水流动力学注射介导的IL-12基因在小鼠体内的高效表达 被引量：5

1

作者 李晓敏 李艳茹 +2 位作者 张海英 王健君 王琳 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第12期1064-1068,1070,共6页

目的:评估水流动力学注射法转移表达小鼠白细胞介素12(mIL-12)质粒pCMV-mIL-12的有效性,以及质粒DNA重复注射后转基因的表达情况。方法:通过小鼠尾静脉大体积快速注射pCMV-mIL-12质粒后取血及主要器官,应用ELISA、PCR、RT-PCR及免疫组... 目的:评估水流动力学注射法转移表达小鼠白细胞介素12(mIL-12)质粒pCMV-mIL-12的有效性,以及质粒DNA重复注射后转基因的表达情况。方法:通过小鼠尾静脉大体积快速注射pCMV-mIL-12质粒后取血及主要器官,应用ELISA、PCR、RT-PCR及免疫组织化学染色等方法,检测质粒在组织器官中的分布与表达。为了研究重复注射质粒后mIL-12的表达,分别在首次注射后第7天、第14天和第30天二次注射相同剂量的质粒。每次注射前及注射后均取血检测mIL-12的表达及其诱导产生的IFN-γ及NO。结果:注射后10小时血清中的mIL-12蛋白水平最高,第7天恢复到基线值,其表达呈DNA剂量依赖性。IFN-γ及NO的表达高峰均出现在注射后第3天。首次注射后第14天及第30天重复注射可获得mIL-12的再次高效表达。结论:水流动力学注射方法是一种简便、有效的体内IL-12基因转移方式。重复应用水流动力学注射方法体内转移表达mIL-12的裸DNA后,可以获得转基因的再次高效表达,两次注射间隔时间至少为14天。 展开更多

关键词 水流动力学注射 质粒DNA 白细胞介素12 基因转移

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IL-1及VEGF在大鼠皮肤切创愈合过程中的免疫组织化学表达 被引量：4

2

作者 宣兆艳 卢英强 +3 位作者 刘东辉 王心蕊 陈志明 王利君 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期460-463,共4页

目的:探讨白细胞介素1(IL-1)及血管内皮生长因子(VEGF)的表达变化与损伤时间的关系,以期为法医病理学皮肤损伤时间判定提供有效的免疫组织化学指标。方法:51只雄性SD大鼠随机均分为17组(每组3只),随机选取13组大鼠背部皮肤行切割创,在... 目的:探讨白细胞介素1(IL-1)及血管内皮生长因子(VEGF)的表达变化与损伤时间的关系,以期为法医病理学皮肤损伤时间判定提供有效的免疫组织化学指标。方法:51只雄性SD大鼠随机均分为17组(每组3只),随机选取13组大鼠背部皮肤行切割创,在伤后不同时间(5、10、30 min及1、3、5、7、9和12 h以及1、3、5和7 d)处死大鼠作为生前损伤组;另取3组大鼠,脱颈处死后5、10及30 min在背部行切割创,作为死后伤对照组;取余下1组大鼠背部皮肤作为正常对照组。应用免疫组织化学技术,检测生前损伤组、死后伤对照组和正常对照组大鼠不同损伤时间的生前伤、死后伤及正常皮肤组织中IL-1及VEGF的表达变化。结果:在生前损伤组,IL-1于伤后30 min,即在上皮组织和肉芽组织(巨噬细胞和成纤维细胞)中呈阳性表达,并持续至伤后5 d,IL-1阳性细胞率在损伤后3 h内较低,伤后5 h达到峰值(49.87%±3.42%),随后有所下降,但伤后3 d达第2次峰值(47.56%±7.52%),而后逐渐恢复至正常水平;VEGF于损伤后3 h在表皮组织中呈阳性表达,且持续至伤后10 d。死后伤对照组与正常对照组IL-1及VEGF的表达比较,差异均无显著性(P>0.05)。结论:VEGF和IL-1随损伤时间变化呈规律性表达,VEGF和IL-1可作为法医学皮肤损伤时间判定的有效指标。 展开更多

关键词 皮肤 创伤和损伤 免疫组织化学 白细胞介素1 内皮生长因子

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己酮可可碱对大鼠离体心脏缺血/再灌注及缺钙/复钙损伤的保护作用 被引量：5

3

作者 张明 吕晓艳 +2 位作者 张海英 王春梅 陈立 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期937-941,共5页

