伤的影响。方法44只小鼠随机分为正常对照组、模型组、PDS高剂量组和低剂量组各11只,手术制备小鼠颈椎失稳模型,PDS腹腔注射(高剂量组:14mg/kg;低剂量组:7mg/kg)50d,采用水迷宫、跳台实验方法检测小鼠学习记忆能力;用试剂盒检测脑组织超氧化物岐化酶(SOD)、乳酸脱氢酶(LDH)活性和丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)含量。结果水迷宫实验:与模型组比较,PDS高剂量组小鼠游全程时间缩短、错误次数减少(P<0.05);跳台实验:与模型组比较,PDS高剂量组小鼠反应期明显缩短、错误次数明显减少(P<0.01);PDS组小鼠脑组织SOD、LDH活性明显增强(P<0.01),MDA、NO含量降低(P<0.01,P<0.05)。结论人参二醇皂苷对小鼠颈椎稳定性异常引起的学习记忆能力下降和脑损伤具有一定的改善和保护作用。 展开更多

关键词 人参二醇皂苷 颈椎稳定性 氧自由基 小鼠

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中药脑血宝对血液凝固与纤溶活性影响的实验研究 被引量：3

11

作者 计国义 华坤 +1 位作者 李鸿雁 祝世功 《白求恩医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期33-34,共2页

目的 :观察脑血宝制剂对血液凝固与纤溶活性的影响。方法 :血栓形成后应用脑血宝制剂(3个剂量组 ) ,观察颈总动脉内栓子的变化和血浆中纤维蛋白 (FIB)、凝血酶时间 (TT)以及体外实验中血液凝固时间及血凝块直径的变化。结果 :应用脑血... 目的 :观察脑血宝制剂对血液凝固与纤溶活性的影响。方法 :血栓形成后应用脑血宝制剂(3个剂量组 ) ,观察颈总动脉内栓子的变化和血浆中纤维蛋白 (FIB)、凝血酶时间 (TT)以及体外实验中血液凝固时间及血凝块直径的变化。结果 :应用脑血宝制剂后血凝时间延长 ,血凝块直径缩小 ,颈动脉栓子有溶解的表现 ;血浆中 FIB含量下降 ,TT延长 ,二者有负相关关系。纤溶酶原 (PL G)无明显变化。结论 :脑血宝有溶栓作用 ,但其溶栓作用与激活纤溶酶无关。 展开更多

关键词 中药 脑血宝 血液凝固 纤溶活性 实验 血栓性疾病

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线粒体氯通道蛋白在过氧化氢诱导C6细胞损伤中的作用 被引量：3

12

作者 孔晓霞 李扬 +3 位作者 张宏宇 袁兆新 康劲松 孙连坤 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期481-483,共3页

目的:利用过氧化氢(H2O2)复制神经胶质瘤C6细胞损伤模型,探讨线粒体氯通道蛋白/CLIC4的变化。方法:应用MTT法检测H2O2作用的C6细胞生存率;紫外分光光度法检测培养液上清LDH释放率;RT-PCR检测CLIC4的mRNA表达;Western blotting方法检测CL... 目的:利用过氧化氢(H2O2)复制神经胶质瘤C6细胞损伤模型,探讨线粒体氯通道蛋白/CLIC4的变化。方法:应用MTT法检测H2O2作用的C6细胞生存率;紫外分光光度法检测培养液上清LDH释放率;RT-PCR检测CLIC4的mRNA表达;Western blotting方法检测CLIC4的蛋白水平。结果:500μmol/L H2O2作用C6细胞存活率与对照组相比未见明显差异;LDH释放率高于对照组;CLIC4蛋白水平明显强于对照组。而1000μmol/LH2O2作用的C6细胞存活率明显低于对照组;LDH释放率明显高于对照组;CLIC4蛋白水平强于对照组。结论:CLIC4可能参与HO诱导神经胶质瘤细胞损伤的机制。 展开更多

关键词 过氧化氢 神经胶质瘤C6细胞 线粒体氯通道

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地塞米松抑制肾素-血管紧张素系统减轻大鼠急性肺损伤 被引量：3

13

作者 张勇 娄冬梅 +3 位作者 李洪岩 金德男 高井真司 于振香 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期22-25,共4页

