以器官系统为中心的实验教学方法在长学制医学教育中的应用 被引量：2

1

作者 苏静 康劲松 +5 位作者 郭丽荣 李洪岩 孟艳 李峰 李扬 孙连坤 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期1910-1910,共1页

目的:整合病理生理学、生理学、药理学的呼吸系统实验,将以器官系统为中心的课程模式应用到机能学实验教学当中,研究以人体器官系统为中心的课程模式在实验教学中的教学效果,探讨学生为主体、教师参与学生学习进程教学方法的可行性。方... 目的:整合病理生理学、生理学、药理学的呼吸系统实验,将以器官系统为中心的课程模式应用到机能学实验教学当中,研究以人体器官系统为中心的课程模式在实验教学中的教学效果,探讨学生为主体、教师参与学生学习进程教学方法的可行性。方法:在2010年春季、秋季学期和2011年春季学期,以2007级和2008级临床医学实验班(八年制)、2008级临床医学七年制3个年级的学生作为教学对象。综合吉林大学基础医学院病理生理学系、生理学系、药理学系及机能科学实验教学分中心的教学资源,进行呼吸系统综合性实验"呼吸运动调节和呼吸衰竭"。以课堂提问和课后交流的方式检查学生对呼吸系统知识的理解,课程结束后以问卷调查的形式对学生进行教学反馈。结果:学生反馈认为本次实验内容与以往的教学方式相比有新意的占96.72%;认为对自己科研兴趣和科研思维等方面能力的提高有帮助的占83.29%;认为开设本次实验在锻炼和提高知识综合应用、独立解决问题等方面能力作用较大的占91.95%。结论:以人体器官系统为中心的课程模式具有良好实验教学效果,以学生为主体、教师参与学生学习进程的教学方法已经体现出其优于传统实验教学的价值。 展开更多

关键词 病理生理学 临床医学 基础医学 疾病发生机制

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雄激素受体可变剪接异变体7与前列腺癌关系的研究进展 被引量：2

2

作者 于冰冰 李扬 邵晨 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期1092-1098,共7页

雄激素受体(AR)信号通路在前列腺癌(PCa)发生发展过程中起重要作用。AR信号转导途径的改变和重新激活是促进去势抵抗性前列腺癌(CRPC)发展和耐药性产生的核心因素。AR可变剪接异变体7(AR-V7)的表达是AR信号通路异常激活的重要原因之一,A... 雄激素受体(AR)信号通路在前列腺癌(PCa)发生发展过程中起重要作用。AR信号转导途径的改变和重新激活是促进去势抵抗性前列腺癌(CRPC)发展和耐药性产生的核心因素。AR可变剪接异变体7(AR-V7)的表达是AR信号通路异常激活的重要原因之一,AR-V7具有与AR不同的结构及功能,在PCa发展、耐药和临床治疗中起着重要的推动作用,同时也具有作为CRPC生物标志物和治疗靶标的巨大潜力。现总结分析AR与AR-V7的结构和功能上的差异,以及在AR靶向药物作用下CRPC患者的疗效,为CRPC的治疗提供理论依据。阐述AR-V7在PCa治疗和耐药方面的主要研究进展及其在判断CRPC疗效和预后方面的作用,同时进一步分析AR-V7特异性检测在临床应用中的不足之处,以期取得技术上的进步和发展。 展开更多

关键词 前列腺肿瘤 去势抵抗性前列腺癌 雄激素受体 雄激素受体可变剪接异变体7 多烯紫杉醇

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郁金水煎剂对四氯化碳致急性肝损伤小鼠肝细胞p53和caspase-3表达的影响及其对肝损伤的保护作用 被引量：26

3

作者 张婉娴 朱彤彤 +3 位作者 鲁育铭 赵丽晶 刘鹏 赵丽娟 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期82-86,I0003,共6页

目的:探讨单味郁金水煎剂对四氯化碳(CCl4)致急性肝损伤小鼠肝细胞凋亡基因p53和caspase-3蛋白表达的影响,阐明郁金对肝损伤保护作用的机制。方法:ICR小鼠60只,随机分为空白对照组(等体积生理盐水)、模型组(等体积生理盐水)、郁金低剂量... 目的:探讨单味郁金水煎剂对四氯化碳(CCl4)致急性肝损伤小鼠肝细胞凋亡基因p53和caspase-3蛋白表达的影响,阐明郁金对肝损伤保护作用的机制。方法:ICR小鼠60只,随机分为空白对照组(等体积生理盐水)、模型组(等体积生理盐水)、郁金低剂量组(2.5g·kg-1)、郁金中剂量组(5.0g·kg-1)、郁金高剂量组(10.0g·kg-1)和阳性药组(甘利欣22.5mg·kg-1);连续给药7d后,除空白对照组外各组小鼠均通过CCl4复制小鼠急性肝损伤模型。计算肝指数,测定血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)活性,HE染色观察肝组织形态学变化;RT-PCR法检测肝细胞p53基因转录情况;免疫组织化学法检测肝细胞caspase-3蛋白表达。结果:与空白对照组比较,模型组小鼠肝指数明显增加(P<0.05);与模型组比较,各给药组小鼠肝指数明显降低(P<0.05)。与空白对照组比较,模型组小鼠血清ALT增高(P<0.01);与模型组比较,阳性药组及郁金高、中剂量组小鼠血清ALT明显降低(P<0.05)。肝脏形态学变化,肉眼观察,空白对照组小鼠肝脏呈现粉红色,质软而富有弹性,模型组小鼠肝脏明显肿大、呈微黄色,表面可见散在点状及片状黄褐色斑点,质脆,各给药组小鼠肝脏大小、颜色及质地均界于空白对照组与模型组之间,且表面无明显黄褐色斑点;镜下观察,空白对照组小鼠肝脏结构正常,模型组小鼠细胞呈明显局灶性气球样变、水样变性和死亡,而阳性药组和郁金中、高剂量组小鼠与模型组比较肝组织上述病灶数量减少。与空白对照组比较,模型组小鼠肝细胞p53基因转录明显增强(P<0.05);与模型组比较,郁金高剂量组小鼠肝细胞p53基因转录显著减弱(P<0.05)。与模型组比较,郁金给药组小鼠肝细胞caspase-3蛋白表达减弱。结论:郁金对CCl4致小鼠急性肝损伤有一定的拮抗作用,其机制之一可能与下调凋亡基因p53和caspase-3蛋白的表达、阻碍肝细胞凋亡有关。 展开更多