目的探讨己酮可可碱对缺血/再灌注引起心肌损伤的保护作用及其机制。方法首先建立心肌缺血/再灌注模型,采用Langendorff灌流装置进行20min预灌注,30min缺血,30min再灌注,70只Wistar大鼠随机分为己酮可可碱4个剂量(50、100、125、150μmo... 目的探讨己酮可可碱对缺血/再灌注引起心肌损伤的保护作用及其机制。方法首先建立心肌缺血/再灌注模型,采用Langendorff灌流装置进行20min预灌注,30min缺血,30min再灌注,70只Wistar大鼠随机分为己酮可可碱4个剂量(50、100、125、150μmol·L-1)组、缺血/再灌注组、对照组以及己酮可可碱再灌注组,持续观察己酮可可碱对血流动力学指标的影响;建立缺钙/复钙模型,将30只Wistar大鼠随机分为己酮可可碱给药组、钙反常组和对照组,离体心脏预灌注20 min,无钙灌注5min,复钙灌注30min,持续观察己酮可可碱对血流动力学指标的影响。结果缺血前及灌注期己酮可可碱100μmol·L-1给药能明显恢复大鼠的缺血/再灌注前后心脏的左室发展压(P<0.05),左心室舒张末期压亦明显下降;100μmol·L-1己酮可可碱明显改善钙反常模型钙超载引起的左心室收缩功能异常,左室发展压恢复41%(P<0.05)。结论己酮可可碱提高大鼠心肌缺血缺氧后心肌收缩力的恢复水平、增强心肌缺血缺氧的耐受性;改善心肌缺血/再灌注引起的钙超载可能是其心肌保护作用的机制之一。 展开更多

关键词 己酮可可碱 缺血/再灌注 钙反常

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CD_(44)V_6、PCNA和VEGF在乳腺癌中的表达及其相关性分析 被引量：2

4

作者 刘湛 宋向巍 +2 位作者 关文曾 乔士兴 王璐 《白求恩医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期509-512,共4页

目的 :探讨 CD4 4V6、增殖细胞核抗原 (PCNA)、血管内皮细胞生长因子 (VEGF)在乳腺癌中的表达及其与乳腺癌浸润和转移的关系。方法 :采用免疫组化 S- P法检测 76例乳腺癌组织中 CD4 4V6、PCNA、VEGF的表达。结果 :CD4 4V6、VEGF在乳腺... 目的 :探讨 CD4 4V6、增殖细胞核抗原 (PCNA)、血管内皮细胞生长因子 (VEGF)在乳腺癌中的表达及其与乳腺癌浸润和转移的关系。方法 :采用免疫组化 S- P法检测 76例乳腺癌组织中 CD4 4V6、PCNA、VEGF的表达。结果 :CD4 4V6、VEGF在乳腺癌中表达阳性率分别为 86 .8%、80 .3%。CD4 4V6表达同肿瘤大小、组织学分级、淋巴结状态相关有显著性 (P<0 .0 5 ) ;VEGF则与组织学分级和淋巴结状态相关有显著性 (P<0 .0 5 )。 CD4 4V6的表达与 PCNA、VEGF的表达相关 (P<0 .0 5 )。结论 :CD4 4V6、PCNA、VEGF可以作为评价乳腺癌浸润和转移的指标 ,三者在淋巴结转移过程中具有协同作用。 展开更多

关键词 CD44V6 PCNA VEGF 增殖细胞核抗原 血管内皮细胞生长因子 乳腺肿瘤 转移肿瘤

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长春新碱对人成骨肉瘤MG63细胞的促凋亡作用及其机制 被引量：2

5

作者 王洋 苏学今 +5 位作者 曲珊珊 娄楠 张海英 史艳芬 李玉林 李荣贵 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期611-615,共5页

目的:观察长春新碱对人成骨肉瘤MG63细胞促凋亡作用,探讨其引起细胞凋亡的分子机制。方法:以0、5、10、20、50、100μg.L-1不同浓度长春新碱处理的MG63细胞,分别经AnnexinV-PI双染和DCFH-DA染色后,应用流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞内... 目的:观察长春新碱对人成骨肉瘤MG63细胞促凋亡作用,探讨其引起细胞凋亡的分子机制。方法:以0、5、10、20、50、100μg.L-1不同浓度长春新碱处理的MG63细胞,分别经AnnexinV-PI双染和DCFH-DA染色后,应用流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞内活性氧化物(ROS)水平,用实时定量RT-PCR分析mRNA表达水平。结果:较低浓度(10μg.L-1)长春新碱即可使MG63细胞凋亡率升高至17.6%(P<0.05),且随着长春新碱浓度的增加细胞凋亡率增加,呈明确的剂量-效应关系;更低浓度(5μg.L-1)长春新碱即可引起细胞内ROS水平明显升高及过氧化氢酶(CAT)基因表达下调(P<0.05)。结论:长春新碱从较低浓度起即有促进细胞凋亡作用,其作用机制是通过下调CAT基因表达,导致细胞内ROS异常蓄积以促进MG63细胞凋亡。 展开更多

关键词 MG63 长春新碱 细胞凋亡 活性氧化物 CAT

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复方资癸元阳胶囊治疗良性前列腺增生症患者的效果评价 被引量：3

