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人层粘连蛋白α4链LG3-4组件的克隆和表达
被引量：
2
1
作者
戴旭芳
连继勤
+1 位作者
张玉静
胡仲明
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第11期1109-1112,共4页
目的 利用基因工程技术获得重组人层粘连蛋白α4链LG3 4组件(humanlamininAlpha4LG3 4Module ,hLNα4LG3 4)蛋白并检测其抗原性。方法 采用RT PCR方法从人胎盘组织扩增hLNα4LG3 4的cDNA片段,T A克隆法将其插入pMD 18T载体进行测...
目的 利用基因工程技术获得重组人层粘连蛋白α4链LG3 4组件(humanlamininAlpha4LG3 4Module ,hLNα4LG3 4)蛋白并检测其抗原性。方法 采用RT PCR方法从人胎盘组织扩增hLNα4LG3 4的cDNA片段,T A克隆法将其插入pMD 18T载体进行测序。亚克隆法构建原核表达载体pET 2 8a LG3 4,在BL2 1(DE3 )中表达hLNα4LG3 4融合蛋白。融合蛋白经SDS PAGE鉴定、Ni NTA亲和层析纯化及Western印迹分析。结果 成功获得hLNα4LG3 4cDNA片段,与Gen Bank中序列同源性为98% ,突变碱基不改变蛋白的氨基酸序列。12 %SDS PAGE电泳检测显示:经IPTG诱导后BL2 1(DE3 ) /pET2 8a LG3 4细菌裂解液总蛋白中出现一条分子量为44×10 3的新蛋白带,纯化后目的蛋白纯度达95 %以上,且Western印迹可特异地检测到目的蛋白所对应转移带。结论 成功表达和纯化了hLNα4LG3 4蛋白,从而为研究LG组件在疾病发生过程中的作用及其功能位点打下了基础。
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关键词
hLNα4LG3-4
克隆
表达
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题名
人层粘连蛋白α4链LG3-4组件的克隆和表达
被引量：
2
1
作者
戴旭芳
连继勤
张玉静
胡仲明
机构
重庆师范
大学
特殊教育学院
第三军医
大学
基础医学部
生物
化学
与分子生物学
教研室
吉林大学和平校区生物化学与分子生物学教研室
出处
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第11期1109-1112,共4页
基金
国家自然科学基金资助项目 ( 30 4 0 0 559)~~
文摘
目的 利用基因工程技术获得重组人层粘连蛋白α4链LG3 4组件(humanlamininAlpha4LG3 4Module ,hLNα4LG3 4)蛋白并检测其抗原性。方法 采用RT PCR方法从人胎盘组织扩增hLNα4LG3 4的cDNA片段,T A克隆法将其插入pMD 18T载体进行测序。亚克隆法构建原核表达载体pET 2 8a LG3 4,在BL2 1(DE3 )中表达hLNα4LG3 4融合蛋白。融合蛋白经SDS PAGE鉴定、Ni NTA亲和层析纯化及Western印迹分析。结果 成功获得hLNα4LG3 4cDNA片段,与Gen Bank中序列同源性为98% ,突变碱基不改变蛋白的氨基酸序列。12 %SDS PAGE电泳检测显示:经IPTG诱导后BL2 1(DE3 ) /pET2 8a LG3 4细菌裂解液总蛋白中出现一条分子量为44×10 3的新蛋白带,纯化后目的蛋白纯度达95 %以上,且Western印迹可特异地检测到目的蛋白所对应转移带。结论 成功表达和纯化了hLNα4LG3 4蛋白,从而为研究LG组件在疾病发生过程中的作用及其功能位点打下了基础。
关键词
hLNα4LG3-4
克隆
表达
Keywords
hLNα4LG3-4
cloning
expression
分类号
Q513.2 [生物学—生物化学]
Q785 [生物学—分子生物学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
人层粘连蛋白α4链LG3-4组件的克隆和表达
戴旭芳
连继勤
张玉静
胡仲明
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2005
2
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