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中低剂量X射线照射对肿瘤相关巨噬细胞极化类型改变的影响研究
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作者 孙超男 刘羽欣 +4 位作者 程云云 吴宇晨 林纪国 王煜垚 赵刚 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第12期2465-2470,2477,共7页
目的:探讨中低剂量X射线照射对肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)极化类型改变的影响及机制。方法:采用小鼠乳腺癌4T1细胞培养上清(4T1-TCS)培养小鼠RAW264.7巨噬细胞系,诱导其成为M2型TAMs,在此基础上进行中低剂量X线照射,Griess法检测NO,流式细... 目的:探讨中低剂量X射线照射对肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)极化类型改变的影响及机制。方法:采用小鼠乳腺癌4T1细胞培养上清(4T1-TCS)培养小鼠RAW264.7巨噬细胞系,诱导其成为M2型TAMs,在此基础上进行中低剂量X线照射,Griess法检测NO,流式细胞术检测CD86和CD206,ELISA检测细胞因子IL-10和IL-12p70,免疫荧光检测iNOS和Arg-1,Western blot检测极化相关通路蛋白,观察中低剂量照射是否可以改变TAMs极化类型。结果:4T1-TCS诱导的TAM NO分泌减少,CD206、Arg-1表达升高,iNOS表达降低;低剂量照射(0.075 Gy、0.5 Gy、1 Gy)TCS-TAM,与未经照射组相比,NO分泌、CD86、CD206、Arg-1、iNOS表达均无显著变化;中等剂量(2 Gy、4 Gy、6 Gy)照射TCS-TAM,NO分泌增多,流式结果显示CD86表达升高,CD206表达减少;免疫荧光结果显示,细胞iNOS表达升高,Arg-1表达减少;ELISA结果显示细胞IL-12p70分泌增多,IL-10分泌减少;Western blot结果显示NOX2、ATMS1981*、IRF5蛋白表达均升高。结论:4T1-TCS可成功诱导巨噬细胞RAW264.7极化为M2表型,低剂量照射对TCS-TAM极化表型无显著影响,中等剂量照射可诱导TCS-TAM极化为抑制肿瘤生长的M1表型,且极化的翻转机制可能与IRF5通路有关。 展开更多
关键词 X射线 肿瘤相关巨噬细胞 极化 通路
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CAFs与肿瘤细胞的免疫逃逸机制 被引量:4
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作者 赵刚 潘咏梅 +4 位作者 黄岩松 张进 拉再提·哈扎依拜克 阿力古力·艾则孜 徐贵颖 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期653-656,共4页
肿瘤相关成纤维细胞(CAFs)是肿瘤微环境(TME)中的一种重要组成,近年研究显示,CAFs与肿瘤细胞的免疫逃逸密切相关。肿瘤细胞的免疫逃逸是指肿瘤细胞通过多种机制逃避机体免疫系统识别和攻击,使其在体内生存和增殖的现象。本文分别从巨噬... 肿瘤相关成纤维细胞(CAFs)是肿瘤微环境(TME)中的一种重要组成,近年研究显示,CAFs与肿瘤细胞的免疫逃逸密切相关。肿瘤细胞的免疫逃逸是指肿瘤细胞通过多种机制逃避机体免疫系统识别和攻击,使其在体内生存和增殖的现象。本文分别从巨噬细胞、树突状细胞、髓系来源的抑制细胞、NK细胞和T细胞5种免疫细胞综述了CAFs如何与免疫细胞相互作用,最终介导了肿瘤细胞的免疫逃逸。 展开更多
关键词 肿瘤相关成纤维细胞 免疫逃逸 肿瘤 肿瘤微环境
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长链非编码RNA牛磺酸上调基因1通过激活TGF-β1/Smad信号通路发挥促大鼠肝纤维化的作用 被引量:2
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作者 赵刚 徐贵颖 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第24期2971-2975,共5页
肝纤维化属于可逆性病变,是进一步发展为肝硬化的关键环节,也是慢性肝病共同的病理特征。肝纤维化的特征为细胞外基质(尤其是胶原)在肝脏内的大量沉积。肝星状细胞的活化在肝纤维化的发生过程中发挥关键作用,活化的肝星状细胞可分泌α-... 肝纤维化属于可逆性病变,是进一步发展为肝硬化的关键环节,也是慢性肝病共同的病理特征。肝纤维化的特征为细胞外基质(尤其是胶原)在肝脏内的大量沉积。肝星状细胞的活化在肝纤维化的发生过程中发挥关键作用,活化的肝星状细胞可分泌α-SMA、collagenⅠ、TIMP-1等[1,2]。长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)是近年来RNA领域的研究热点之一,其可通过多种机制调控基因表达,牛磺酸上调基因(taurine up-regulated gene 1,TUG1)是lncRNA的重要成员之一,是缺氧引起的肺纤维化调节因子,也是心肌成纤维细胞-肌成纤维细胞转化的重要调节因子,但其在肝纤维化中的作用尚不清楚[3,4]。本文对肝纤维化组织和活化肝星状细胞中TUG1的表达情况及其在肝纤维化中的可能作用机制进行研究,以期为临床治疗提供依据。 展开更多