6

作者 李嘉音 王仕超 +3 位作者 全成实 李莉莎 刘敏如 李玉林 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期1151-1156,共6页

目的:探讨补肾中药复方资癸元阳胶囊对良性前列腺增生(BPH)患者的治疗效果,阐明复方资癸元阳胶囊治疗具有明显肾气虚证表现BPH患者的临床作用。方法:66例BPH患者分为试验组(给予复方资癸元阳胶囊)和对照组(给予安慰剂),观察治疗前后2组... 目的:探讨补肾中药复方资癸元阳胶囊对良性前列腺增生(BPH)患者的治疗效果,阐明复方资癸元阳胶囊治疗具有明显肾气虚证表现BPH患者的临床作用。方法:66例BPH患者分为试验组(给予复方资癸元阳胶囊)和对照组(给予安慰剂),观察治疗前后2组患者的国际前列腺症状评分(I-PSS)、最大尿流率、生活质量评分(QOL)、国际勃起功能指数(IIEF)和睾酮水平。结果:中医证候疗效,试验组和对照组临床控制、显效和有效患者所占比例分别为10%、13%、57%和0%、6.25%、16.00%,总有效率分别为86.00%和22.25%,试验组患者疗效优于对照组(P<0.05)。主症疗效,试验组有尿频、夜尿次数多和排尿困难等症状患者数量少于对照组(P<0.05)。结论:复方资癸元阳胶囊对肾气虚型良性BPH患者具有良好的临床疗效和安全性。 展开更多

关键词 良性前列腺增生症 复方资癸元阳胶囊 肾虚证

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腺病毒介导的HSV-tk/GCV系统对肺癌细胞的杀伤作用 被引量：2

7

作者 陈立 李凡 +2 位作者 高航 张海英 刘雁军 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期621-624,共4页

目的:用含HSV-tk重组腺病毒载体转染Lewis肺癌细胞,探讨其对肺癌细胞的杀伤作用。方法:利用同源重组技术构建含HSV-tk基因的重组腺病毒载体(AdCMVtk),将含LacZ基因的腺病毒载体(AdCMVLacZ)转染Lewis肺癌细胞,X-gal染色后,测定腺病毒对... 目的:用含HSV-tk重组腺病毒载体转染Lewis肺癌细胞,探讨其对肺癌细胞的杀伤作用。方法:利用同源重组技术构建含HSV-tk基因的重组腺病毒载体(AdCMVtk),将含LacZ基因的腺病毒载体(AdCMVLacZ)转染Lewis肺癌细胞,X-gal染色后,测定腺病毒对该细胞的转染率,并观察AdCMVtk/GCV系统对Lewis肺癌细胞存活率的影响。结果:随着AdCMVLacZ的病毒量(MOI)增加,对Lewis细胞转染率也增加,当MOI为500时,转染率可达100%。AdCMVtk/GCV系统可明显杀伤Lewis细胞,且随着AdCMVtk的MOI增加,或GCV浓度的增加,细胞存活率减少,但单独使用AdCMVtk或GCV时,对Lewis细胞无杀伤作用。AdCMVtk/GCV系统对该细胞的杀伤作用具有明显的旁观者效应,20%Lewis细胞被AdCMVtk转染可引起74%细胞死亡。结论:AdCMVtk/GCV系统杀伤肿瘤细胞既有效又安全。 展开更多

关键词 腺病毒载体 HSV-TK基因 癌 Lewis肺 转染

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干扰素α-2b联合红细胞生成素对骨髓纤维化红系祖细胞作用的体外研究 被引量：1

8

作者 袁长吉 王建伟 +1 位作者 高素君 姚程 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期187-189,共3页

目的 :研究干扰素 α- 2 b( IFN- α2 b)联合红细胞生成素 ( EPO)对骨髓纤维化 ( MF)红系祖细胞 ( CFU- E)的作用。方法 :采用细胞体外培养法对 2 0例 MF患者 CFU- E进行观察。结果 :单用IFN-α2 b对 MF患者 CFU- E有明显促增殖作用 ;与... 目的 :研究干扰素 α- 2 b( IFN- α2 b)联合红细胞生成素 ( EPO)对骨髓纤维化 ( MF)红系祖细胞 ( CFU- E)的作用。方法 :采用细胞体外培养法对 2 0例 MF患者 CFU- E进行观察。结果 :单用IFN-α2 b对 MF患者 CFU- E有明显促增殖作用 ;与 EPO联合时其促增殖作用更加明显 ,使 MF患者 CFU- E接近正常对照组。结论 :IFN-α2 b联合 EPO对 MF患者红系祖细胞具有显著促增殖作用 。 展开更多