关键词 郁金 急性肝损伤 四氯化碳 p53基因 caspase-3

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PI3K/AKT/mTOR信号通路与线粒体稳态在疾病治疗中的作用 被引量：12

4

作者 胡晓青 于慧美 +4 位作者 沈璐妍 杨一萌 陈秋艳 董德录 孙连坤 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第11期2072-2076,共5页

在不同环境下,细胞需要协调多种信号通路而有组织地适应不断变化的内外环境,以维持细胞稳态。鉴于疾病的复杂性,需要我们向整体研究的思路转变,以重要信号通路为立足点,深入了解疾病背景下信号通路在维系细胞稳态中的调控机制,为药物靶... 在不同环境下,细胞需要协调多种信号通路而有组织地适应不断变化的内外环境,以维持细胞稳态。鉴于疾病的复杂性,需要我们向整体研究的思路转变,以重要信号通路为立足点,深入了解疾病背景下信号通路在维系细胞稳态中的调控机制,为药物靶向治疗提供更多的理论基础。 展开更多

关键词 PI3K/AKT/mTOR信号通路 线粒体稳态 癌症 细胞衰老 靶向治疗

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杨梅素对人卵巢癌SKOV3细胞的凋亡诱导作用 被引量：6

5

作者 于洋 刘亚萌 +6 位作者 吴少花 谢奇 衣丹 徐海月 胡耀狄 陈君 徐冶 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期902-906,I0001,I0002,共7页

目的:观察杨梅素对人卵巢癌SKOV3细胞的生长抑制及凋亡诱导作用,并探讨其可能机制。方法:体外培养人卵巢癌SKOV3细胞,按杨梅素给药浓度将细胞分为对照组和低、中、高浓度杨梅素组,杨梅素给药浓度分别为0、20、40和60mg·L-1。MTT法... 目的:观察杨梅素对人卵巢癌SKOV3细胞的生长抑制及凋亡诱导作用,并探讨其可能机制。方法:体外培养人卵巢癌SKOV3细胞,按杨梅素给药浓度将细胞分为对照组和低、中、高浓度杨梅素组,杨梅素给药浓度分别为0、20、40和60mg·L-1。MTT法检测各组SKOV3细胞存活率;激光共聚焦显微镜观察各组SKOV3细胞核形态变化并计算异常细胞核比率;免疫荧光法检测各组SKOV3细胞中凋亡相关蛋白-活化半胱氨酸蛋白酶3(active Caspase-3)的表达;Western blotting法检测各组SKOV3细胞中DNA损伤相关蛋白γ-H2AX的表达水平。结果:与对照组比较,低、中和高浓度杨梅素组SKOV3细胞存活率明显下降(t=-12.35,t=-11.42,t=-10.21,P<0.05);激光共聚焦显微镜下各浓度杨梅素组细胞出现核皱缩等凋亡形态学改变,且细胞中异常细胞核比率高于对照组(t=6.87,t=9.35,t=7.22,P<0.05),高浓度杨梅素组异常细胞核比率高于低、中浓度杨梅素组(t=9.55,t=7.25,P<0.05);随着杨梅素给药浓度的增加,SKOV3细胞中active Caspase-3的表达水平有升高趋势,各浓度杨梅素组SKOV3细胞中γ-H2AX的表达水平高于对照组(t=5.41,t=3.21,t=6.58,P<0.05)。结论:杨梅素可抑制人卵巢癌SKOV3细胞增殖并诱导其凋亡,DNA双链断裂可能是其促凋亡的机制之一。 展开更多

关键词 杨梅素 卵巢肿瘤 SKOV3细胞 细胞凋亡 DNA双链断裂

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人参二醇组皂苷对家兔急性酒精性心肌损伤的保护作用及其机制 被引量：3

6

作者 王晓琴 杜艳伟 +5 位作者 闻乃研 褚红硕 李娜 朱必涛 鲁育铭 赵丽晶 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期471-475,共5页

目的:探讨人参二醇组皂苷(PDS)对家兔酒精性心力衰竭的保护作用,阐明PDS保护心肌的作用机制。方法:15只健康家兔随机分为对照组、模型组和PDS组,每组5只。对照组家兔静脉滴注生理盐水0.2g·mL-1,模型组家兔恒速静脉滴注20%酒精(0.1g... 目的:探讨人参二醇组皂苷(PDS)对家兔酒精性心力衰竭的保护作用,阐明PDS保护心肌的作用机制。方法:15只健康家兔随机分为对照组、模型组和PDS组,每组5只。对照组家兔静脉滴注生理盐水0.2g·mL-1,模型组家兔恒速静脉滴注20%酒精(0.1g·kg-1·min-1),PDS组家兔静脉滴注酒精前给予PDS 0.025g·kg-1。心室内插管检测各组家兔的血流动力学变化;比色法检测家兔血清中乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)和肌酸激酶同工酶(CKMB)水平,检测心肌组织匀浆中丙二醛(MDA)水平、总超氧化物歧化酶(T-SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和过氧化氢酶(CAT)活性。结果:与对照组比较,模型组家兔左心室内舒张末期压(LVEDP)在开始记录30min时显著降低(P<0.05),血清LDH、CK和CKMB水平升高(P<0.05),心肌组织匀浆中MDA水平升高(P<0.05),T-SOD、GSH-Px和CAT活性下降(P<0.05);与模型组比较,PDS组家兔LVEDP显著升高,血清LDH、CK及CKMB水平下降(P<0.05),心肌组织匀浆中MDA水平下降(P<0.05),T-SOD、GSH-Px及CAT活性升高(P<0.05)。结论:PDS对家兔急性酒精性心力衰竭具有保护作用,其作用机制可能与改善心肌过氧化损伤有关。 展开更多

