【目的】试验前期组学数据提示甲型流感病毒(Influenza A Virus,IAV)感染A549细胞后宿主的环状RNA(circular RNA,circRNA)hsa_circ_004389表达显著上调。为进一步明确hsa_circ_004389表达和IAV感染间的关联,研究其对IAV复制的影响。【...【目的】试验前期组学数据提示甲型流感病毒(Influenza A Virus,IAV)感染A549细胞后宿主的环状RNA(circular RNA,circRNA)hsa_circ_004389表达显著上调。为进一步明确hsa_circ_004389表达和IAV感染间的关联,研究其对IAV复制的影响。【方法】(1)采用荧光定量PCR等方法,确定在IAV病毒感染后不同时间点和不同感染复数(Multiplicity of Infection,MOI)条件下hsa_circ_004389的表达水平;(2)检测聚肌苷酸胞苷酸(Polyinosinic acid:polycytidilic acid,poly I∶C)和细菌脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)处理后hsa_circ_004389的表达情况;(3)干扰素(Interferon,IFN)β和JAK的抑制剂处理细胞后检测hsa_circ_004389的表达情况;hsa_circ_004389过表达和敲低后,在mRNA和蛋白水平上检测该环状RNA对IAV复制的影响。【结果】宿主细胞内hsa_circ_004389表达的增加与IAV感染相关,且与病毒复制呈明显正相关,而JAK-STAT信号通路参与hsa_circ_004389的表达调控,并且hsa_circ_004389能够抑制IAV复制。【结论】hsa_circ_004389是宿主应答IAV感染的产物,为潜在的细胞Ⅰ型IFN应答IAV的拮抗因子。展开更多
文摘【目的】试验前期组学数据提示甲型流感病毒(Influenza A Virus,IAV)感染A549细胞后宿主的环状RNA(circular RNA,circRNA)hsa_circ_004389表达显著上调。为进一步明确hsa_circ_004389表达和IAV感染间的关联,研究其对IAV复制的影响。【方法】(1)采用荧光定量PCR等方法,确定在IAV病毒感染后不同时间点和不同感染复数(Multiplicity of Infection,MOI)条件下hsa_circ_004389的表达水平;(2)检测聚肌苷酸胞苷酸(Polyinosinic acid:polycytidilic acid,poly I∶C)和细菌脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)处理后hsa_circ_004389的表达情况;(3)干扰素(Interferon,IFN)β和JAK的抑制剂处理细胞后检测hsa_circ_004389的表达情况;hsa_circ_004389过表达和敲低后,在mRNA和蛋白水平上检测该环状RNA对IAV复制的影响。【结果】宿主细胞内hsa_circ_004389表达的增加与IAV感染相关,且与病毒复制呈明显正相关,而JAK-STAT信号通路参与hsa_circ_004389的表达调控,并且hsa_circ_004389能够抑制IAV复制。【结论】hsa_circ_004389是宿主应答IAV感染的产物,为潜在的细胞Ⅰ型IFN应答IAV的拮抗因子。