关键词 慢性肝病 可能作用机制 肝星状细胞 肝纤维化 肌成纤维细胞 肺纤维化 细胞外基质 病理特征
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肿瘤立体定向消融放疗联合免疫治疗的研究进展 被引量:1
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作者 赵刚 涂甲丁 +2 位作者 卜嘉蕊 王然玉 张书涵 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第11期2461-2464,F0003,F0004,共6页
近年来,随着放疗技术的迅速发展,特别是影像技术和计算机技术的发展,肿瘤立体定向消融放疗(SABR)实现了精准地将非常高剂量的射线传递到肿瘤局部,而对周围正常组织的损伤降到最低。SABR除了对肿瘤的直接杀伤作用外,还具有免疫调节作用,S... 近年来,随着放疗技术的迅速发展,特别是影像技术和计算机技术的发展,肿瘤立体定向消融放疗(SABR)实现了精准地将非常高剂量的射线传递到肿瘤局部,而对周围正常组织的损伤降到最低。SABR除了对肿瘤的直接杀伤作用外,还具有免疫调节作用,SABR的作用相当于原位疫苗接种的效果,导致受照射局部肿瘤释放大量肿瘤相关抗原和损伤相关模式分子等,促进了机体抗肿瘤T细胞反应,使肿瘤的免疫原性细胞死亡增加,并可能诱发抗肿瘤的远端效应。然而,肿瘤周围微环境通常处于免疫抑制状态,单独SABR的免疫调节作用很难奏效,因此,在SABR的同时引入免疫调节剂的联合治疗方案非常具有说服力。免疫调节剂可解除肿瘤周围的免疫抑制状态,从而与SABR发挥协同作用,这种协同关系已在实验室模型中得到广泛证实,目前多项早期临床试验正在进行中。 展开更多
关键词 立体定向消融放疗 免疫治疗 免疫调节剂 肿瘤
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线粒体靶向KillerRed诱导的ROS增强辐射对HeLa细胞的增殖抑制作用 被引量:1
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作者 李鑫 马云飞 +5 位作者 唐庚 韦麒 纪红池 田嘉安 申延男 王志成 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期718-723,891,共7页
目的:构建线粒体靶向KillerRed(KR)重组表达载体,探讨可见光照射诱导活性氧(ROS)生成规律及其增强电离辐射对HeLa细胞的增殖抑制作用。方法:利用基因重组技术构建线粒体靶向重组载体plxspflag-Sarm1-KR和plxsp-flag-Sarm1-mCherry。将... 目的:构建线粒体靶向KillerRed(KR)重组表达载体,探讨可见光照射诱导活性氧(ROS)生成规律及其增强电离辐射对HeLa细胞的增殖抑制作用。方法:利用基因重组技术构建线粒体靶向重组载体plxspflag-Sarm1-KR和plxsp-flag-Sarm1-mCherry。将宫颈癌HeLa细胞分为对照组、plxsp-flag组、plxsp-flag-Sarm1-KR组、4Gy组、plxsp-flag+4Gy组和plxsp-flag-Sarm1-KR+4Gy组。细胞转染24h后,利用荧光显微镜检测mCherry蛋白和细胞色素C氧化酶Ⅳ(COXⅣ)蛋白表达水平;可见光照射后利用DCFH-DA探针检测平均荧光强度(MFI),表示ROS生成水平;4Gy X射线照射后,利用CCK-8试剂盒检测细胞增殖活性。结果:构建载体经测序鉴定并与GenBank序列比对,表明线粒体靶向融合表达载体plxsp-flag-Sarm1-KR(mCherry)构建成功。转染HeLa细胞后,荧光显微镜下可见mCherry蛋白与线粒体示踪COXⅣ蛋白具有相同的定位。ROS生成水平,对照组和plxsp-flag组在可见光照射10、30和60min后掺入探针,掺入探针10、30和60min后MFI无明显变化(P>0.05);plxsp-flag-Sarm1-KR组MFI呈时间依赖性增加,与对照组比较,plxsp-flag-Sarm1-KR组可见光照射10和30min后掺入探针,掺入探针60min后MFI明显增加(P<0.05);可见光照射60min后掺入探针,掺入探针30和60min后plxsp-flag-Sarm1-KR组MFI明显降低(P<0.05)。与对照组比较,plxsp-flag组细胞增殖活性无明显变化(P>0.05),10和24h时plxsp-flag-Sarm1-KR组细胞增殖活性明显降低(P<0.05),10h时4Gy组和plxsp-flag+4Gy组细胞增殖活性明显降低(P<0.01),10、24和48h时plxsp-flagSarm1-KR+4Gy组细胞增殖活性明显降低(P<0.05或P<0.01);与plxsp-flag-Sarm1-KR组和4Gy组比较,plxsp-flag-Sarm1-KR+4Gy组细胞增殖活性明显降低(P<0.05)。结论:成功构建线粒体靶向融合表达载体,所介导的KR蛋白可以诱导ROS产生,并且增强电离辐射对HeLa细胞的增殖抑制作用。 展开更多