关键词 人参二醇组皂苷 酒精 心肌损伤 心力衰竭 脂质过氧化作用

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天冬酰胺合成酶对移植黑色素瘤APP/PS1小鼠骨骼肌减少的影响 被引量：2

7

作者 董营 吕航 +8 位作者 郭家女 郑鸿 郭丹 王力可 王丹 陈昌捷 孙连坤 张勇 于春艳 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2021年第4期849-856,共8页

目的:探讨天冬酰胺合成酶(ASNS)在移植黑色素瘤模型淀粉样蛋白前体蛋白/早老素1(APP/PS1)小鼠骨骼肌减少中的作用,并阐明其作用机制。方法:C57BL/6J(C57)小鼠和APP/PS1小鼠分别移植黑色素瘤B16细胞(C57移植瘤组和APP/PS1移植瘤组),同时... 目的:探讨天冬酰胺合成酶(ASNS)在移植黑色素瘤模型淀粉样蛋白前体蛋白/早老素1(APP/PS1)小鼠骨骼肌减少中的作用,并阐明其作用机制。方法:C57BL/6J(C57)小鼠和APP/PS1小鼠分别移植黑色素瘤B16细胞(C57移植瘤组和APP/PS1移植瘤组),同时设C57对照组和APP/PS1对照组,每组7只。取小鼠腓肠肌组织,分析天平称量小鼠腓肠肌质量,计算小鼠腓肠肌质量与体质量比值即肌肉减少症指数(SI),采用HE染色观察小鼠腓肠肌组织形态表现,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测小鼠腓肠肌组织中肌肉组织特异萎缩相关基因E3泛素连接酶1(Atrogin-1)、肌肉环指蛋白1(MuRF1)和ASNS mRNA表达水平,Western blotting法检测小鼠腓肠肌组织中ASNS及内质网应激途径相关蛋白葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、活化转录因子4(ATF4)、真核细胞起始因子2α(eIF2α)和磷酸化eIF2α(p-eIF2α)蛋白表达水平。结果:与C57对照组比较,C57移植瘤组小鼠腓肠肌SI降低(P<0.05),腓肠肌细胞呈玻璃样变性,肌浆蓝染,部分细胞核可见核内移现象,小鼠腓肠肌组织中Atrogin-1、MuRF1和ASNS mRNA表达水平升高(P<0.05),ASNS蛋白表达水平升高(P<0.05),GRP78、ATF4蛋白表达水平和p-eIF2α/eIF2α蛋白表达水平比值明显升高(P<0.05);与APP/PS1对照组比较,APP/PS1移植瘤组小鼠腓肠肌SI降低(P<0.05),腓肠肌部分肌纤维肿胀,部分肌纤维变细,细胞核内移现象多见,肌浆颜色以红色为主,腓肠肌组织中Atrogin-1、MuRF1和ASNS mRNA表达水平升高(P<0.05),ASNS蛋白表达水平升高(P<0.05),GRP78、ATF4蛋白表达水平和p-eIF2α/eIF2α蛋白表达水平比值明显升高(P<0.05);与C57移植瘤组比较,APP/PS1移植瘤组小鼠腓肠肌SI降低(P<0.05),腓肠肌组织中Atrogin-1 mRNA表达水平升高(P<0.05),ASNS mRNA水平降低(P<0.05),ASNS蛋白表达水平差异无统计学意义(P>0.05),GRP78和ATF4蛋白表达水平及p-eIF2α/eIF2α蛋白表达水平比值明显降低(P<0.05)。结论:APP/PS1移植黑色素瘤模型小鼠腓肠肌更易发生肌肉减少,其机制可能与适应性反应ASNS转录水平降低有关,内质网应激PERK-eIF2a-ATF4信号途径可能参与调控ASNS转录活性。 展开更多

关键词 天冬酰胺合成酶 肌肉减少 淀粉样蛋白前体蛋白/早老素1 移植瘤 黑色素瘤B16细胞

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五味子脂A增强卡铂对人卵巢癌Skov3细胞的促凋亡作用及其机制 被引量：7

8

作者 上官梦原 赵菁 +3 位作者 陈俊宇 杨艳荣 张佳悦 赵淑华 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期83-89,共7页

目的:探讨五味子脂A(GA)与卡铂(CBP)联合应用对卵巢癌Skov3细胞凋亡的影响,阐明GA的协同抑瘤作用。方法:采用不同浓度GA和CBP单独及联合对卵巢癌Skov3细胞株进行干预,MTT法检测各组细胞增殖抑制率,根据其结果选择GA和CBP合适浓度。卵巢... 目的:探讨五味子脂A(GA)与卡铂(CBP)联合应用对卵巢癌Skov3细胞凋亡的影响,阐明GA的协同抑瘤作用。方法:采用不同浓度GA和CBP单独及联合对卵巢癌Skov3细胞株进行干预,MTT法检测各组细胞增殖抑制率,根据其结果选择GA和CBP合适浓度。卵巢癌Skov3细胞分为对照组、GA(0.04μmol·L-1)组、CBP(16mg·L-1)组、GA(0.04μmol·L-1)联合CBP(16mg·L-1)组(联合用药组),药物处理48h后,观察各组细胞形态,流式细胞术检测细胞凋亡率,TUNEL染色观察细胞凋亡指数(AI),JC-1染色观察细胞线粒体膜电位变化,RT-PCR和Western blotting法检测凋亡相关基因Bax、ccaspase-3和Stat3mRNA和蛋白表达水平。结果:GA联合CBP作用后细胞增殖抑制率高于GA和CBP单独应用组(P<0.01),且GA及CBP浓度分别为0.04μmol·L-1和16 mg·L-1时量效比最佳(细胞增殖抑制率为52.1%)。与对照组比较,GA组和CBP组细胞折光性减弱,细胞回缩明显,部分脱落呈悬浮状;联合用药组细胞回缩现象更为明显,并见大量脱落细胞。流式细胞术和TUNEL检测,与对照组、GA组和CBP组比较,联合用药组Skov3细胞凋亡率和AI均明显升高(P<0.05或P<0.01)。JC-1染色检测,与GA组和CBP组比较,联合用药组Skov3细胞线粒体膜电位降低。RT-PCR和Western blotting法检测,联合用药组细胞中Bax和caspase-3mRNA和蛋白表达水平高于对照组、GA组和CBP组(P<0.05),Bcl-2mRNA和Stat3mRNA及蛋白表达水平低于对照组、GA组和CBP组(P<0.05)。结论:GA能增强CBP对卵巢癌Skov3细胞的促凋亡作用,其机制可能与上调Bax和caspase-3的基因表达、下调Bcl-2的基因表达有关,可协同CBP诱导细胞凋亡。 展开更多

