人参单体皂苷Rh_2诱导小鼠前列腺癌RM-1细胞凋亡 被引量：7

1

作者 何静春 孟艳 +2 位作者 赵洪艳 赵丽娟 赵雪俭 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期655-657,777,F0002,共5页

目的：探讨人参单体皂苷Rh2抗小鼠前列腺癌细胞RM-1的作用机制。方法：采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）还原法检测不同浓度Rh2与RM-1细胞株存活率的关系;吖啶橙染色观察Rh2诱导细胞凋亡情况;流式细胞仪分析细胞凋亡周期,计算细胞平均凋亡指... 目的：探讨人参单体皂苷Rh2抗小鼠前列腺癌细胞RM-1的作用机制。方法：采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）还原法检测不同浓度Rh2与RM-1细胞株存活率的关系;吖啶橙染色观察Rh2诱导细胞凋亡情况;流式细胞仪分析细胞凋亡周期,计算细胞平均凋亡指数。结果：RM-1细胞经Rh2处理后,细胞生长明显受抑制,当Rh2浓度为5、15、25和30mg·L^-1时,其生长抑制率分别为12.0%、36.1%、51.2%和69.3%,呈明显的浓度依赖性;吖啶橙荧光染色可见经药物处理的细胞呈现明显的凋亡形态;细胞周期G1期前出现凋亡峰,Rh2浓度为15和25mg·L^-1时,细胞凋亡率分别为41.9%和48.9%。结论：5-30mg·L^-1Rh2可诱导RM-1细胞凋亡,其具有明显的抗肿瘤作用。 展开更多

关键词 细胞凋亡 人参单体皂苷Rh2 前列腺肿瘤 细胞周期

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DIM对人激素非依赖性前列腺癌细胞PC3M的生长抑制作用 被引量：4

2

作者 潘玉琢 李扬 +3 位作者 赵燕颍 赵丹 禹彬 赵雪俭 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期1034-1036,共3页

目的:探讨3,3-二吲哚基甲烷(3,3-Diindolylmethane,DIM)对人激素非依赖性前列腺癌细胞PC3M的生长抑制作用。方法:应用MTT生长抑制实验观察不同浓度DIM对PC3M细胞增殖活性的影响,流式细胞术观察不同浓度DIM对PC3M细胞的细胞周期及细胞凋... 目的:探讨3,3-二吲哚基甲烷(3,3-Diindolylmethane,DIM)对人激素非依赖性前列腺癌细胞PC3M的生长抑制作用。方法:应用MTT生长抑制实验观察不同浓度DIM对PC3M细胞增殖活性的影响,流式细胞术观察不同浓度DIM对PC3M细胞的细胞周期及细胞凋亡的影响。结果:不同浓度的DIM对PC3M细胞有显著的增殖抑制作用(P<0.05),药物浓度为10、30、60和120μmol.L-1时,抑制率分别为35.6%、58.8%、76.6%和90.5%。当药物浓度为60μmol.L-1时,细胞周期停滞在G1期,并诱导22.6%的PC3M细胞发生凋亡。结论:DIM可抑制PC3M细胞增殖,并诱导其凋亡,为DIM用于激素非依赖性前列腺癌的治疗提供了实验依据。 展开更多

关键词 前列腺肿瘤 3 3-二吲哚基甲烷 细胞凋亡 激素非依赖性

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人前列腺癌多药耐药细胞系的建立 被引量：5

3

作者 潘玉琢 赵燕颖 +1 位作者 赵雪俭 李扬 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期651-654,F0002,共5页

