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GEM-PA表面展示系统研究进展 被引量:1
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作者 吕瑞卿 焦翠翠 +2 位作者 张梦瑶 王化磊 张海丽 《广东畜牧兽医科技》 2023年第1期51-56,共6页
GEM-PA表面展示系统是由革兰氏阳性细菌增强基质(Gram positive Enhancer Matrix,GEM)与锚定蛋白(Protein Anchor,PA)组成,以GEM颗粒为展示核心,外源蛋白通过与PA锚定蛋白的融合表达实现其在GEM颗粒表面的展示。由于GEM颗粒生物安全性... GEM-PA表面展示系统是由革兰氏阳性细菌增强基质(Gram positive Enhancer Matrix,GEM)与锚定蛋白(Protein Anchor,PA)组成,以GEM颗粒为展示核心,外源蛋白通过与PA锚定蛋白的融合表达实现其在GEM颗粒表面的展示。由于GEM颗粒生物安全性高、结合外源蛋白能力强、有自体佐剂效应等优点,以其为基础的GEM-PA表面展示系统近年来发展迅速,成为表面展示系统新的研究热点之一。目前,该系统已应用于固定化酶、蛋白及病毒纯化、新型疫苗的研制等多个领域。该文将对该系统的组成及应用研究进展进行综述。 展开更多
关键词 GEM-PA表面展示系统 细菌样颗粒 研究进展
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玉米中伏马毒素B1、B2间接竞争酶联免疫吸附方法的建立 被引量:6
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作者 于瑶 李岩松 +5 位作者 卢士英 杨勇 胡盼 任洪林 柳增善 周玉 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2020年第23期193-197,共5页
基于伏马毒素B1(fumonisin B1,FB1)单克隆抗体建立了间接竞争酶联免疫吸附法(indirect competitive enzyme linked immunosorbent assay,ic-ELISA),用于玉米中伏马毒素的初步筛查。该方法优化了抗原包被浓度和单抗体稀释倍数、抗原包被... 基于伏马毒素B1(fumonisin B1,FB1)单克隆抗体建立了间接竞争酶联免疫吸附法(indirect competitive enzyme linked immunosorbent assay,ic-ELISA),用于玉米中伏马毒素的初步筛查。该方法优化了抗原包被浓度和单抗体稀释倍数、抗原包被条件、酶标二抗稀释倍数、底物作用时间。结果显示,线性检测范围为1.41~54.2ng/m L,最低检测限为24.5μg/kg,实测玉米样品加标回收率为89.36%~108.54%。交叉反应结果显示,与伏马毒素B2(fumonisin B2,FB2)交叉反应率为129.88%,与其他真菌毒素交叉反应均小于10%,该ic-ELISA方法可对玉米样品中的FB1与FB2总量进行初筛。 展开更多
关键词 玉米 伏马毒素B1 伏马毒素B2 间接竞争酶联免疫吸附法(ic-ELISA)
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利用CRISPR/Cas9系统构建Prdx6基因敲除的RAW264.7细胞系 被引量:4
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作者 翟菲菲 全芷仪 +12 位作者 王路鹿 张士军 鞠丹迪 水一鸣 常江 常恒祯 胡盼 李岩松 卢士英 周玉 柳增善 李兆辉 任洪林 《动物医学进展》 北大核心 2019年第4期36-40,共5页
利用CRISPR/Cas9系统构建敲除Prdx6基因的RAW264.7小鼠巨噬细胞系,为探讨Prdx6与布鲁菌感染及胞内寄生的关系构建细胞模型。针对Prdx6基因的第1外显子设计sgRNA,构建重组表达载体Prdx6-pX459-sgRNA,将重组质粒转染RAW264.7细胞,嘌呤霉... 利用CRISPR/Cas9系统构建敲除Prdx6基因的RAW264.7小鼠巨噬细胞系,为探讨Prdx6与布鲁菌感染及胞内寄生的关系构建细胞模型。针对Prdx6基因的第1外显子设计sgRNA,构建重组表达载体Prdx6-pX459-sgRNA,将重组质粒转染RAW264.7细胞,嘌呤霉素初步筛选。单细胞接种并扩繁,提取基因组DNA,PCR及测序鉴定。结果表明,在敲除细胞株基因组中存在碱基缺失,导致移码突变。说明成功获得敲除Prdx6基因的RAW264.7细胞系。 展开更多