目的:观察肾素-血管紧张素系统(RAS)在大鼠急性肺损伤中的作用及地塞米松(DEX)的影响。方法:在大鼠失血性休克的基础上,腹腔注射内毒素(二次打击)造成急性肺损伤模型,直接插管法检测大鼠平均动脉血压(MAP);逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR... 目的:观察肾素-血管紧张素系统(RAS)在大鼠急性肺损伤中的作用及地塞米松(DEX)的影响。方法:在大鼠失血性休克的基础上,腹腔注射内毒素(二次打击)造成急性肺损伤模型,直接插管法检测大鼠平均动脉血压(MAP);逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)观察各组大鼠肺脏组织中血管紧张素转换酶(ACE)、血管紧张素原(AGT)、血管紧张素Ⅱ 1型受体(AT1)和血管紧张素Ⅱ 2型受体(AT2)mRNA的表达及测定大鼠血清血管紧张素Ⅰ(AngⅠ)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)的变化。结果:二次打击组(HL)大鼠平均动脉血压恢复很慢,而地塞米松治疗组(HLD)平均动脉血压恢复的速度较HL明显增快,且平均动脉血压水平的升高具有明显差异。与对照组(C)相比,HL组ACE、AGTmRNA表达水平明显增高,而HLD组明显低于HL组。AT1、AT2 mRNA各组表达水平则无明显差异。与C组相比,HL组AngⅡ的含量明显升高,HLD组大鼠血清AngⅡ的含量比HL组均明显减低,Ang Ⅰ含量的变化不明显。结论:失血性休克后LPS诱发的急性肺损伤可能与激活肺脏的肾素-血管紧张素系统有关,抑制肺脏的肾素-血管紧张素系统的激活是DEX轻这种急性肺损伤的机制之一。 展开更多

关键词 急性肺损伤 肾素-血管紧张素系统 血管紧张素Ⅱ 地塞米松 脂多糖类

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减毒沙门氏菌靶向携带共表达质粒p53／siRNA-survivin抗前列腺癌的体内研究 被引量：2

14

作者 邵月婷 徐德启 +4 位作者 刘亚男 李晓洁 邵晨 李扬 赵雪俭 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2008年第9期527-529,533,共4页

目的:以人减毒沙门氏菌为基因运载体,探讨其携带p53、siRNA-survivin及其共表达质粒p53/siRNA-survivin对肿瘤的靶向性及抗人前列腺癌效应。方法:复制裸鼠前列腺癌皮下移植瘤模型,分别将已构建的重组表达质粒siRNA-scramble,p53,siRNA-s... 目的:以人减毒沙门氏菌为基因运载体,探讨其携带p53、siRNA-survivin及其共表达质粒p53/siRNA-survivin对肿瘤的靶向性及抗人前列腺癌效应。方法:复制裸鼠前列腺癌皮下移植瘤模型,分别将已构建的重组表达质粒siRNA-scramble,p53,siRNA-survivin及共表达质粒p53/siRNA-survivin转化到减毒人伤寒沙门菌Ty21a,制备成对应重组减毒沙门菌,通过灌胃及瘤内注射到前列腺癌荷瘤裸鼠体内,观察成瘤时间及瘤块大小;以携有绿色荧光蛋白siRNA-survivin的重组菌作为报告基因,流式细胞术检测其在肝、脾、肿瘤组织中靶向分布及基因呈递作用;应用RT-PCR,Western blot,及免疫组织化学染色方法检测治疗后肿瘤组织p53和Survivin基因及蛋白表达。结果:各治疗组均较对照组肿瘤生长缓慢,肿瘤体积小,共表达质粒组与单独基因治疗组比较,肿瘤体积明显缩小,抑瘤率高;荷瘤裸鼠肿瘤组织可测及Survivin mRNA表达下降,p53基因表达增强,p53相关基因GRIM-19mRNA和蛋白表达增强;FCM检测结果发现,减毒人沙门氏菌可在肝、脾及肿瘤组织中存活及表达,但以肿瘤中绿色荧光聚集明显且维持时间较长,其他脏器仅见极少的绿色荧光。结论:人减毒沙门氏菌可作为外源基因载体携带重组质粒,对前列腺癌移植瘤有明显的靶向性,其靶向介导的p53,siRNA-survivin及共表达基因p53/siRNA-survivin,对前列腺癌荷瘤裸鼠有治疗作用,共表达基因较单基因治疗效果好,具有显著的协同作用。 展开更多

关键词 P53 SURVIVIN RNAi减毒沙门氏菌 前列腺癌

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盐酸小檗碱对亚硝酸盐中毒小鼠脑急性缺氧的保护作用 被引量：2