目的:建立人前列腺癌多药耐药细胞系。方法:以顺铂为诱导药物,人前列腺癌细胞PC3M为诱导对象,采用大剂量冲击与逐步增加剂量相结合的方法,诱导建立人前列腺癌多药耐药细胞系PC3M/CDDP;MTT法检测药物敏感性,免疫细胞化学法检测P-糖蛋白(P... 目的:建立人前列腺癌多药耐药细胞系。方法:以顺铂为诱导药物,人前列腺癌细胞PC3M为诱导对象,采用大剂量冲击与逐步增加剂量相结合的方法,诱导建立人前列腺癌多药耐药细胞系PC3M/CDDP;MTT法检测药物敏感性,免疫细胞化学法检测P-糖蛋白(P-gP)、多药耐药相关蛋白(MRP)的表达。结果:经顺铂诱导建立的人前列腺癌细胞系PC3M/CDDP对顺铂、丝裂霉素、阿霉素、5-氟尿嘧啶、长春新碱等药物的50%抑制浓度(IC50)分别为(0.603±0.102)、(0.201±0.056)、(0.267±0.067)、(1.676±0.321)和(0.657±0.227)mg·L-1,与PC3M细胞系比较差异有显著性(P<0.05);免疫细胞化学染色结果显示,PC3M/CDDP细胞系MRP、P-gP表达强度明显大于PC3M细胞系(P<0.05);PC3M/CDDP细胞系的细胞倍增时间为40.5h,与PC3M细胞系(48.6h)比较差异无显著性(P>0.05)。结论:成功建立稳定的人前列腺癌PC3M/CDDP细胞系,该细胞系具有对多种抗癌药耐药及细胞增殖未受影响的特点,可应用于下游实验。 展开更多

关键词 人前列腺癌细胞 多药耐药相关蛋白质类 P-糖蛋白 抗肿瘤药

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聚肌胞对小鼠前列腺癌的抑制作用 被引量：3

4

作者 田原僮 潘玉琢 +3 位作者 赵燕颖 范文静 赵丽娟 赵雪俭 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期819-821,共3页

目的:观察聚肌胞对小鼠前列腺癌的抑制作用。方法:将16只C57BL6/J纯系荷瘤小鼠按瘤重采用区组随机分组方法分为对照组和聚肌胞组,每组8只,每隔2日分别瘤内注射生理盐水和聚肌胞,第7次后切除瘤灶,称瘤重,计算瘤重抑制率,绘制前列腺癌生... 目的:观察聚肌胞对小鼠前列腺癌的抑制作用。方法:将16只C57BL6/J纯系荷瘤小鼠按瘤重采用区组随机分组方法分为对照组和聚肌胞组,每组8只,每隔2日分别瘤内注射生理盐水和聚肌胞,第7次后切除瘤灶,称瘤重,计算瘤重抑制率,绘制前列腺癌生长曲线及荷瘤鼠生存曲线。前列腺癌组织HE染色观察形态学变化。结果:对照组和聚肌胞组瘤重分别为(4·14±1·56)和(1·58±0·67)g,两组瘤重比较差异具有显著性(P<0·05);聚肌胞组瘤重抑制率为67·85%;前列腺癌生长曲线显示,聚肌胞组小鼠前列腺癌生长较慢;聚肌胞组荷瘤小鼠的生存时间较对照组长(P<0·05);病理显示对照组较聚肌胞组前列腺癌细胞增殖活跃。结论:聚肌胞可以减慢小鼠前列腺癌的生长,延长荷瘤小鼠生存时间。 展开更多

关键词 前列腺肿瘤 聚肌胞苷酸 死亡率

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前列腺组织STEAP表达与H2O2水平的关系 被引量：2

5

作者 潘玉琢 郭丽荣 +2 位作者 梁爽 李扬 赵雪俭 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期354-356,共3页

目的:探讨STEAP基因的功能。方法:应用RT-PCR、免疫印迹的方法,检测STEAP mRNA和蛋白在国人正常前列腺、前列腺癌组织中的表达水平。应用钼酸还原法检测正常前列腺内腺、外腺及前列腺癌组织H2O2水平,同时应用黄嘌呤氧化法测定3种组织中... 目的:探讨STEAP基因的功能。方法:应用RT-PCR、免疫印迹的方法,检测STEAP mRNA和蛋白在国人正常前列腺、前列腺癌组织中的表达水平。应用钼酸还原法检测正常前列腺内腺、外腺及前列腺癌组织H2O2水平,同时应用黄嘌呤氧化法测定3种组织中SOD水平,分析其与STEAP表达的相关性。结果:国人前列腺癌STEAP mRNA和蛋白高表达;前列腺癌组织中H2O2水平及总SOD水平明显高于正常前列腺。结论:STEAP的功能之一可能是诱导内源性H2O2水平增高,促进细胞快速生长。 展开更多

