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6种常见呼吸道感染细菌16s rRNA基因的克隆与鉴定
被引量：
5
1
作者
干咏华
李爱红
+2 位作者
安东善
刘丹薇
欧阳红生
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第7期641-643,647,共4页
目的:克隆并鉴定6种常见呼吸道感染细菌16s rRNA基因,为制备基因芯片探针做准备。方法:设计、合成6种细菌16s rRNA基因扩增引物;PCR扩增16s rRNA基因目的片段;克隆16s rRNA基因片段;最后对重组质粒进行鉴定。结果:(1)6种细菌16s rRNA基...
目的:克隆并鉴定6种常见呼吸道感染细菌16s rRNA基因,为制备基因芯片探针做准备。方法:设计、合成6种细菌16s rRNA基因扩增引物;PCR扩增16s rRNA基因目的片段;克隆16s rRNA基因片段;最后对重组质粒进行鉴定。结果:(1)6种细菌16s rRNA基因片段的PCR扩增结果:大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌、肺炎克雷伯杆菌、流感嗜血杆菌在1300bp处出现特异的目的片段;铜绿假单胞菌在1100bp出现特异的目的片段,与预计的片段大小吻合。(2)PCR产物分别与pMD18-T载体连接并转化JM109受体菌之后在Ampr培养基表面生长,其中蓝色菌落为阴性克隆,白色菌落是阳性克隆。(3)各克隆质粒PCR鉴定及双酶切鉴定,结果均可见特异目的带。(4)克隆质粒的序列分析示:6种细菌克隆质粒部分16s rRNA基因序列与GenBank中发表序列同源性为99.8%以上,说明细菌16s rRNA基因已克隆成功。结论:成功克隆了大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌、肺炎克雷伯杆菌、流感嗜血杆菌及铜绿假单胞菌16s rRNA基因片段,为制备基因芯片探针奠定了基础。
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关键词
呼吸道感染细菌
16s
RRNA基因
克隆
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职称材料
Survivin基因和EphB4基因在金黄地鼠颊囊癌变过程中的mRNA表达及意义
2
作者
卢恕来
高文信
+2 位作者
王云龙
车彦海
欧阳红生
《口腔医学研究》
CAS
CSCD
2005年第4期409-411,共3页
目的:探讨survivin基因和EphB4基因表达在金黄地鼠颊囊癌变过程中的作用。方法:采用DMBA诱导金黄地鼠颊囊动态癌变的动物模型,应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测survivin和EphB4在各组组织中的表达。结果:Survivin mRNA在正常组...
目的:探讨survivin基因和EphB4基因表达在金黄地鼠颊囊癌变过程中的作用。方法:采用DMBA诱导金黄地鼠颊囊动态癌变的动物模型,应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测survivin和EphB4在各组组织中的表达。结果:Survivin mRNA在正常组、上皮单纯增生组、上皮异常增生组和鳞癌组的阳性表达率依次增加,除正常组与上皮单纯增生组无显著性差异外(P>0.05),其余任两组均有显著性差异(P<0.05)。EphB4 mRNA在以上任两组中的阳性表达率无显著性差异(P>0.05)。结论:在转录水平,survivin的表达与口腔黏膜从正常到癌变的发生发展过程有关,而EphB4则与之无关。
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关键词
口腔癌变
Survivin
EPHB4
细胞凋亡
血管发育
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职称材料
题名
6种常见呼吸道感染细菌16s rRNA基因的克隆与鉴定
被引量：
5
1
作者
干咏华
李爱红
安东善
刘丹薇
欧阳红生
机构
吉林
省人民医院呼吸内科
吉化集团公司总医院
吉林大学农学部生化教研室
出处
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第7期641-643,647,共4页
基金
吉林省科学技术厅资助项目(20010424)
文摘
目的:克隆并鉴定6种常见呼吸道感染细菌16s rRNA基因,为制备基因芯片探针做准备。方法:设计、合成6种细菌16s rRNA基因扩增引物;PCR扩增16s rRNA基因目的片段;克隆16s rRNA基因片段;最后对重组质粒进行鉴定。结果:(1)6种细菌16s rRNA基因片段的PCR扩增结果:大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌、肺炎克雷伯杆菌、流感嗜血杆菌在1300bp处出现特异的目的片段;铜绿假单胞菌在1100bp出现特异的目的片段,与预计的片段大小吻合。(2)PCR产物分别与pMD18-T载体连接并转化JM109受体菌之后在Ampr培养基表面生长,其中蓝色菌落为阴性克隆,白色菌落是阳性克隆。(3)各克隆质粒PCR鉴定及双酶切鉴定,结果均可见特异目的带。(4)克隆质粒的序列分析示:6种细菌克隆质粒部分16s rRNA基因序列与GenBank中发表序列同源性为99.8%以上,说明细菌16s rRNA基因已克隆成功。结论:成功克隆了大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌、肺炎克雷伯杆菌、流感嗜血杆菌及铜绿假单胞菌16s rRNA基因片段,为制备基因芯片探针奠定了基础。
关键词
呼吸道感染细菌
16s
RRNA基因
克隆
Keywords
Bacteria infecting respiratory
16s rRNA gene
Clone
分类号
Q789 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
Survivin基因和EphB4基因在金黄地鼠颊囊癌变过程中的mRNA表达及意义
2
作者
卢恕来
高文信
王云龙
车彦海
欧阳红生
机构
吉林大学
口腔医院口腔黏膜科
吉林大学农学部生化教研室
出处
《口腔医学研究》
CAS
CSCD
2005年第4期409-411,共3页
文摘
目的:探讨survivin基因和EphB4基因表达在金黄地鼠颊囊癌变过程中的作用。方法:采用DMBA诱导金黄地鼠颊囊动态癌变的动物模型,应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测survivin和EphB4在各组组织中的表达。结果:Survivin mRNA在正常组、上皮单纯增生组、上皮异常增生组和鳞癌组的阳性表达率依次增加,除正常组与上皮单纯增生组无显著性差异外(P>0.05),其余任两组均有显著性差异(P<0.05)。EphB4 mRNA在以上任两组中的阳性表达率无显著性差异(P>0.05)。结论:在转录水平,survivin的表达与口腔黏膜从正常到癌变的发生发展过程有关,而EphB4则与之无关。
关键词
口腔癌变
Survivin
EPHB4
细胞凋亡
血管发育
Keywords
Oral carcinogenesis Survivin EphB4 Cell apoptosis Vascular development
分类号
R739.8 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
6种常见呼吸道感染细菌16s rRNA基因的克隆与鉴定
干咏华
李爱红
安东善
刘丹薇
欧阳红生
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2007
5
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
Survivin基因和EphB4基因在金黄地鼠颊囊癌变过程中的mRNA表达及意义
卢恕来
高文信
王云龙
车彦海
欧阳红生
《口腔医学研究》
CAS
CSCD
2005
0
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职称材料
已选择
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引证文献
统计分析
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