关键词 CRISPR/Cas9 RAW264.7 Prdx6 移码突变 布鲁菌
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我国部分地区猪繁殖与呼吸综合征病毒遗传变异分析 被引量:2
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作者 梁俊超 刘晓东 +6 位作者 袁飞 李坤 刘红祥 马振乾 胡继明 刘东 于录 《家畜生态学报》 北大核心 2021年第9期62-67,共6页
为了解近年我国猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)的分子遗传变异情况,对2019年来自8省的46株PRRSV测序并进行ORF5基因分析比较。结果表明,送检测序的46株PRRSV均属于北美型,同源性... 为了解近年我国猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)的分子遗传变异情况,对2019年来自8省的46株PRRSV测序并进行ORF5基因分析比较。结果表明,送检测序的46株PRRSV均属于北美型,同源性对比结果显示,与欧洲毒株LV的同源性为61.4%~64.0%,与谱系1代表毒株NADC30和MN184B的同源性为82.9%~95.0%,与谱系3代表毒株GM2同源性为82.1%~92.4%,与谱系5代表毒株VR2332和MLV同源性为83.6%~89.6%,与谱系8经典毒株CH-1a的同源性为83.1%~95.2%,与谱系8过渡毒株BJ0706的同源性为81.6%~97.5%,与谱系8高致病性蓝耳毒株JXA1、HuN4、TJ的同源性为81.4%~99.7%;氨基酸分析结果表明,46株PRRSV主要以点突变为主,未见插入突变,与不同谱系代表毒株相比,在中和表达位点及N-糖基化位点均存在一定变异。由此可知,PRRSV野毒仍在不断的发生变异。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 GP5 中和位点 N-糖基化位点
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环状RNA hsa_circ_004389对甲型流感病毒复制的影响 被引量:1
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作者 张舒 于小航 +3 位作者 张乐 苏宁 赵丽丽 段铭 《广东农业科学》 CAS 2022年第2期135-142,共8页
【目的】试验前期组学数据提示甲型流感病毒(Influenza A Virus,IAV)感染A549细胞后宿主的环状RNA(circular RNA,circRNA)hsa_circ_004389表达显著上调。为进一步明确hsa_circ_004389表达和IAV感染间的关联,研究其对IAV复制的影响。【... 【目的】试验前期组学数据提示甲型流感病毒(Influenza A Virus,IAV)感染A549细胞后宿主的环状RNA(circular RNA,circRNA)hsa_circ_004389表达显著上调。为进一步明确hsa_circ_004389表达和IAV感染间的关联,研究其对IAV复制的影响。【方法】(1)采用荧光定量PCR等方法,确定在IAV病毒感染后不同时间点和不同感染复数(Multiplicity of Infection,MOI)条件下hsa_circ_004389的表达水平;(2)检测聚肌苷酸胞苷酸(Polyinosinic acid:polycytidilic acid,poly I∶C)和细菌脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)处理后hsa_circ_004389的表达情况;(3)干扰素(Interferon,IFN)β和JAK的抑制剂处理细胞后检测hsa_circ_004389的表达情况;hsa_circ_004389过表达和敲低后,在mRNA和蛋白水平上检测该环状RNA对IAV复制的影响。【结果】宿主细胞内hsa_circ_004389表达的增加与IAV感染相关,且与病毒复制呈明显正相关,而JAK-STAT信号通路参与hsa_circ_004389的表达调控,并且hsa_circ_004389能够抑制IAV复制。【结论】hsa_circ_004389是宿主应答IAV感染的产物,为潜在的细胞Ⅰ型IFN应答IAV的拮抗因子。 展开更多
关键词 环状RNA hsa_circ_004389 甲型流感病毒 宿主 表达调控
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