关键词 前列腺肿瘤 过氧化氢 前列腺6个跨膜上皮抗原

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Poly I∶C对人前列腺癌细胞PC-3M的生长抑制作用 被引量：1

6

作者 赵燕颖 潘玉琢 +3 位作者 李扬 刘亚男 高丽芳 赵雪俭 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期64-66,F0003,共4页

目的:观察聚肌胞(PolyI∶C)对体外培养的人前列腺癌细胞PC-3M生长的抑制作用。方法:前列腺癌PC-3M细胞经不同剂量PolyI∶C(100、200和400μg.L-1)作用后,相差显微镜观察细胞形态,MTT法检测细胞生长抑制率,流式细胞仪检测细胞凋亡及细胞... 目的:观察聚肌胞(PolyI∶C)对体外培养的人前列腺癌细胞PC-3M生长的抑制作用。方法:前列腺癌PC-3M细胞经不同剂量PolyI∶C(100、200和400μg.L-1)作用后,相差显微镜观察细胞形态,MTT法检测细胞生长抑制率,流式细胞仪检测细胞凋亡及细胞周期变化。结果:对照组细胞呈梭形贴壁生长,细胞数目多,PolyI∶C组细胞变圆贴壁不佳,细胞数目变少。PolyI∶C 400μg.L-1组的生长抑制率最高,200μg.L-1组次之,100μg.L-1组最低,三组间比较差异有显著性(P<0.05);Poly I∶C同一剂量组生长抑制率72 h最高,48 h次之,24 h时最低,三组间比较差异有显著性(P<0.05)。流式细胞检测结果显示:PolyI∶C可诱导PC-3M凋亡,凋亡率呈剂量依赖性,分别为3.9%、27.1%和42.9%,三组间比较差异有显著性(P<0.05)。PolyI∶C组细胞处于G1期的百分率(61.4%)明显高于对照组(33.9%)(P<0.05)。结论:PolyI∶C能抑制体外培养的PC-3M细胞生长,对PC-3细胞有显著的增殖抑制作用,呈剂量依赖性和时间依赖性,其机制可能与细胞周期阻滞、诱导细胞凋亡有关。 展开更多

关键词 聚肌胞 前列腺肿瘤 凋亡 细胞周期

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促结缔组织增生性小圆细胞肿瘤病理学及超微结构

7

作者 徐斌 王波 +2 位作者 顾俊莲 李馨 李扬 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期735-740,F0003,共7页

目的:观察促结缔组织增生性小圆细胞肿瘤的病理学和超微结构改变,提高对促结缔组织增生性小圆细胞肿瘤的认识和诊断水平。方法:对1例原发于右小腿的促结缔组织增生性小圆细胞肿瘤进行光镜和电镜观察及免疫组织化学染色分析,并结合文献... 目的:观察促结缔组织增生性小圆细胞肿瘤的病理学和超微结构改变,提高对促结缔组织增生性小圆细胞肿瘤的认识和诊断水平。方法:对1例原发于右小腿的促结缔组织增生性小圆细胞肿瘤进行光镜和电镜观察及免疫组织化学染色分析,并结合文献复习。结果:肿瘤大体表现为大小为3.2cm×2.4cm×1.3cm,切面灰黄色,见出血、坏死;光镜下表现为瘤细胞呈大小不等团巢状结构,巢之间有十分丰富的硬化性纤维结缔组织间质,并见坏死,巢团内瘤细胞排列成条索状,瘤细胞大小与形态较一致,呈小圆形或短梭形,核小、深染、核仁不明显;免疫组织化学显示为瘤细胞表达EMA(+)、CK(+)、NSE(+)及Desmin核旁点状染色(+),而不表达CgA、Myogenin、Syn、LCA、SMA、S-100、NF、GFAP、HMB45、HHF-35、CD3、CD10、Actin、CD99及CD20;电镜特征性结构为瘤细胞胞浆内核旁区有中间丝聚集物,呈小球形或螺纹状排列。结论:促结缔组织增生性小圆细胞肿瘤发生部位可在腹腔也可在腹腔外,发病年龄跨度较大。促结缔组织增生性小圆细胞肿瘤具有特殊的组织学和超微结构特征,免疫组织化学显示瘤细胞具有上皮源性、间质性和神经源性等多向分化的特点,并且RT-PCR在促结缔组织增生性小圆细胞肿瘤分子遗传学的诊断中有重要价值。促结缔组织增生性小圆细胞肿瘤预后差。 展开更多