关键词 五味子脂A 卡铂 卵巢肿瘤 细胞凋亡

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五味子脂A联合卡铂对人卵巢癌Skov3细胞增殖、迁移和侵袭的抑制作用及其机制 被引量：3

9

作者 上官梦原 赵菁 +3 位作者 杨艳荣 张佳悦 陈俊宇 赵淑华 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期292-298,共7页

目的:探讨五味子脂A(GA)与卡铂(CBP)联用对人卵巢癌Skov3细胞增殖、迁移与侵袭的抑制作用及其机制,阐明GA的协同抑瘤作用。方法:采用不同浓度GA与CBP单独或联合对卵巢癌Skov3细胞株进行干预,MTT法检测细胞增殖抑制率,根据其结果选择GA和... 目的:探讨五味子脂A(GA)与卡铂(CBP)联用对人卵巢癌Skov3细胞增殖、迁移与侵袭的抑制作用及其机制,阐明GA的协同抑瘤作用。方法:采用不同浓度GA与CBP单独或联合对卵巢癌Skov3细胞株进行干预,MTT法检测细胞增殖抑制率,根据其结果选择GA和CBP合适浓度。实验分为对照组、GA(0.04μmol·L-1)组、CBP(16mg·L-1)组、GA(0.04μmol·L-1)联合CBP(16 mg·L-1)组(GA+CBP组),药物处理48h后,克隆形成实验检测细胞克隆形成能力,细胞划痕实验检测各组细胞迁移能力,Transwell实验检测各组细胞侵袭能力,RT-PCR法检测各组细胞中基质金属蛋白酶2(MMP-2)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)mRNA表达水平,Western blotting法检测各组细胞中MMP-2、MMP-9、AKT1和pAKT1蛋白表达水平。结果:与GA组和CBP组比较,GA+CBP组细胞增殖抑制率明显升高(P<0.01),且GA和CBP浓度分别为0.04μmol·L-1、16mg·L-1时量效比最佳。克隆形成实验,与对照组比较,CBP组和GA+CBP组Skov3细胞克隆形成率均降低(P<0.05或P<0.01);GA+CBP组Skov3细胞形成率明显低于GA组和CBP组(P<0.01)。细胞划痕实验,与对照组比较,GA组和CBP组Skov3细胞迁移的数量减少;GA+CBP组细胞迁移的数量明显低于GA组和CBP组。Transwell实验,与对照组比较,GA组和CBP组Skov3细胞穿过细胞外基质(ECM)的能力降低;与GA组和CBP组比较,GA+CBP组Skov3细胞穿过ECM的能力降低。RT-PCR法,与GA组和CBP组比较,GA+CBP组Skov3细胞中MMP-2和MMP-9mRNA表达水平明显降低(P<0.01);Western blotting法,与GA组和CBP组比较,GA+CBP组Skov3细胞中MMP-2、MMP-9、AKT1和pAKT1蛋白表达水平明显降低(P<0.01)。结论:GA可增强CBP抑制人卵巢癌Skov3细胞增殖、侵袭和转移的能力,从而发挥化疗的减毒增效作用。 展开更多

关键词 五味子脂A 卡铂 卵巢肿瘤 细胞增殖 侵袭转移

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人工智能在动物实验中应用的研究进展 被引量：4

10

作者 王星 赵静怡 +1 位作者 张钰 沈璐妍 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2022年第11期135-141,共7页

实验动物伦理与3R原则是动物实验过程中必须遵守的基本准则。但由于动物机体的复杂性,动物体内实验所得到的各种数据面临着庞大而没有合适方法充分挖掘,复杂而有很多隐藏信息无法有效分析的问题,导致实验动物使用数量居高不下。在大数... 实验动物伦理与3R原则是动物实验过程中必须遵守的基本准则。但由于动物机体的复杂性,动物体内实验所得到的各种数据面临着庞大而没有合适方法充分挖掘,复杂而有很多隐藏信息无法有效分析的问题,导致实验动物使用数量居高不下。在大数据的背景下,计算机科学与技术飞速进步,人工智能(artificial intelligence, AI)取得了极大飞跃,其在实验动物领域相关数据库的建立与数学模型的构建、动物微观分子及宏观图像、行为、基本生理指标等特征的识别、分类及预测中的应用广泛,有望成为研究人员的得力助手,在医学科研和临床领域发挥至关重要的作用。而相对微观分析,动物特征识别的宏观应用具有更高的可行性与实用性,本文就人工智能技术在实验动物特征识别中的应用、挑战和展望进行综述。 展开更多

关键词 人工智能 实验动物 特征识别

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siRNA沉默eIF4E诱导人喉癌Hep-2细胞凋亡及其机制 被引量：1