15

作者 范文静 李天枢 +3 位作者 田原僮 李峰 刘耀峰 赵丽娟 《中国康复理论与实践》 CSCD 2007年第8期704-705,共2页

目的观察盐酸小檗碱对小鼠脑急性缺氧的保护作用。方法利用亚硝酸钠(NaNO2)中毒和断头实验复制缺氧模型,用盐酸小檗碱3个剂量组即2.0mg/kg、4.0mg/kg、8.0mg/kg连续灌胃6d,观察小鼠存活时间、断头张口次数和喘息时间;用试剂盒测量脑组... 目的观察盐酸小檗碱对小鼠脑急性缺氧的保护作用。方法利用亚硝酸钠(NaNO2)中毒和断头实验复制缺氧模型,用盐酸小檗碱3个剂量组即2.0mg/kg、4.0mg/kg、8.0mg/kg连续灌胃6d,观察小鼠存活时间、断头张口次数和喘息时间;用试剂盒测量脑组织超氧化物岐化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)和乳酸脱氢酶(LDH)含量。HE染色观察脑组织形态学变化。结果盐酸小檗碱能明显延长急性缺氧条件下小鼠的存活时间(P<0.05,P<0.01)、断头喘息时间(P<0.05,P<0.01),提高缺氧小鼠脑组织SOD和LDH的活性,减少MDA和NO的含量;镜下可见模型组小鼠脑膜出血,皮质细胞坏死,脑水肿;盐酸小檗碱治疗组小鼠除脑膜血管扩张外未见明显异常。结论盐酸小檗碱对亚硝酸盐中毒小鼠脑急性缺氧具有一定的保护作用。 展开更多

关键词 小檗碱 急性缺氧 脑组织 亚硝酸钠

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MicroRNA-199a/b-3p抑制三阴乳腺癌细胞增殖机制研究 被引量：2

16

作者 王子航 王志成 +3 位作者 张嘉星 范运达 康劲松 米旭光 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期480-482,共3页

目的:探讨microRNA-199a/b-3p(miR199)抑制三阴乳腺癌细胞增殖存活的作用机制。方法:在三阴乳腺癌细胞BT549、MDA-MB-231转染miR199,荧光定量检测miR199表达量;MTT法检测转染miR199对三阴乳腺癌细胞存活率的影响;细胞周期分析检测,转染m... 目的:探讨microRNA-199a/b-3p(miR199)抑制三阴乳腺癌细胞增殖存活的作用机制。方法:在三阴乳腺癌细胞BT549、MDA-MB-231转染miR199,荧光定量检测miR199表达量;MTT法检测转染miR199对三阴乳腺癌细胞存活率的影响;细胞周期分析检测,转染miR199对在乳腺癌细胞细胞周期的影响。结果:超表达miR199后,三阴乳腺癌细胞BT549、MDA-MB-231的增殖率分别下降(41.02±2.34)%和(28.42±6.70)%,细胞周期均被阻滞在G1期。结论:miR-199a/b-3p抑制三阴乳腺癌增殖,具有抗三阴乳腺癌增殖药物开发的潜质。 展开更多

关键词 三阴乳腺癌 microRNA-199a/b-3p 增殖

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氢化可的松抑制Jurkat细胞的调节性体积减小 被引量：1

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作者 康劲松 姜平 +6 位作者 冯娟 张海龙 李志昌 汤富磊 范少光 祝世功 宋德懋 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2004年第6期615-618,共4页

目的 :研究氢化可的松对Jurkat细胞调节性体积减小 (regulatoryvolumedecrease ,RVD)的影响及可能的机制。方法 :通过MoticImagesAdvanced 3.1软件系统实时监测细胞体积的变化 ,并通过3 H掺入实验观察Jurkat细胞增殖。结果 :氢化可的松... 目的 :研究氢化可的松对Jurkat细胞调节性体积减小 (regulatoryvolumedecrease ,RVD)的影响及可能的机制。方法 :通过MoticImagesAdvanced 3.1软件系统实时监测细胞体积的变化 ,并通过3 H掺入实验观察Jurkat细胞增殖。结果 :氢化可的松对Jur kat细胞RVD具有剂量依赖性的抑制作用 ,在 10 -4和 10 -3 mol·L-1时可以明显抑制Jurkat细胞的RVD ,而在 10 -9、10 -7和 10 -5mol·L-1时对Jurkat细胞的RVD没有明显影响。钾通道阻断剂奎宁 (quinine)亦可以抑制Jurkat细胞的RVD。氢化可的松和奎宁在10 -3 mol·L-1均可明显抑制Jurkat的增殖 (包括自然增殖和ConA诱导增殖 )。结论 :氢化可的松对Jur 展开更多

关键词 氢化可的松 JURKAT细胞 细胞体积调节性减小 钾通道阻断剂 淋巴细胞转化

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AQP3缺失小鼠尿素和尿浓缩能力的研究 被引量：1

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作者 朱建国 刘喜春 +1 位作者 赵雪俭 赵丹 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第11期2136-2140,共5页