关键词 干扰素Α-2B 红细胞生成素 骨髓纤维化 红系祖细胞

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多西紫杉醇对人血管肉瘤细胞株增殖的抑制作用 被引量：1

9

作者 姜日花 蒋忠民 李玉林 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期65-66,共2页

目的 :观察多西紫杉醇 ( docetaxel,DTX)对人血管肉瘤细胞株 ( ISOHAS)的增殖抑制作用。方法 :采用人血管肉瘤细胞株 ISOHAS进行培养 ,在培养液中分别加入不同浓度的 DTX,作用1、3、6和 9h后 ,观察 ISOHAS细胞形态的变化 ,并通过 Alamar... 目的 :观察多西紫杉醇 ( docetaxel,DTX)对人血管肉瘤细胞株 ( ISOHAS)的增殖抑制作用。方法 :采用人血管肉瘤细胞株 ISOHAS进行培养 ,在培养液中分别加入不同浓度的 DTX,作用1、3、6和 9h后 ,观察 ISOHAS细胞形态的变化 ,并通过 Alamar Blue法测定 ISOHAS对抗肿瘤药的感受性。结果 :1 0 0μg· L-1浓度 DTX和 5 0 0μg· L-1浓度 DTX,作用 3h、6h的抑制率差异有显著性 ( P<0 .0 1 ) ;DTX作用 1、3、6和 9h时 ,5 0 μg· L-1浓度 DTX的抑制率与 1 0 0 μg· L-1DTX和 5 0 0 μg·L-1DTX的抑制率差异均有显著性 ( P<0 .0 1 )。结论 :DTX对 ISOHAS细胞具有较强的增殖抑制作用 。 展开更多

关键词 多西紫杉醇 血管肉瘤 药物疗法 人血管肉瘤细胞株

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甲基汞对豚鼠耳蜗外毛细胞外向钾电流的影响

10

作者 刘淑芳 郭晓峰 全成实 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期612-614,共3页

目的:观察甲基汞对豚鼠耳蜗外毛细胞侧膜K+电流的影响,探讨甲基汞耳毒性的离子机制。方法:采用全细胞膜片钳技术分别观察汞污染度为1/1000 LD50、1/100 LD50、1/10 LD50对外毛细胞Ca2+敏感外向IK(Ca)电流的影响。结果:汞中毒后IK(Ca)幅... 目的:观察甲基汞对豚鼠耳蜗外毛细胞侧膜K+电流的影响,探讨甲基汞耳毒性的离子机制。方法:采用全细胞膜片钳技术分别观察汞污染度为1/1000 LD50、1/100 LD50、1/10 LD50对外毛细胞Ca2+敏感外向IK(Ca)电流的影响。结果:汞中毒后IK(Ca)幅值分别为(1.48±0.28)、(1.36±0.16)和(1.22±0.13)nA,与正常对照组相比分别下降了8%、16%和25%(P<0.05)。结论:甲基汞以浓度依赖方式抑制Ca2+敏感的外向K+电流,使IK(Ca)幅值降低,最后导致听觉机能下降。这可能是甲基汞中毒的耳毒性机制之一。 展开更多

关键词 甲基汞 毛细胞 外向钾电流 膜片钳术

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子痫性妊娠毒血症及妊娠肾病尸检1例

11

作者 邓方阁 宋晶莹 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 2004年第5期641-642,共2页

关键词 子痫性妊娠毒血症 妊娠肾病 尸检 病例报告 肝微血管 内皮机能

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核仁组成区嗜银蛋白和增殖指数在肾母细胞瘤研究中的应用

12

作者 周晓岩 王琳 +1 位作者 姜云鹏 陈远耀 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期79-81,共3页

目的 :研究肾母细胞瘤的组织学分型、临床分期与 DNA增殖指数及核仁组成区相关嗜银蛋白 ( Ag NOR)间的关系。方法 :通过流式细胞仪测定增殖指数 ( proliferating index,PI) ;用组织化学法检测 Ag NOR。结果 :正常肾脏与肾母细胞瘤组织间... 目的 :研究肾母细胞瘤的组织学分型、临床分期与 DNA增殖指数及核仁组成区相关嗜银蛋白 ( Ag NOR)间的关系。方法 :通过流式细胞仪测定增殖指数 ( proliferating index,PI) ;用组织化学法检测 Ag NOR。结果 :正常肾脏与肾母细胞瘤组织间的 Ag NOR颗粒计数、颗粒直径及形状因子均有明显差异 ;间变型的 Ag NOR颗粒计数 ( 4 .2 )显著高于无间变型 ( 3.2 8) ;Ag NOR颗粒计数随分期增高而增高 ;高 Ag NOR计数组的 PI值 ( 4 4.35 )显著高于低 Ag NOR计数组 ( 32 .5 5 )。结论 :PI值及 Ag 展开更多

关键词 肾母细胞瘤 流式细胞术 核仁组成区嗜银蛋白

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