11

作者 王贺彬 汪雅芳 +3 位作者 沈妙言 李娜 赵丽晶 滕博 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期39-43,I0001,共6页

目的:观察真核细胞翻译起始因子4E(eIF4E)基因的靶向小干扰RNA(siRNA)对喉癌Hep-2细胞中eIF4E基因表达的影响,探讨其诱导喉癌细胞凋亡的作用机制。方法:采用脂质体LipofectamineTM2000将siRNA-eIF4E转染入人喉癌Hep-2细胞(siRNA-eIF4E... 目的:观察真核细胞翻译起始因子4E(eIF4E)基因的靶向小干扰RNA(siRNA)对喉癌Hep-2细胞中eIF4E基因表达的影响,探讨其诱导喉癌细胞凋亡的作用机制。方法:采用脂质体LipofectamineTM2000将siRNA-eIF4E转染入人喉癌Hep-2细胞(siRNA-eIF4E组),同时设空白对照组和空质粒组。MTT法检测siRNA对Hep-2细胞增殖的抑制作用,罗丹明染色检测转染后细胞内线粒体膜电位的变化,TUNEL染色法检测细胞凋亡,RT-PCR和Western blotting法检测凋亡相关基因转录和蛋白表达水平的变化。结果:与空白对照组及空质粒组比较,siRNA-eIF4E组Hep-2细胞中eIF4E基因转录和表达水平明显下调(P<0.01),Hep-2细胞生存率下降(P<0.05),细胞线粒体膜电位降低(P<0.05),细胞凋亡率增加(P<0.05),凋亡相关基因Bim、Bid及Caspase-3表达上调(P<0.05)。结论:siRNA-eIF4E在体外可抑制人喉癌Hep-2细胞增殖,其机制可能是通过激活线粒体凋亡途径诱导Hep-2细胞凋亡。 展开更多

关键词 小干扰RNA 真核细胞翻译起始因子4E 喉肿瘤 HEP-2细胞 细胞凋亡

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外源性表达VEGF165b对顺铂诱导人膀胱癌T24细胞损伤的影响及其机制 被引量：1

12

作者 尹健 张斯棋 +1 位作者 张钰 李然伟 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期937-940,I0003,共5页

目的:观察人膀胱癌T24细胞中外源性表达血管内皮生长因子(VEGF)变构体VEGF165b对顺铂(DDP)诱导人膀胱癌T24细胞损伤的作用,并探讨相关机制。方法:构建VEGF165b表达载体pcDNAVEGF165b;T24细胞分为对照组、VEGF165b组(转染VEGF165b表达载... 目的:观察人膀胱癌T24细胞中外源性表达血管内皮生长因子(VEGF)变构体VEGF165b对顺铂(DDP)诱导人膀胱癌T24细胞损伤的作用,并探讨相关机制。方法:构建VEGF165b表达载体pcDNAVEGF165b;T24细胞分为对照组、VEGF165b组(转染VEGF165b表达载体)、DDP组和VEGF165b+DDP组(DDP联合转染VEGF165b表达载体)。MTT法检测各组细胞存活率;Western blotting法检测各组T24细胞中凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax和caspase3表达;TUNEL法检测细胞凋亡数。结果:MTT法检测,与对照组比较,VEGF165b组24和48h时T24细胞存活率无明显变化(P>0.05);与DDP组比较,VEGF165b+DDP组24和48h时细胞存活率均明显降低(P<0.05)。Western blotting法检测,与对照组比较,DDP组细胞中cleavedcaspase3/pro-caspase3比值升高(P<0.05),Bcl-2/Bax比值降低(P<0.05);与DDP组比较,VEGF165b+DDP组细胞中cleaved-caspase3/pro-caspase3比值升高(P<0.05),Bcl-2/Bax比值降低(P<0.05)。TUNEL法检测,与对照组(5.1±2.7)和VEGF165b组(7.4±3.2)比较,DDP组的凋亡细胞数(26.3±8.2)的凋亡细胞数增加(P<0.05)。与DDP组比较,VEGF165b+DDP组的凋亡细胞数(41.3±6.9)增加(P<0.05)。结论:外源性表达VEGF165b能通过增加细胞凋亡促进DDP对T24细胞的损伤,其机制与VEGF信号通路受抑制有关联。 展开更多

关键词 膀胱肿瘤 血管内皮生长因子 顺铂

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下丘脑视前区性二态核神经元的投射

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作者 张春晓 滨田知宏 黄民 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期281-284,I0002,共5页

目的:检查大鼠下丘脑视前区性二态核(SDN-POA)的神经投射部位,探讨SDN-POA的功能。方法:实验使用30只Wistar转基因大鼠,这种转基因大鼠的雌激素α受体基因启动子0/B上标记有绿色荧光蛋白。雌、雄性大鼠(各15只)随机各分成3组,分别通过... 目的:检查大鼠下丘脑视前区性二态核(SDN-POA)的神经投射部位,探讨SDN-POA的功能。方法:实验使用30只Wistar转基因大鼠,这种转基因大鼠的雌激素α受体基因启动子0/B上标记有绿色荧光蛋白。雌、雄性大鼠(各15只)随机各分成3组,分别通过离子电渗法将示踪剂Fluoro-Ruby注入下丘脑腹内侧核(VMH)、终纹床核(BST)、杏仁核后背侧核(MePD)。5d后,灌流固定鼠脑,做冷冻冠状切片,荧光显微镜下确定示踪剂注入位置,并观察SDN-POA绿色荧光和Fluoro-Ruby标记荧光。结果:在雌、雄性转基因大鼠,SDN-POA呈现绿色荧光,雄性SDN的体积和细胞数量明显大于雌性,即存在明显的两性差异。示踪剂注入VMN和BST组,在SDN均发现Fluoro-Ruby逆行标记细胞。来自VMH的标记细胞主要位于SDN的边缘;来自BST的标记细胞分散在SDN核团内。示踪剂注入MePD组,在SDN未发现逆行标记的神经元,而发现大量标记Fluoro-Ruby的神经纤维。结论:SDN-POA是决定性二态性的重要中枢部位,它可接受MePD的传入神经纤维,发出传出神经纤维影响VMN和BST神经元的活动,进而调节生殖功能。 展开更多