目的:肾脏表达水通道蛋白3(AQP3)在尿浓缩机制中起着极其重要的作用。AQP3缺失小鼠表现为尿浓缩功能严重障碍。为阐明这种基因缺失的生理特性和发生机制,我们利用AQP3基因敲除小鼠和野生型小鼠复制急性尿素负荷动物模型,对其作用机制及... 目的:肾脏表达水通道蛋白3(AQP3)在尿浓缩机制中起着极其重要的作用。AQP3缺失小鼠表现为尿浓缩功能严重障碍。为阐明这种基因缺失的生理特性和发生机制,我们利用AQP3基因敲除小鼠和野生型小鼠复制急性尿素负荷动物模型,对其作用机制及影响进行研究。方法:对小鼠实施急性尿素负荷,从实验前2h到尿素负荷后第8h,每隔2h收集1次尿样分别检测尿量、尿渗透压及尿素浓度。分离肾脏组织RNA进行实时荧光定量RT-PCR反应。应用Western blotting分析肾组织中尿素转运蛋白(UTs)的变化。结果:给予尿素后4h左右,2种不同基因型小鼠均有负荷尿素的排泄。尿素负荷后AQP3缺失小鼠尿的渗透压和尿素含量逐渐增高,第8h,几乎与野生型小鼠值相等,但尿中非尿素溶质浓度却没有改变。在最后4h内尿量下降到基础值的1/4。AQP3基因缺失和野生型小鼠尿素负荷显著地上调了UT-A3的表达。结论:AQP3基因缺失并没有直接干扰肾脏对尿素的浓缩功能,但却减弱了对尿中其它溶质浓缩的能力。这种对溶质选择性的反应是由于AQP3对水和尿素转运能力的不同所致。结果表明AQP3对尿中非尿素溶质的浓缩具有特殊作用。 展开更多

关键词 转基因小鼠 尿素转运蛋白 水通道蛋白3 尿素

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STEAP1基因的体外转录

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作者 潘玉琢 李扬 +3 位作者 赵丹 毛建华 孙连坤 赵雪俭 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第7期1454-1456,共3页

目的:建立STEAP1基因的体外转录模型,为进一步研究其功能奠定基础。方法:应用RT-PCR的方法从前列腺癌组织中钓取STEAP1全长cDNA,TA克隆后测序,亚克隆入pSP64载体,构建体外转录用载体STEAP1-pSP64。同时,通过PCR构建具有SP6RNA聚合酶结... 目的:建立STEAP1基因的体外转录模型,为进一步研究其功能奠定基础。方法:应用RT-PCR的方法从前列腺癌组织中钓取STEAP1全长cDNA,TA克隆后测序,亚克隆入pSP64载体,构建体外转录用载体STEAP1-pSP64。同时,通过PCR构建具有SP6RNA聚合酶结合位点的STEAP1体外转录盒。应用体外转录试剂盒,对比STEAP1-pSP64与STEAP1体外转录盒转录效率。结果:(1)成功从人前列腺癌组织中钓取了STEAP1全长cDNA,测序发现无一碱基错配。(2)成功构建了STEAP1-pSP64载体和STEAP1体外转录盒,两者转录效率的比较表明STEAP1-pSP64载体转录RNA的量明显高于STEAP1体外转录盒。结论:成功构建了两种STEAP1体外转录模型,并证明STEAP1-pSP64载体的转录效率高于STEAP1体外转录盒。本研究为进一步研究STEAP1的功能奠定了基础。 展开更多

关键词 基因 STEAP1 前列腺肿瘤 pSP64载体 前列腺特异6次跨膜上皮抗原

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稳定表达UT-A2的FRT细胞系的建立与鉴定

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作者 郭丽荣 孟艳 +4 位作者 赵丹 赵华山 吕斌 杨宝学 赵雪俭 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期803-806,共4页

目的:建立稳定表达尿素通道蛋白A2(UT-A2)的FRT细胞系,为寻找UT-A2抑制剂提供细胞模型。方法:通过真核表达质粒-脂质体介导的方法,将UT-A2 cDNA与真核表达载体pUB6/V5连接后的重组质粒转染入FRT细胞,经稳定筛选建立稳定表达UT-A2的FRT... 目的:建立稳定表达尿素通道蛋白A2(UT-A2)的FRT细胞系,为寻找UT-A2抑制剂提供细胞模型。方法:通过真核表达质粒-脂质体介导的方法,将UT-A2 cDNA与真核表达载体pUB6/V5连接后的重组质粒转染入FRT细胞,经稳定筛选建立稳定表达UT-A2的FRT细胞系。功能检测实验将细胞分为对照组和稳定转染组,用2 mol/L尿素负荷试验检测稳定表达UT-A2的FRT细胞膜的尿素通透性。结果:经BSD筛选21 d后得到稳定表达UT-A2的细胞株;Western blotting证实UT-A2蛋白稳定表达;免疫荧光分析结果提示UT-A2的质膜定位。2 mol/L尿素试验证实了该细胞系具有明显尿素通透性。结论:在非肾脏上皮细胞获得了稳定质膜定位表达UT-A2的FRT细胞株,该细胞株可用于UT-A2抑制剂的筛选。 展开更多

关键词 尿素通道蛋白 转染 尿素

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