关键词 线粒体 活性氧 KillerRed 电离辐射 细胞增殖
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NKT细胞与肝纤维化的研究进展
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作者 吴宇晨 刘羽欣 赵刚(指导) 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期1768-1772,共5页
自然杀伤T细胞(NKT)是一类具有NK细胞受体和T细胞受体且显示NK细胞和T细胞两方面性质的T细胞亚群,NKT将先天性免疫应答和获得性免疫应答连接起来,限制性识别CD1d-糖脂类抗原,活化后迅速分泌大量细胞因子从而调节机体的免疫应答。人体的... 自然杀伤T细胞(NKT)是一类具有NK细胞受体和T细胞受体且显示NK细胞和T细胞两方面性质的T细胞亚群,NKT将先天性免疫应答和获得性免疫应答连接起来,限制性识别CD1d-糖脂类抗原,活化后迅速分泌大量细胞因子从而调节机体的免疫应答。人体的肝脏内富含NKT细胞,因此,NKT细胞在肝脏中的作用引起了人们的广泛兴趣。本文总结了近年来NKT细胞在肝纤维化发生发展中的免疫学研究进展。 展开更多
关键词 自然杀伤T细胞 肝纤维化 免疫
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电离辐射对沉默ATRX的HeLa细胞DNA损伤修复的影响 被引量:1
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作者 唐庚 史耀挺 +6 位作者 孔维轩 柯希扬 李成想 邱禹淇 于雷 杨艳明 王志成 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期981-985,I0001,共6页
目的:靶向沉默宫颈癌HeLa细胞中α-地中海贫血/精神发育迟滞综合征X染色相关蛋白(ATRX),检测电离辐射对ATRX、γH2AX和Rad51蛋白表达及γH2AX和Rad51焦点数的影响,探讨ATRX参与辐射后HeLa细胞DNA损伤修复的作用。方法:3条ATRX-shRNA和... 目的:靶向沉默宫颈癌HeLa细胞中α-地中海贫血/精神发育迟滞综合征X染色相关蛋白(ATRX),检测电离辐射对ATRX、γH2AX和Rad51蛋白表达及γH2AX和Rad51焦点数的影响,探讨ATRX参与辐射后HeLa细胞DNA损伤修复的作用。方法:3条ATRX-shRNA和阴性对照(Control-shRNA)的慢病毒载体转染293T细胞,收集慢病毒并感染HeLa细胞,利用puromycin筛选获得稳定沉默ATRX的细胞系,分别命名为shA1-HeLa、shA2-HeLa、shA3-HeLa和shCon-HeLa,采用Westernblotting法检测沉默ATRX效率以及电离辐射后ATRX、γH2AX和Rad51蛋白的表达,采用免疫荧光技术观察shCon-HeLa和shA1-HeLa组中γH2AX和Rad51焦点并计数其数量。结果:shCon-HeLa细胞中可见ATRX蛋白表达,而shA1-HeLa、shA2-HeLa和shA3-HeLa细胞中均无ATRX蛋白表达,表明沉默效率较高。在2和8Gy剂量照射后1、6和24h,shCon-HeLa组ATRX蛋白表达量逐渐升高,24h时表达量最高,且8Gy照射后1、6和24h表达量均较高。4Gy照射后0~6h,与shCon-HeLa组比较,shA1-HeLa组γH2AX焦点数在1h明显升高(P<0.05),而后逐渐降低,但在6h焦点数仍明显高于shCon-HeLa组(P<0.01);Rad51焦点数与γH2AX焦点数变化相一致,与shCon-HeLa组比较,shA1-HeLa组Rad51焦点数在1h明显升高(P<0.05),在6h时shA1-HeLa焦点数仍明显高于shCon-HeLa组(P<0.01)。4Gy照射后0~16h,shA1-HeLa组细胞中γH2AX和Rad51蛋白表达量均较shCon-HeLa组增加。结论:成功获得稳定沉默ATRX的HeLa细胞模型,电离辐射可诱导ATRX蛋白表达量增加,且沉默ATRX的HeLa细胞中γH2AX和Rad51焦点数及蛋白表达量均高于对照组,提示ATRX参与了辐射诱导的DNA损伤修复过程。 展开更多
关键词 电离辐射 α-地中海贫血/精神发育迟滞综合征X染色相关蛋白 γH2AX蛋白 Rad51蛋白 DNA损伤
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