关键词 视前区性二态核 性差异 逆行示踪研究 Fluoro-Ruby

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血栓形成易感基因芯片的研制及效果评价 被引量：2

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作者 冉楠 马明星 +8 位作者 庞志强 王泽雨 刘月 郑瑞鹏 卢俊英 张超 陈光 章宏 王放 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期182-187,I0007,共7页

目的:探讨血栓形成易感基因芯片的研制方法及初步临床验证,建立一种快速且高通量检测血栓形成易感基因突变的方法。方法:根据GenBank上已发表的血栓形成易感基因序列,将设计好的参照探针和特异性探针点置于醛基化处理的玻片上,经紫外交... 目的:探讨血栓形成易感基因芯片的研制方法及初步临床验证,建立一种快速且高通量检测血栓形成易感基因突变的方法。方法:根据GenBank上已发表的血栓形成易感基因序列,将设计好的参照探针和特异性探针点置于醛基化处理的玻片上,经紫外交联后固定,制成血栓形成易感基因芯片。以阳性参考品(各检测位点突变型和正常型基因)和阴性参考品(双蒸水)为模板,经PCR反应后与芯片进行杂交,对基因芯片的有效性进行检测。以靶序列经过测序验证的人类基因组DNA为模板,经PCR反应后芯片进行杂交,检测基因芯片的特异度和灵敏度,并对来自吉林、河南和云南3个地区的健康受试者150人和有不明原因血栓性疾病家族史的血栓患者24例进行临床验证。分析指标为检测相应位点的杂交信号强度。结果:以阳性参考品和阴性参考品为模板进行杂交,相应位点出现特异性的杂交信号,说明基因芯片检测位点有效。用于检测选定突变位点的基因芯片均有特异性的杂交信号,说明基因芯片的特异性良好。标准基因组DNA逐级稀释后检测基因芯片的灵敏度为50~100mg·L-1。临床验证结果,在健康受试者150人中8人检出血栓形成易感基因突变,在有不明原因血栓性疾病家族史的血栓患者24例中20例检出血栓形成易感基因突变,该芯片对不明原因血栓性疾病家族史的血栓患者血栓形成易感基因突变检出率明显高于健康受试者(P<0.05)。结论:研制的血栓形成易感基因芯片具有良好的特异度和灵敏度,对血栓形成易感基因有较高的检出率,在血栓性疾病的早期诊断和易感风险评估中具有潜在价值。 展开更多

关键词 血栓形成易感基因 基因芯片 聚合酶链式反应 血栓性疾病

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SF2523对人源脑胶质瘤干细胞TS576增殖的抑制作用及其机制 被引量：2

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作者 杨智源 闻乃妍 +6 位作者 林杨 梁航 王乾 胡馨丹 张灵 任辉 郭宝锋 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期1281-1287,共7页

目的:探讨PI3K和BRD4双重抑制剂SF2523对人源脑胶质瘤干细胞TS576增殖的抑制作用,并初步阐明其作用机制。方法:培养人源脑胶质瘤干细胞TS576,将其分为对照组和0.25、0.50、1.00、2.00μmol·L^-1 SF2523组。采用CCK-8法检测各组TS57... 目的:探讨PI3K和BRD4双重抑制剂SF2523对人源脑胶质瘤干细胞TS576增殖的抑制作用,并初步阐明其作用机制。方法:培养人源脑胶质瘤干细胞TS576,将其分为对照组和0.25、0.50、1.00、2.00μmol·L^-1 SF2523组。采用CCK-8法检测各组TS576细胞存活率;将TS576细胞分为对照组和2μmol·L^-1 SF2523组,利用细胞生长计数法检测各组TS576细胞数;将TS576细胞分为对照组和1及2μmol·L^-1 SF2523组,采用流式细胞术检测各组不同细胞周期TS576细胞百分比;将TS576细胞分为对照组和1及2μmol·L^-1 SF2523组,利用AnnexinⅤ/PI染色法检测各组TS576细胞凋亡率;将TS576细胞分为对照组和1及2μmol·L^-1 SF2523组,采用Western blotting法检测各组TS576细胞中B淋巴细胞瘤2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)和cyclinD1蛋白表达水平。结果:CCK-8检测,作用24、48和72 h时,与对照组比较,0.25、0.50、1.00和2.00μmol·L^-1 SF2523组TS576细胞存活率均明显降低(P<0.01)。细胞生长计数法检测,与对照组比较,2μmol·L^-1 SF2523组细胞数明显减少(P<0.05或P<0.01)。流式细胞术检测,作用72 h时,与对照组比较,1和2μmol·L^-1 SF2523组G 1期TS576细胞百分比升高(P<0.05),S期TS576细胞百分比降低(P<0.05)。AnnexinⅤ/PI染色检测,作用72 h时,与对照组比较,1和2μmol·L^-1 SF2523组细胞凋亡率均明显升高(P<0.01)。Western blotting法检测,作用72 h时,与对照组比较,1和2μmol·L^-1 SF2523组TS576细胞中Bax蛋白表达水平升高(P<0.01),Bcl-2和cyclinD1蛋白表达水平降低(P<0.05或P<0.01),Bax/Bcl-2比值升高(P<0.01)。结论:SF2523通过下调cyclinD1表达引起TS576细胞G 1期阻滞,通过上调Bax表达、下调Bcl-2表达促进TS576细胞凋亡,从而抑制TS576细胞增殖。 展开更多

关键词 SF2523 脑胶质瘤干细胞 细胞增殖 细胞周期 细胞凋亡

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激活素A通过下丘脑室旁核调节动脉压的作用及其机制 被引量：2