关键词 软组织肿瘤 促结缔组织增生性小圆细胞肿瘤 光学显微镜 免疫组织化学 电子显微镜 超微结构

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前列腺癌患者外周血单个核细胞PSA mRNA表达

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作者 毛建华 张灵 +7 位作者 计国义 潘玉琢 高洪文 王伟华 孔祥波 赵丹 李扬 赵雪俭 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期470-472,共3页

目的：检测前列腺癌患者及对照者外周血单个核细胞前列腺特异性抗原（PSA）mRNA表达，并探讨其临床意义。方法：选择39例前列腺癌患者，12例健康体检者作为对照，取5mL静脉血，肝素抗凝，Ficoll密度梯度离心分离外周血单个核细胞，RT-PC... 目的：检测前列腺癌患者及对照者外周血单个核细胞前列腺特异性抗原（PSA）mRNA表达，并探讨其临床意义。方法：选择39例前列腺癌患者，12例健康体检者作为对照，取5mL静脉血，肝素抗凝，Ficoll密度梯度离心分离外周血单个核细胞，RT-PCR检测PSA mRNA表达。结果：①39例前列腺癌患者外周血单个核细胞PSA mRNA表达阳性检出率66．7％（26／39），其中血清PSA〉20.0μg·L^-1者23例，PSA mRNA表达阳性检出率87．9％（20／23）；血清PSA≤20．0μg·L^-1者16例，PsA mRNA表达阳性检出率37．5％（6／16）。对照组未见阳性表达。②16例血清PSA≤20．0μg·L^-1的前列腺癌患者PSA mRNA阳性表达的Gleason评分为；1～4分0／3，5～7分1／8，8～10分5／5，6例阳性者均为中、低分化癌。结论：外周血单个核细胞PSA mRNA的检测在血清PSA〉20．0μg·L^-1的前列腺癌患者中具有较高的敏感度，是一种可靠的检测方法。血清PSA≤20．0μg·L^-1的前列腺癌患者外周血单个核细胞PSA mRNA的检测可以预示微转移的发生。 展开更多

关键词 前列腺特异性抗原 前列腺肿瘤 单个核细胞 逆转录聚合酶链反应

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锌对前列腺癌细胞PC-3M凋亡的影响 被引量：5

9

作者 刘瑾 张灵 +4 位作者 李晓萌 许莉 汲坤 赵雪俭 李扬 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期808-811,共4页