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作者 范钰奇 王明华 +2 位作者 谢东雪 崔雪玲 葛敬岩 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期699-703,I0002,共6页

目的:探讨激活素A在WKY大鼠下丘脑室旁核(PVN)中的表达及其对动脉压的影响,阐明激活素A通过PVN调节动脉压的作用机制。方法:选用WKY大鼠,采用RT-PCR法检测激活素A、激活素Ⅱ型受体(ActRⅡA和ActRⅡB)和信号传导蛋白Smads mRNA在PVN中的... 目的:探讨激活素A在WKY大鼠下丘脑室旁核(PVN)中的表达及其对动脉压的影响,阐明激活素A通过PVN调节动脉压的作用机制。方法:选用WKY大鼠,采用RT-PCR法检测激活素A、激活素Ⅱ型受体(ActRⅡA和ActRⅡB)和信号传导蛋白Smads mRNA在PVN中的表达情况,免疫组织化学染色检测ActRⅡA蛋白在PVN中的表达情况。PVN核团微量注射外源性激活素A,观察给药前后大鼠动脉压的变化。原代培养WKY大鼠PVN神经元,分为对照组和激活素A处理组,RT-PCR法检测PVN神经元中ActRⅡA、ActRⅡB和Smads mRNA表达水平。结果:WKY大鼠PVN中存在激活素A及其受体、Smad2和Smad3mRNA表达,免疫组织化学染色检测,PVN神经元表达ActRⅡA蛋白。PVN微量注射血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)或激活素A后,与给药前比较,大鼠平均动脉压明显升高(P<0.05)。与对照组比较,激活素A处理组大鼠体外原代培养PVN神经元中ActRⅡA和Smad3mRNA表达水平明显升高(P<0.05)。结论:激活素A以自分泌/旁分泌形式通过PVN调控动脉压,其作用与ActRⅡA-Smad3信号传导途径有关。 展开更多

关键词 动脉血压 下丘脑室旁核 激活素A SMAD蛋白

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二乙基亚硝胺联合四氯化碳诱发C57BL/6小鼠肝癌模型 被引量：3

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作者 仲鑫汝 许龙 +2 位作者 田睿 苏静 张勇 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2020年第1期12-16,共5页

目的通过建立C57BL/6小鼠化学诱发性肝癌模型模拟肝癌发生发展进程探索肝癌发生机制。方法选取110只C57BL/6小鼠,随机分为对照组(30只)和模型组(80只),对照组小鼠无处理,模型组通过灌胃给药CCl4联合腹腔注射DEN的方法建立肝癌模型;持续... 目的通过建立C57BL/6小鼠化学诱发性肝癌模型模拟肝癌发生发展进程探索肝癌发生机制。方法选取110只C57BL/6小鼠,随机分为对照组(30只)和模型组(80只),对照组小鼠无处理,模型组通过灌胃给药CCl4联合腹腔注射DEN的方法建立肝癌模型;持续测量小鼠体重,不同时间节点解剖小鼠观察肝形态、测定静脉血血清中肝功能相关酶的水平、观察肝组织病理学变化。结果与对照组相比,模型组小鼠体重逐渐降低,肝形态失常,血清中肝功能相关酶ALT、AST升高,有明显的肝癌组织病理学改变。结论二乙基亚硝胺(DEN)联合四氯化碳(CCl4)可诱发C57BL/6小鼠肝癌,为研究肝癌发生发展的分子机制提供可靠的动物模型。 展开更多

关键词 化学诱导性肝癌模型 二乙基亚硝胺(DEN) 四氯化碳(CCl4) C57BL/6小鼠

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高盐饮食对尿素通道蛋白B基因缺失小鼠动脉血压的影响及其机制 被引量：2

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作者 王松 郭瀛泽 +6 位作者 李天舒 宋金萍 刘科苑 周伟 赵丽晶 姜铁超 郭丽荣 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期1052-1057,I0004,共7页

目的:探讨高盐饮食对尿素通道蛋白B基因(UT-B)缺失(UT-B^-/-)小鼠动脉血压的影响,阐明UT-B^-/-导致小鼠动脉血压改变的可能机制。方法:杂合子小鼠交配获得遗传背景相同野生型(UT-B^+/+)小鼠和UT-B^-/-小鼠;选取4周龄雄性UT-B^+/+小鼠和U... 目的:探讨高盐饮食对尿素通道蛋白B基因(UT-B)缺失(UT-B^-/-)小鼠动脉血压的影响,阐明UT-B^-/-导致小鼠动脉血压改变的可能机制。方法:杂合子小鼠交配获得遗传背景相同野生型(UT-B^+/+)小鼠和UT-B^-/-小鼠;选取4周龄雄性UT-B^+/+小鼠和UT-B^-/-小鼠,分别给予4周普通饮食(0.3%NaCl)或高盐饮食(8.0%NaCl),分为UT-B^+/+小鼠+普通饮食组(UT-B^+/++N)、UT-B^-/-小鼠+普通饮食组(UT-B^-/-+N)、UT-B^+/+小鼠+高盐饮食组(UT-B^+/++H)和UT-B^-/-小鼠+高盐饮食组(UT-B^-/-+H),共4组。监测各组小鼠饮水量和平均动脉压的变化,采用RT-PCR法、Westernblotting法和免疫组织化学法检测脑组织脉络丛(CP)UT-BmRNA和蛋白表达水平和定位,ELISA法检测各组小鼠血清血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)水平和脑脊液中钠离子水平。结果:PCR法检测鼠尾基因组DNA,UT-B^+/+小鼠在400bp处有1条碱基片段,杂合子小鼠在250和400bp处各有1条碱基片段,UT-B^-/-小鼠在250bp处有1条碱基片段。与普通饮食组比较,高盐饮食组小鼠饮水量明显增加(P<0.01);与UT-B^-/-小鼠+普通饮食组和UT-B^+/+小鼠+高盐饮食组比较,UT-B^-/-小鼠+高盐饮食组小鼠平均动脉压明显升高(P<0.01);UT-BmRNA和蛋白表达于UT-B^+/+小鼠脑组织CP上皮细胞。与UT-B^-/-小鼠+普通饮食组和UT-B^+/+小鼠+高盐饮食组比较,UT-B^-/-小鼠+高盐饮食组小鼠血清AngⅡ水平明显升高(P<0.01),脑脊液中钠离子水平明显升高(P<0.05)。结论:高盐 饮食可导致UT-B^-/-小鼠平均动脉压明显升高,其机制与升高小鼠血清AngⅡ和脑脊液钠离子水平有关。 展开更多