目的:探讨锌对前列腺癌细胞PC-3M凋亡的影响。方法:分别选用不同浓度ZnSO4·7H2O(终浓度分别为6·25、15、25、50、100、150、200、250及300μmol·L-1)作用于PC-3M细胞24h,用MTT法筛选对PC-3M细胞增殖抑制的有效浓度,利用... 目的:探讨锌对前列腺癌细胞PC-3M凋亡的影响。方法:分别选用不同浓度ZnSO4·7H2O(终浓度分别为6·25、15、25、50、100、150、200、250及300μmol·L-1)作用于PC-3M细胞24h,用MTT法筛选对PC-3M细胞增殖抑制的有效浓度,利用吖啶橙/溴化乙锭染色、DNAladder及流式细胞术检测PC-3M细胞凋亡情况。结果:MTT显示,锌的浓度在250μmol·L-1时,PC-3M细胞存活率显著低于对照组(P<0·01)。Zn2+浓度达250μmol·L-1时,相差显微镜下细胞形态变化明显,细胞变长,并伸出较长的突起,细胞分裂相明显减少,细胞数量较对照组明显减少。吖啶橙/溴化乙锭染色显示,对照组细胞形态为规则的圆形,细胞膜光滑无皱缩和发泡,呈现均匀的绿色,偶可见橙色细胞(自然凋亡细胞);Zn2+(250μmol·L-1)作用后,相差显微镜下可观察到较多早期凋亡细胞,细胞多为圆形,但细胞膜较对照组粗糙,细胞呈绿色,细胞核中有鲜绿色的斑点;也可观察到较多的晚期凋亡细胞,细胞形状不规则,细胞膜粗糙,有较多突起,被吖啶橙染成橙色,细胞中有鲜亮的橙色斑点。DNAladder可见梯形条带出现;流式细胞术显示亚二倍体峰的出现,细胞凋亡率为13·3%。上述各项指标均显示PC-3M细胞的凋亡水平明显高于对照组(P<0·05)。结论:高Zn2+可以抑制前列腺癌细胞生长并诱导前列腺癌细胞凋亡。 展开更多

关键词 锌 PC-3M细胞 细胞凋亡

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纤维样肾小球病病理分析 被引量：2

10

作者 徐斌 王波 +2 位作者 邵晨 李扬 曲利娟 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期952-956,共5页

目的:光镜及电镜下观察纤维样肾小球病的病理特征,为纤维样肾小球病的诊断及鉴别诊断提供依据。方法:2例纤维样肾小球病患者(其中1例并发免疫触须样肾小球病)经皮肾穿刺取活检组织,HE、PAS、PAM-Masson染色,IgG、IgM、IgA、C3、C4、C1q... 目的:光镜及电镜下观察纤维样肾小球病的病理特征,为纤维样肾小球病的诊断及鉴别诊断提供依据。方法:2例纤维样肾小球病患者(其中1例并发免疫触须样肾小球病)经皮肾穿刺取活检组织,HE、PAS、PAM-Masson染色,IgG、IgM、IgA、C3、C4、C1q免疫组化染色,于光镜下观察;病理分析(光镜和电镜)及免疫组织化学染色;铀铅双重染色透射电镜观察。结果:光镜下PAM-Masson染色膜性肾病示系膜区团块状、肾小球基底膜细小嗜复红蛋白沉积,而膜增殖性肾小球肾炎示肾小球基底膜局灶增厚、"双轨化"伴嗜复红蛋白沉积。免疫组织化学染色膜性肾病和膜增殖性肾小球肾炎在肾小球系膜区有IgG、IgM、IgA、C3免疫复合物沉积,而在血管襻区膜性肾病见IgG、C3免疫复合物沉积,膜增殖性肾小球肾炎可见IgM、C3、C1q免疫复合物沉积,但其刚果红染色阴性。电镜下膜性肾病和膜增殖性肾小球肾炎在系膜区、基底膜上皮下和(或)内皮下有电子致密物沉积,见无分支的纤维样结构(直径15～25nm),而膜增殖性肾小球肾炎还可见微管状结构(直径30～50nm)。结论:纤维样肾小球病具有典型的形态学特征,确诊需依赖电镜特征性纤维样结构。 展开更多

关键词 肾脏疾病 病理学 纤维样肾小球病

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人参皂苷Rh_2诱导PC-3M细胞凋亡及其对新基因GRIM-19表达的影响 被引量：8

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作者 邵月婷 李峰 +4 位作者 高丽芳 孙连坤 胡嘉弟 李扬 赵雪俭 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期186-188,193,共4页

目的:研究人参单体皂苷Rh2对激素非依赖性人前列腺癌细胞(PC-3M细胞株)的致凋亡作用及其对新基因GRIM-19表达的影响。方法:实验分为Rh2高剂量组(40 mg.L-1)、Rh2中剂量组(30 mg.L-1)、Rh2低剂量组(15 mg.L-1)及对照组(未加药组)。分别... 目的:研究人参单体皂苷Rh2对激素非依赖性人前列腺癌细胞(PC-3M细胞株)的致凋亡作用及其对新基因GRIM-19表达的影响。方法:实验分为Rh2高剂量组(40 mg.L-1)、Rh2中剂量组(30 mg.L-1)、Rh2低剂量组(15 mg.L-1)及对照组(未加药组)。分别作用于PC-3M细胞24 h,吖啶橙染色观察其对PC-3M细胞的促凋亡作用;RT-PCR和Western blotting方法分别检测Rh2对PC-3M细胞GRIM-19 mRNA及其蛋白表达的影响。结果:Rh2高、中、低剂量组作用于PC-3M细胞24h吖啶橙染色均呈阳性结果。Rh2低剂量组出现典型“出芽”现象,细胞中出现致密鲜亮橙色斑点。对照组细胞呈均匀绿色;RT-PCR结果显示,GRIM-19 mRNA随Rh2浓度的增加表达逐渐增强,Rh2中、低剂量组与对照组比较差异具有显著性(P<0.05),Rh2高剂量组GRIM-19 mRNA表达与对照组比较差异具有高度显著性(P<0.01)。Western blotting结果与RT-PCR结果相一致,GRIM-19蛋白随Rh2浓度的增加其表达逐渐增强,Rh2中低剂量组与对照组比较差异具有显著性(P<0.05),Rh2高剂量组GRIM-19蛋白的表达与对照组比较差异具有高度显著性(P<0.01)。结论:Rh2诱导PC-3M细胞凋亡与上调GRIM-19基因和蛋白表达有关,其表达强度呈剂量依赖性。 展开更多

关键词 前列腺肿瘤 细胞凋亡 人参皂苷 GRIM-19

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尾叶香茶菜二萜类化合物B对人宫颈癌细胞的生长抑制作用及其机制 被引量：2

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作者 刘亚男 金永日 +6 位作者 钟加滕 朱璐 汲坤 李晓洁 崔伟 李扬 赵雪俭 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期54-57,I0001,共5页

目的:观察尾叶香茶菜二萜类化合物B(DB)对人宫颈癌细胞株Hela细胞的生长抑制作用并探讨其机制。方法:处于对数生长期的Hela细胞分为正常对照组,0.5、1.0、2.0、4.0、8.0、16.0、32.0mg.L-1DB实验组,MTT法观察不同剂量DB作用24和48h后Hel... 目的:观察尾叶香茶菜二萜类化合物B(DB)对人宫颈癌细胞株Hela细胞的生长抑制作用并探讨其机制。方法:处于对数生长期的Hela细胞分为正常对照组,0.5、1.0、2.0、4.0、8.0、16.0、32.0mg.L-1DB实验组,MTT法观察不同剂量DB作用24和48h后Hela细胞增殖抑制率,相差显微镜观察DB作用后Hela细胞形态的改变,RT-PCR和Western blotting分别观察DB作用后Hela细胞P53、P21、CDK2mRNA和蛋白表达水平。结果:MTT检测,24h时2.0、4.0、8.0DB组Hela细胞增殖抑制率分别为18.18%、28.89%和32.84%,48h时2.0、4.0、8.0DB组Hela细胞增殖抑制率分别为26.64%、47.03%和51.90%,呈时间-剂量依赖性(P<0.05或P<0.01);形态学观察,DB作用后Hela细胞变圆、体积缩小,有部分细胞漂浮;2.0、4.0和8.0mg.L-1DB分别作用Hela细胞24和48h后,P53和P21mRNA和蛋白表达水平明显高于正常对照组(P<0.01),CDK2mRNA和蛋白表达水平明显低于正常对照组(P<0.01)。结论:DB可抑制Hela细胞生长,其机制可能与上调细胞周期相关基因p53、p21的表达,下调CDK2表达,从而影响细胞从G1期进入S期有关。 展开更多

关键词 二萜类化合物B 尾叶香茶菜 宫颈肿瘤 细胞周期

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细胞死亡调节因子GRIM-19蛋白在肾脏透明细胞癌组织中的表达及意义 被引量：2

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作者 汲坤 王波 +5 位作者 李馨 于浩 张灵 胡嘉弟 赵雪俭 李扬 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期146-149,F0003,共5页