关键词 高盐饮食 尿素通道蛋白B 平均动脉压 脑脊液 钠离子

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脂肪间充质干细胞对卵巢早衰模型大鼠的治疗作用及其机制 被引量：1

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作者 颜培玉 张爱臣 +4 位作者 章宏 李杨 张萌萌 洛梦泽 潘颖 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2022年第3期648-656,共9页

目的:探讨脂肪间充质干细胞(ADMSCs)的生物学特性,阐明ADMSCs对卵巢早衰(POF)模型大鼠的治疗作用及其机制。方法:分离培养SD大鼠的ADMSCs,光学显微镜观察细胞形态表现,成骨和成脂细胞诱导试剂诱导ADMSCs成骨及成脂分化,流式细胞术检测AD... 目的:探讨脂肪间充质干细胞(ADMSCs)的生物学特性,阐明ADMSCs对卵巢早衰(POF)模型大鼠的治疗作用及其机制。方法:分离培养SD大鼠的ADMSCs,光学显微镜观察细胞形态表现,成骨和成脂细胞诱导试剂诱导ADMSCs成骨及成脂分化,流式细胞术检测ADMSCs表面抗原标记物CD44、CD90和CD45的表达。CCK-8法检测ADMSCs的生长状态并绘制生长曲线。通过腹腔注射顺铂建立大鼠POF模型。30只SD大鼠分为正常对照组(10只)和造模组(20只),造模组大鼠再随机分为模型组和ADMSCs治疗组,每组10只。ADMSCs治疗组大鼠每3 d经尾静脉注射异体ADMSCs;正常对照组和模型组大鼠每3 d经尾静脉注射生理盐水。记录各组大鼠体质量,ELISA法检测各组大鼠血清雌二醇(E_(2))、卵泡刺激素(FSH)和黄体生成素(LH)水平,HE染色观察各组大鼠卵巢组织病理形态表现。结果:ADMSCs为贴壁生长细胞,生长旺盛,可向成骨和成脂分化,ADMSCs高表达CD44和CD90,表达率分别为75.85%及59.71%;低表达CD45,表达率为39.12%。与正常对照组比较,造模组大鼠体质量明显降低(P<0.05),血清E_(2)水平明显降低(P<0.05),FSH和LH水平明显升高(P<0.05),缺乏各级卵泡,闭锁卵泡数目增多。与模型组比较,ADMSCs治疗组大鼠血清E_(2)水平升高(P<0.05),FSH和LH水平降低(P<0.05),各级卵泡数目增多,闭锁卵泡数目减少。结论:ADMSCs能够在体外生长繁殖,并具有较强生长增殖能力和多向分化能力;ADMSCs能够改善POF模型大鼠血清E_(2)水平及卵巢功能,对POF模型大鼠具有一定的治疗作用。 展开更多

关键词 脂肪间充质干细胞 细胞分化 细胞增殖 卵巢早衰 卵巢功能

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线粒体动力学改变对APP/PS1小鼠移植黑色素瘤生长的抑制作用 被引量：1

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作者 林久涵 田琳 +8 位作者 张娜娜 董营 吕航 王丹 曲萌 张勇 孙连坤 于春艳 刘希 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期476-481,共6页

目的:探讨线粒体动力学的变化对APP/PS1转基因小鼠移植黑色素瘤生长的抑制作用及其机制。方法:将C57BL/6J(C57)和APP/PS1雄性小鼠分为C57移植瘤组(n=7)和APP/PS1移植瘤组(n=7)。观察2组小鼠肿瘤出现时间并计算肿瘤体积,绘制移植瘤生长... 目的:探讨线粒体动力学的变化对APP/PS1转基因小鼠移植黑色素瘤生长的抑制作用及其机制。方法:将C57BL/6J(C57)和APP/PS1雄性小鼠分为C57移植瘤组(n=7)和APP/PS1移植瘤组(n=7)。观察2组小鼠肿瘤出现时间并计算肿瘤体积,绘制移植瘤生长曲线。光学显微镜观察2组小鼠肿瘤组织形态表现,Western blotting法检测2组小鼠肿瘤组织中线粒体融合蛋白2(Mfn2)、动力相关蛋白1(Drp1)、线粒体分裂蛋白1(Fis1)、泛素化及多泛素化蛋白、LC3、PINK1及Parkin蛋白表达水平。结果:C57移植瘤组和APP/PS1移植瘤组小鼠皮肤下均见肿瘤组织,肿瘤细胞内呈现黑色素颗粒。与C57移植瘤组比较,APP/PS1移植瘤组小鼠出瘤时间晚,肿瘤组织体积小(P<0.05)。小鼠肿瘤组织中Mfn2表达水平降低(P<0.05),Fis1和Drp1表达水平升高(P<0.05),泛素化及多聚泛素化蛋白、LC3-Ⅱ、PINK1和Parkin蛋白表达水平升高(P<0.05)。结论:APP/PS1小鼠移植瘤模型肿瘤生长缓慢,其机制可能与PINK1/Parkin通路参与线粒体自噬有关。 展开更多

关键词 APP/PS1小鼠 移植黑色素瘤 线粒体动力学 线粒体分裂融合 线粒体自噬

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