目的:探讨细胞死亡调节因子(GRIM-19)蛋白在肾脏透明细胞癌组织和正常肾组织中的表达及意义,阐明GRIM-19在肾脏透明细胞癌发生发展中的抑癌作用。方法:采用免疫组织化学染色方法检测21例肾脏透明细胞癌组织和7例正常肾组织GRIM-19蛋白... 目的:探讨细胞死亡调节因子(GRIM-19)蛋白在肾脏透明细胞癌组织和正常肾组织中的表达及意义,阐明GRIM-19在肾脏透明细胞癌发生发展中的抑癌作用。方法:采用免疫组织化学染色方法检测21例肾脏透明细胞癌组织和7例正常肾组织GRIM-19蛋白的表达;RT-PCR方法检测4例正常肾组织和8例肾脏透明细胞癌组织中GRIM-19基因mRNA的表达。结果:免疫组化检测GRIM-19蛋白在肾脏透明细胞癌组织中阳性表达率为52.3%(11/21),在正常肾脏组织的阳性表达率为100%(7/7),两者比较差异有显著性(P<0.05)。病理分级Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ级的肾脏透明癌组织中的表达率分别为100%(6/6)、40%(4/10)和20%(1/5),三种病理分级GRIM-19表达率比较差异有显著性(P<0.01)。RT-PCR检测GRIM-19基因在肾脏透明细胞癌组织中阳性表达率为62.5%(5/8),在正常肾脏组织的阳性表达率为100%(4/4),两者比较差异有显著性(P<0.01)。结论:GRIM-19在肾脏透明细胞癌基因和蛋白水平表达明显下降,并与其病理分级存在明显的关联性,提示GRIM-19蛋白可能在肾脏透明细胞癌发生发展中发挥抑癌作用。 展开更多

关键词 肾透明细胞肿瘤 细胞死亡调节因子 免疫组织化学 逆转录聚合酶链反应

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hERβ全长基因真核表达载体pEGFP-C1-hERβ的构建及其在PC-3M细胞中的表达 被引量：1

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作者 李峰 邵月婷 +6 位作者 何静春 秦宣锋 陈超 王驭良 孙连坤 李扬 赵雪俭 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期189-193,共5页

目的:构建人雌激素受体β(hERβ)全长基因的真核表达载体pEGFP-C1-hERβ,并转染激素非依赖性前列腺癌细胞株PC-3M。方法:采用RT-PCR法从卵巢囊肿患者切除的部分正常卵巢组织中钓取hERβ全长基因(1 593 bp),与pMD18-T载体连接做全自动序... 目的:构建人雌激素受体β(hERβ)全长基因的真核表达载体pEGFP-C1-hERβ,并转染激素非依赖性前列腺癌细胞株PC-3M。方法:采用RT-PCR法从卵巢囊肿患者切除的部分正常卵巢组织中钓取hERβ全长基因(1 593 bp),与pMD18-T载体连接做全自动序列测定。将测序正确的克隆质粒pMD18-T-hERβ和表达载体pEGFP-C1分别用HindⅢ和BamHⅠ进行双酶切,应用基因重组技术构建hERβ全长基因真核表达载体pEGFP-C1-hERβ。质粒经HindⅢ和BamHⅠ双酶切和PCR电泳鉴定后,采用脂质体转染法转染PC-3M细胞。结果:重组质粒经限制性酶切鉴定得到与hERβ全长基因长度一致(1 612 bp)的酶切产物;测序分析证实,PCR产物与GenBank上登录的hERβ基因(NM_001437)序列完全一致,表明成功地完成了hERβ的扩增和表达载体的构建;荧光显微镜下可见转染的PC-3M细胞有绿色荧光蛋白的表达;PCR测定分析,转染细胞hERβ的表达增加。结论:构建完成真核表达载体pEGFP-C1-hER,βhERβ基因在PC-3M细胞内成功表达。 展开更多

关键词 受体 雌激素 激素非依赖性前列腺癌细胞 前列腺肿瘤 真核表达 遗传载体 转染

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